2019-2020學(xué)年高中生物 專題綜合測評2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（含解析）新人教版選修1

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1、專題綜合測評(二)　微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 (滿分：100分　時間：90分鐘) 一、選擇題(每題2分，共25題，共50分) 1．有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是(　　) A．任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子 B．碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素 C．微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受到溫度、pH、氧、滲透壓等的影響 D．營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好 C　[培養(yǎng)基中碳源和氮源必須具有一定比例，但含量最多的元素不應(yīng)是碳元素，應(yīng)是氧元素。營養(yǎng)物質(zhì)的濃度并不是越高越好，濃度過高會導(dǎo)致培養(yǎng)物細(xì)胞失水。] 2．平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是(　　

2、) A．接種時再拿起來方便 B．在皿底上標(biāo)記日期等方便 C．正著放置容易破碎 D．防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染 D　[平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。] 3．微生物(除病毒外)需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì)，并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列有關(guān)微生物營養(yǎng)的說法，正確的是(　　) A．纖維素分解菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的 B．在纖維素分解菌生長的培養(yǎng)基中只需碳源、氮源、水、無機(jī)鹽即可正常生長 C．培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對微生物的生長越有利 D．生長因子是微生物生長必需的，而微生物本身合成這些物質(zhì)的能力往往不足 D　[纖維素分解菌是異養(yǎng)型

3、微生物，其碳源為有機(jī)物，如纖維素等。硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型微生物，其碳源物質(zhì)為CO2，因此A錯誤；纖維素分解菌的培養(yǎng)基中需加入維生素做生長因子，才能正常生長，因此B錯誤；培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水，將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象，對生長不利，因此C錯誤。] 4．微生物培養(yǎng)是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù)，下列相關(guān)敘述正確的是(　　) A．病毒和細(xì)菌的培養(yǎng)基成分相同 B．平板劃線法中的“線”是連續(xù)的、不分區(qū)域的 C．微生物培養(yǎng)基中并不是都必須添加碳源或氮源 D．在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒 C　[病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)才能進(jìn)行生命活動

4、，如可用活雞胚培養(yǎng)病毒；平板劃線法每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，劃線是分區(qū)域的；微生物種類不同，對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同，應(yīng)根據(jù)所培養(yǎng)微生物的需要確定培養(yǎng)基的成分；對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行滅菌，而不是消毒。] 5．稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋 B．需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面 C．不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 D．對培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理 C　[只有菌液稀釋到一定程度后，在固體培養(yǎng)基表面才能形成單個的菌落，否則可能會出現(xiàn)兩個或兩個以上的細(xì)菌共同形成一個

5、菌落，或菌落出現(xiàn)重疊。] 6．用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(　　) ①可以用相同的培養(yǎng)基?、诙夹枰褂媒臃N針進(jìn)行接種?、鄱夹枰诨鹧媾赃M(jìn)行接種?、芏伎梢杂脕碛嫈?shù)活菌 A．①②　　　　 B．③④ C．①③ D．②④ C　[平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基；平板劃線法使用接種針進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法使用涂布器進(jìn)行操作；純化時，要進(jìn)行無菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基；平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)。] 7．將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 ℃恒溫箱的目的是(　　) A．對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用 B．對比分析培

6、養(yǎng)基是否被雜菌污染 C．沒必要放入未接種的培養(yǎng)基 D．為了下次接種時再使用 B　[對未接種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，起到對照作用，可確定培養(yǎng)基是否被雜菌污染。] 8．下面是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為1、2、3、4、5。下列敘述正確的是(　　) A．在五個區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌 B．劃線操作時完全打開皿蓋，劃完立即蓋上 C．接種時不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的 D．第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要連接起來，以便比較前后的菌落數(shù) C　[在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌；進(jìn)行劃線操作時，左手將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入

7、平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋；注意接種時不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的；第1區(qū)和第5區(qū)的劃線不能相連。] 9．鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中碳源為(　　) A．CMC－Na B．木聚糖 C．纖維素 D．裂解酶 A　[分離纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中，加入纖維素粉，而鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中加入的是纖維素鈉(CMC－Na)。] 10．固氮菌可以從豆科植物的根瘤中分離出來，有關(guān)說法錯誤的是(　　) A．選用大且紅潤的豆科植物根瘤 B．分離培養(yǎng)固氮菌的關(guān)鍵是殺死表面雜菌 C．因材料過大，不能采用平板培養(yǎng)基分離技術(shù) D．可以利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行純化 C　[題目中的固氮

8、菌應(yīng)是根瘤菌?？梢栽谌钡呐囵B(yǎng)基上選擇培養(yǎng)，也可以利用瓊脂平板劃線法進(jìn)行分離。當(dāng)然，殺死根瘤表面雜菌，將內(nèi)部根瘤菌制成菌落是實驗的關(guān)鍵。] 11．某細(xì)菌培養(yǎng)至對數(shù)期，當(dāng)細(xì)菌數(shù)目為105個/mL時，開始計時，90 min后細(xì)菌數(shù)目為1.6×106個/mL。試問再經(jīng)過多久，細(xì)菌數(shù)目會達(dá)到6.4×106個/mL(　　) A．30 min B．45 min C．60 min D．90 min B　[按公式Nt＝N0×2t，則1.6×106＝105×2t，2t＝16，t＝4。即細(xì)菌由105個/mL→1.6×106個/mL，共繁殖了4代，每個繁殖周期為＝22.5 min。仍按此公式可知，由1.6×

9、106個/mL→6.4×106個/mL，繁殖了2代，共需2×22.5＝45 min。] 12．下列操作需要在火焰旁進(jìn)行的是(　　) ①土壤取樣　②稱取土壤?、巯♂屚寥廊芤骸、芡坎计桨濉、菸⑸锏呐囵B(yǎng) A．①②③④⑤ B．②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④ D　[實驗操作過程要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作，除實驗空間必須消毒外，每個操作步驟都必須在無菌區(qū)進(jìn)行。土壤的稱取、溶液的稀釋、涂布平板都需要在酒精燈火焰旁的無菌區(qū)(或接種箱內(nèi)的酒精燈火焰旁)完成，以防止雜菌污染。] 13．在做分離分解尿素的細(xì)菌實驗時，一同學(xué)從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只篩選出大約50個

10、菌落。該同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有(　　) ①土樣不同?、谂囵B(yǎng)基被污染　③操作失誤?、軟]有設(shè)置對照 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ A　[實驗結(jié)果不同，最可能的原因是土樣不同，其次是操作失誤或培養(yǎng)基被污染，而與是否設(shè)置對照沒有關(guān)系。] 14．關(guān)于土壤中細(xì)菌的分離，下列正確的操作步驟是(　　) ①土壤取樣?、诜Q取10 g土壤，加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中?、畚?.1 mL進(jìn)行平板涂布?、芤来蜗♂屩?01、102、103、104、105、106、107倍的稀釋液 A．①→②→③→④ B．①→③→②→④ C．①→②→④→③ D．①→④→②→③ C　[在分離土

11、壤中某種細(xì)菌時，應(yīng)先選取土樣(10 g)，然后加無菌水獲得土壤浸出液，并進(jìn)行不同倍數(shù)稀釋，最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng)，并分離和計數(shù)。] 15．三個培養(yǎng)皿中分別加入10 mL不同的培養(yǎng)基，然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36 h后，計算菌落數(shù)，結(jié)果如下表。下列相關(guān)敘述正確的是 (　　) 培養(yǎng)皿 培養(yǎng)基成分 菌落數(shù) Ⅰ 瓊脂、葡萄糖 35 Ⅱ 瓊脂、葡萄糖、生長因子 250 Ⅲ 瓊脂、生長因子 0 A．該實驗采用的是液體培養(yǎng)基 B．該實驗采用平板劃線法接種 C．Ⅰ和Ⅲ對照，說明大腸桿菌的生長不需要生長因子 D．Ⅱ和Ⅲ對照，說明大腸桿菌的生長需要葡萄糖

12、D　[該培養(yǎng)基加入了瓊脂，故為固體培養(yǎng)基；對微生物進(jìn)行計數(shù)時宜采用稀釋涂布平板法接種，而不是平板劃線法接種；Ⅰ與Ⅲ中有葡萄糖、生長因子兩種變量，不能得出相應(yīng)結(jié)論；Ⅱ和Ⅲ對照，自變量是有無葡萄糖，說明大腸桿菌的生長需要葡萄糖。] 16．苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源 B．如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法 C．若

13、圖中④為對照實驗，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源 D．使用平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落 C　[用苯酚作為選擇培養(yǎng)基中的碳源，也是微生物的能源物質(zhì)，會影響其他微生物生長。測定培養(yǎng)液中細(xì)菌數(shù)目常采用稀釋涂布平板法。若④為對照實驗，則④中應(yīng)含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚作為唯一碳源。使用稀釋涂布平板法或平板劃線法都可以在⑥上獲得單菌落。] 17．下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(　　) A．可采用干熱滅菌法對微生物培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌 B．測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法 C．分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度 D．分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯

14、一的氮源 A　[培養(yǎng)基滅菌通常用的是高壓蒸汽滅菌法，而干熱滅菌法通常適用于玻璃器皿、金屬用具等耐高溫且不適合其他方法的物品；分離能分解尿素的細(xì)菌，用的選擇培養(yǎng)基里尿素是唯一的氮源，這樣才能分離出分解尿素的細(xì)菌。] 18．下列有關(guān)分解纖維素的微生物分離的敘述，不正確的是(　　) A．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌釋放的纖維素酶分解后會出現(xiàn)透明圈 B．在用剛果紅染色時只能先培養(yǎng)微生物再加入剛果紅，不能在倒平板時加入 C．纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法 D．纖維素酶的測定方法，一般是對所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定 B　[剛果紅染色有兩種方法，一種是先培養(yǎng)微生

15、物再加入剛果紅，另一種是在倒平板時就將剛果紅染液加入培養(yǎng)基中，然后再培養(yǎng)微生物，兩種方法各有優(yōu)缺點，但都可以應(yīng)用。] 19．下列關(guān)于纖維素分解菌分離實驗的說法，不正確的是(　　) A．通常采用剛果紅染色法篩選纖維素分解菌 B．從土壤中分離含量較多的微生物時，選擇培養(yǎng)可以省略 C．該實驗用到選擇和鑒別培養(yǎng)基 D．在用剛果紅染色法中，若將微生物培養(yǎng)在事先加入剛果紅的培養(yǎng)基上，出現(xiàn)透明圈的菌落肯定為所需菌種 D　[剛果紅能鑒別纖維素，可采用剛果紅染色法篩選纖維素分解菌；從土壤中分離含量較多的微生物時，選擇培養(yǎng)可以省略，但需要進(jìn)行鑒別培養(yǎng)；有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程

16、中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈，故出現(xiàn)透明圈的菌落不一定為所需菌種。] 20．加工橘子罐頭時采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))會產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物，不能產(chǎn)生所用酶的是(　　) A．生長在麥麩上的黑曲霉 B．生長在酸奶中的乳酸菌 C．生長在棉籽殼上的平菇 D．生長在木屑上的木霉 B　[根據(jù)題目分析可知需要的酶為纖維素酶，黑曲霉、平菇、木霉分別以分解麥麩、棉籽殼、木屑為生，故能產(chǎn)生纖維素酶，生長在酸奶中的乳酸菌不能合成纖維素酶。] 21．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微

17、生物無法生長，在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的生長，在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出(　　) A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細(xì)菌 A　[固氮微生物的生長不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源，可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長；加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細(xì)菌和放線菌，則可收獲霉菌；加入酚的培養(yǎng)基使細(xì)菌和霉菌不能正常生長，而放線菌卻能利用酚作原料合成自身產(chǎn)物。] 22．在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開，對培養(yǎng)基的要求是(　　) ①加抗生素?、诓患涌?/p>

18、生素?、奂拥亍、懿患拥亍、菁悠咸烟恰、薏患悠咸烟恰、?7 ℃恒溫箱中培養(yǎng)　⑧28～30 ℃溫度下培養(yǎng) A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦ C　[自生固氮菌有固氮功能，因此培養(yǎng)基中不需要加氮素；細(xì)菌對抗生素敏感，因此，不能加抗生素；自生固氮菌是異養(yǎng)型的，應(yīng)加葡萄糖；其生長繁殖的適宜溫度是28～30 ℃。] 23．某學(xué)者欲研究被石油污染過的土壤中的細(xì)菌數(shù)并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列有關(guān)操作錯誤的是(　　) A．利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù) B．利用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選能分解石油的細(xì)菌 C．采用稀釋涂布平板法分離菌種 D．稱取土壤和稀釋土壤溶液時

19、應(yīng)在火焰旁 A　[平板劃線法能對細(xì)菌分離純化但不能計數(shù)，通常將被石油污染過的土壤浸出液稀釋后，采用稀釋涂布平板法分離分解石油的細(xì)菌菌種，并對菌種進(jìn)行計數(shù)；篩選能分解石油的細(xì)菌只能利用以石油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；稱取土壤和稀釋土壤溶液過程中的每一步都要在火焰旁操作。] 24．現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基，已知其配制時所加的成分和含量如下表，用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物，你認(rèn)為它們適于分離(　　) 成分 KH2PO4 MgSO4·7H2O NaCl CaSO4·2H2O CaCO3 葡萄糖 純淀粉 甲培養(yǎng)基 0.02% 0.02% 0.02% 0.01% 0.

20、5% 0.5% 2% 乙培養(yǎng)基 0.02% 0.02% 0.02% 0.01% 0.5% － － A．甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌 B．甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌 C．甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌；乙培養(yǎng)基適于分離真菌 D．甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型共生細(xì)菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌 B　[固氮菌中能獨(dú)立生存的是自生固氮菌，需和其他生物結(jié)合在一起才能生存的是共生固氮菌，甲培養(yǎng)基中含有的葡萄糖和淀粉是有機(jī)物，由此推出該培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型的自生固氮菌；乙培養(yǎng)基中不含有機(jī)碳源，所以可用來分離培

21、養(yǎng)自養(yǎng)型的自生固氮菌。] 25．下表資料表明在各種培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況，(S、C、M)為簡單培養(yǎng)基，U、V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質(zhì)，問哪一種物質(zhì)細(xì)菌不能合成(　　) 培養(yǎng)基 S、C、M V＋Z U＋Y Z＋X V＋Y U＋X Y＋Z 生長狀態(tài) － ＋ － ＋ － ＋ 注：表中“＋”表示能生長，“－”表示不能生長。 A．U B．V C．Y D．Z C　[從表中可以看出，凡是能生長的均有Y，而不能生長的均無Y。因此，Y是細(xì)菌不能合成的物質(zhì)。] 二、非選擇題(共4個小題，共50分) 26．(10分)細(xì)菌莢膜的觀察是微生物形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察的基本內(nèi)容

22、之一。硅酸鹽細(xì)菌在無氮培養(yǎng)基、鉀細(xì)菌培養(yǎng)基及硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基上均能生長，形成較厚的莢膜。下表1為無氮培養(yǎng)基的配方，表2是每種培養(yǎng)基上每個稀釋度的菌落數(shù)及菌落直徑情況。請回答下列問題： 表1　無氮培養(yǎng)基的配方 葡萄糖 10.0 g K2SO4 0.2 g K2HPO4 0.2 g CaCO3 5.0 g MgSO4·7H2O 0.2 g 瓊脂 20.0 g NaCl 0.2 g － － 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1 000 mL 表2　各稀釋度平板上菌落數(shù)及菌落直徑 培養(yǎng)基種類 各稀釋度對應(yīng)的平均菌落數(shù) 菌落直徑(mm) 103 104 1

23、05 106 無氮培養(yǎng)基 32 3 2 0 1.0～2.0 鉀細(xì)菌培養(yǎng)基 36 6 4 0.6 多數(shù)小于1.5 硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基 50 8 5 1.2 多數(shù)大于2.0 (1)根據(jù)無氮培養(yǎng)基的配方可知，從物理性質(zhì)上看該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基；從功能上看，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，理由是__________________。 (2)硅酸鹽細(xì)菌能在無氮培養(yǎng)基中生長，推測該細(xì)菌具有__________________功能。 (3)為統(tǒng)計硅酸鹽細(xì)菌的數(shù)目，應(yīng)采用____________法進(jìn)行接種，該方法的所有操作都應(yīng)在___________

24、_附近進(jìn)行。 (4)進(jìn)行上述實驗的同時也設(shè)置了空白對照，空白對照的培養(yǎng)基中________________，說明培養(yǎng)基滅菌合格。根據(jù)表2中的數(shù)據(jù)可以得出，用____________培養(yǎng)基篩選硅酸鹽細(xì)菌的效果最好。 [解析]　(1)培養(yǎng)基中添加了一定的瓊脂，且該培養(yǎng)基是用來觀察菌落與測定菌落直徑的，因此該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。無氮培養(yǎng)基里不含氮源，故從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)硅酸鹽細(xì)菌能在無氮培養(yǎng)基中生長，推測該細(xì)菌具有固氮功能。(3)從“稀釋度”以及“菌落數(shù)”等信息可以分析出，硅酸鹽細(xì)菌的接種方法應(yīng)是稀釋涂布平板法，所有操作都應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。(4)為檢測培養(yǎng)基滅菌是否

25、合格，需設(shè)置空白對照：空白對照的培養(yǎng)基中無菌落長出，說明培養(yǎng)基滅菌合格。從“平均菌落數(shù)”以及“菌落直徑”可以看出，硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基篩選硅酸鹽細(xì)菌的效果最好。 [答案]　(1)固體　選擇　配制的培養(yǎng)基中無氮源　(2)固定空氣中氮?dú)獾?或固氮)　(3)稀釋涂布平板　酒精燈火焰　(4)無菌落長出　硅酸鹽細(xì)菌 27．(13分)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_____________________

26、_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是__________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：

27、振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中____________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。 [解析]　(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1 mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100＝3.8×104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1 000＝3.8×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速徹底

28、滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。 [答案]　(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107　(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落　(3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質(zhì) 28．(12分)臨床使用抗生素前，

29、有時需要做細(xì)菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。 回答下列問題： (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用________法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長，布滿平板。 (3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A___

30、_____；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B________________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明 __________________________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的 ________。 (4)根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素 ________。 [解析]　(1)實驗室中對微生物純化培養(yǎng)時，常用的接種方法有劃線法和稀釋涂布平板法。 (2)若讓已經(jīng)獲得的單個菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖，常用涂布器把稀釋的菌液均勻涂滿整個

31、平板。(3)對某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內(nèi)，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，如果在透明圈中還有菌落生存，則說明這個菌落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。 (4)通過(3)可知，在應(yīng)用時，要想殺死某致病菌，就得選擇能使該致病菌大量死亡，即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。 [答案]　(1)劃線　稀釋涂布平板 (2)涂布 (3)敏感　不敏感　該致病菌對C的敏感性比對A的弱　耐藥菌 (4)A 29．(15分)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑(含氮有機(jī)化合物)在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌(已知該除草劑在水中溶

32、解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)。 (1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行________處理。 (2)要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質(zhì)、用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點是_________________。 (3)在劃線培養(yǎng)時，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是______________________________或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長。 (4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是________，有透明帶菌落利用的氮源主要是________，據(jù)此可篩選出目的菌。 (

33、5)科研人員用放射線處理該細(xì)菌獲得兩個突變株A和B，然后對突變株A和B進(jìn)行實驗，結(jié)果如下表所示： 接種的菌種 一般培養(yǎng)基 實驗處理及結(jié)果 A 不生長 添加營養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長 B 不生長 添加營養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長 A＋B 能生長 不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長 突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長的原因是___________。突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是________________ _____________________________________________________ _________________________

34、____________________________。 [解析]　(1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理。(2)從物理性質(zhì)來看，題圖培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；從用途方面來看，該培養(yǎng)基是以含氮除草劑為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。(3)在以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上，不能降解該除草劑的細(xì)菌(除具有固氮能力的細(xì)菌外)是不能生長的。(4)含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明，菌落周圍形成透明帶是由于該除草劑被某些細(xì)菌降解導(dǎo)致的。(5)突變株A的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)乙。不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲和乙，二者混合培養(yǎng)時都能生長，最可能的原因是突變株A為突變株B提供了營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株B為突變株A提供了營養(yǎng)物質(zhì)甲。 [答案]　(1)稀釋　(2)以該除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基　(3)培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源　(4)氮?dú)狻≡摮輨?5)突變株A缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶　突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供 - 11 -