（通用版）2019版高考生物二輪復習 專題十二 教材基礎實驗 考點33 觀察類實驗和鑒定提取類實驗學案

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1、 考點33　觀察類實驗和鑒定提取類實驗 [直擊考綱]　能獨立完成“生物知識內(nèi)容表”所列的生物實驗，包括理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。 1．觀察類實驗操作流程模板 2．鑒定類實驗的操作流程模板 1．觀察類實驗 實驗名稱 細胞的 狀態(tài) 觀察對象 染色劑 生物材料(及特殊要求) 觀察DNA和RNA在細胞中的分布 死細胞 DNA和RNA的分布 吡羅紅甲基 綠染色劑 人的口腔 上皮細胞 DNA、RNA同時存在時染色劑要混合使用且現(xiàn)配現(xiàn)用 觀察線粒體 活細胞 線粒體 健

2、那綠染液 用生理鹽水配制健那綠染液，用顯微鏡觀察 觀察細胞的減數(shù)分裂 死細胞 染色體 無(為固定裝片) 蝗蟲精母細胞 低溫誘導染色體加倍 死細胞 改良苯酚品紅染液 洋蔥根 尖分生 區(qū)細胞 染色前需漂洗干凈 觀察細胞的有絲分裂 死細胞 龍膽紫溶 液(或醋酸 洋紅液) 用顯微鏡觀察 多種多樣的細胞 活或死 細胞 細胞 無(無需染色) 酵母菌細胞、水綿細胞、葉的 保衛(wèi)細胞、魚的紅細胞等 觀察葉綠體 活細胞 葉綠體 蘚類的葉(或菠菜葉、黑藻葉) 觀察植物細胞的質(zhì)壁分離與復原 活細胞 紫色中央液泡的大小 和原生質(zhì)層的位置 紫色洋蔥鱗片

3、葉外表皮細胞 2.鑒定提取類實驗 實驗名稱 試劑 顏色 生物材料 備注 淀粉的鑒定 碘液 藍色 脫色的葉片等 若材料有顏色，需先脫色 還原糖的鑒定 斐林試劑 磚紅色 沉淀 蘋果或梨勻漿等 現(xiàn)配現(xiàn)用、水浴加熱 脂肪的鑒定 蘇丹Ⅲ(或Ⅳ)染液 橘黃(或紅)色 花生種子切片(或勻漿) 需用高倍鏡觀察(勻漿不需用高倍鏡觀察) 蛋白質(zhì)的鑒定 雙縮脲試劑 紫色 豆?jié){、稀蛋清等 先加A液，后加B液，搖勻使用 綠葉中色素的提取和分離 提取液：無水乙醇；分離液：層析液 ①胡蘿卜素：橙黃色； ②葉黃素：黃色； ③葉綠素a：藍綠色； ④葉綠素b：

4、黃綠色 新鮮的綠葉(如菠菜葉) 加入二氧化硅是為了研磨得更充分；碳酸鈣可防止在研磨中色素被破壞 DNA的粗提取和鑒定 二苯胺試劑 藍色 雞血細胞等 沸水浴加熱 5 min 3.關注洋蔥在實驗中的“一材多用” 取材部位 實驗名稱 取材原因 葉 鱗片葉 植物細胞的質(zhì)壁分離和復原 外表皮細胞含紫色大液泡 使用高倍顯微鏡觀察細胞的多樣性 細胞較大，外表皮細胞有大液泡，內(nèi)表皮細胞有明顯的細胞核 觀察DNA和RNA在細胞中的分布 內(nèi)表皮細胞近于無色 管狀葉 葉綠體中色素的提取和分離 根 觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂 材料易得，且分生區(qū)細胞分裂

5、能力強，染色體數(shù)目少，易于觀察 低溫誘導植物染色體數(shù)目的變化 材料易得，且低溫(4 ℃)下根尖也能分裂生長，誘導染色體變異率較高 4.辨析有關顏色反應類實驗的五種顏色 顏色 原理 紅 ①還原糖＋斐林試劑磚紅色沉淀 ②脂肪＋蘇丹Ⅳ染液→紅色 ③RNA＋吡羅紅溶液→紅色 ④染色體(質(zhì))＋醋酸洋紅液→紅色 黃 ①脂肪＋蘇丹Ⅲ染液→橘黃色 ②葉綠體中色素分離的濾紙條中：胡蘿卜素→橙黃色，葉黃素→黃色 綠 ①DNA＋甲基綠染液→綠色②線粒體＋健那綠染液→藍綠色 ③酒精＋橙色的重鉻酸鉀溶液灰綠色 ④葉綠體中色素分離的濾紙條中：葉綠素b→黃綠色，葉綠素a→藍綠色

6、 藍 ①淀粉＋碘液→藍色 ②DNA＋二苯胺試劑藍色 紫 ①染色體(質(zhì))＋龍膽紫溶液→紫色 ②蛋白質(zhì)＋雙縮脲試劑→紫色 5.常用試劑的種類及作用 試劑 體積分數(shù)或質(zhì)量濃度 作用原理 相關實驗 酒精 50% 洗去浮色(溶劑) 脂肪的鑒定 70% 消毒 微生物的培養(yǎng) 95% 解離 觀察細胞的有絲分裂；低溫誘導染色體加倍 100% 溶解、提取色素 葉綠體色素的提取和分離 鹽酸 5% 營造酸性環(huán)境 探究pH對酶活性的影響 8% 改變細胞膜通透性，使染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分離 觀察DNA和RNA在細胞中的分布 15% 解離 觀察細胞的

7、有絲分裂；低溫誘導染色體加倍 NaOH 0.1 g/mL 斐林試劑、雙縮脲試劑的成分 檢測還原糖、蛋白質(zhì) 5% 營造堿性環(huán)境 探究pH對酶活性的影響 0.1% 遇酚酞呈紫紅色 探究細胞表面積與體積的關系 CuSO4 0.05 g/mL 斐林試劑的成分 檢測還原糖 0.01 g/mL 雙縮脲試劑的成分 檢測蛋白質(zhì) 6.常見疑難辨析 (1)在觀察類實驗中低倍鏡和高倍鏡的使用情況如何？除觀察類實驗外，還有什么實驗中也用到了顯微鏡呢？ 提示　觀察類實驗中除了“觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原”使用低倍鏡即可外，其余均需要使用高倍顯微鏡；還有“脂肪的切片法鑒定”“

8、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化”也用到了顯微鏡。 (2)“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”實驗中能否選用哺乳動物的成熟紅細胞？為什么？ 提示　不能。因為哺乳動物的成熟紅細胞中無細胞核和眾多細胞器，幾乎不含有DNA和RNA。 (3)能否用觀察葉綠體的材料來觀察線粒體？為什么？ 提示　不能。因為葉綠體中的色素的顏色會掩蓋線粒體被健那綠染色后的顏色變化。 (4)在“觀察細胞的有絲分裂”實驗中為什么應注意觀察呈正方形的根尖分生區(qū)細胞？ 提示　呈正方形的根尖分生區(qū)細胞分裂旺盛，而呈長方形的細胞可能是伸長區(qū)或成熟區(qū)的細胞，沒有分裂能力。 (5)在觀察減數(shù)分裂實驗中為什么不宜選擇動物的

9、卵巢或植物的雌蕊？ 提示　因為雄配子的產(chǎn)生數(shù)量遠遠多于雌配子，更易觀察到減數(shù)分裂。 (6)選用菠菜葉觀察葉綠體時，為什么要取稍帶些葉肉細胞的下表皮？ 提示　因為靠近下表皮的葉肉細胞中的葉綠體較大而數(shù)目較少。 (7)為什么應選取成熟的植物細胞觀察質(zhì)壁分離與復原實驗？ 提示　因其含有中央大液泡，易于發(fā)生質(zhì)壁分離與復原的實驗現(xiàn)象。 (8)斐林試劑能否用于蛋白質(zhì)的鑒定？為什么？ 提示　不能，因為用于蛋白質(zhì)鑒定的雙縮脲試劑B液是0.01 g/mL的CuSO4溶液，兩種試劑的本質(zhì)不同。斐林試劑的本質(zhì)是新制的Cu(OH)2，故應將甲液和乙液等量混勻后使用，而雙縮脲試劑的本質(zhì)是堿性條件下的Cu2

10、＋，故應先加A液1 mL造成堿性環(huán)境，再加B液4滴搖勻使用。 (9)脂肪的鑒定是否一定要借助顯微鏡？ 提示　不一定，因為脂肪的鑒定有兩個方案，可磨碎后在試管內(nèi)鑒定，肉眼觀察即可，也可做切片借助顯微鏡觀察。 (10)綠葉中色素的提取和分離有何區(qū)別？ 提示　前者用無水乙醇提取法，原理是色素能夠溶于有機溶劑無水乙醇中；而后者用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的色素隨層析液在濾紙條上擴散得快，反之擴散得慢。 題組一　觀察類實驗 1．(2018·濱海新區(qū)模擬)洋蔥是常用的生物學實驗材料。下列有關實驗中不能達到預期目的的是(　　) A．用洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮作實驗

11、材料，觀察DNA、RNA在細胞中的分布 B．用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料，觀察植物細胞的質(zhì)壁分離 C．用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料，觀察細胞中的線粒體 D．用洋蔥根尖作為實驗材料，觀察染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞 答案　C 解析　洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮有細胞核，無紫色的大液泡，不影響顏色，可以作實驗材料，觀察DNA、RNA在細胞中的分布，A正確；紫色洋蔥鱗片葉外表皮含有紫色的大液泡，觀察原生質(zhì)層的變化較容易，可以作為實驗材料，觀察植物細胞的質(zhì)壁分離，B正確；觀察細胞中的線粒體，需要染色，紫色洋蔥鱗片葉外表皮含有紫色的大液泡，影響觀察效果，故觀察細胞中的線粒體不能用紫色洋蔥鱗片葉外表

12、皮作為實驗材料，C錯誤；洋蔥根尖具有分生組織，能進行細胞分裂，可以作為觀察染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞的實驗材料，D正確。 2．(2018·榆林一模)下列用顯微鏡觀察的實驗中，細胞不需要染色的是(　　) A．觀察DNA和RNA在口腔上皮細胞中的分布 B．觀察口腔上皮細胞中的線粒體 C．觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂 D．觀察洋蔥表皮細胞的質(zhì)壁分離與復原 答案　D 解析　觀察DNA和RNA在口腔上皮細胞中的分布，需要用吡羅紅甲基綠染色劑染色，A錯誤；觀察口腔上皮細胞中的線粒體，需要用健那綠染液染色，B錯誤；觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂，需要用龍膽紫溶液或者醋酸洋紅液使得染色體著色，C錯誤；觀

13、察洋蔥表皮細胞的質(zhì)壁分離與復原，由于洋蔥表皮細胞的液泡有色素，因此不需要染色，可直接觀察，D正確。 3．(2018·保定期末)只有在保持細胞活性的條件下，才能顯示細胞中某物質(zhì)或結(jié)構的實驗是(　　) A．蘇丹Ⅲ染色觀察花生種子子葉細胞中的脂肪 B．健那綠染色觀察動物細胞的線粒體 C．龍膽紫染色觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞的有絲分裂 D．用甲基綠、吡羅紅染液染色觀察動物細胞中的DNA和RNA的分布 答案　B 解析　觀察花生子葉中脂肪時，無需保持細胞活性，A錯誤；健那綠是活性染料，因此只有在保持細胞活性的條件下才能觀察到線粒體被染成藍綠色，B正確；觀察細胞有絲分裂實驗，解離時已經(jīng)用鹽酸和酒精

14、將細胞殺死，C錯誤；觀察DNA和RNA在細胞內(nèi)的分布實驗中，已經(jīng)用鹽酸將細胞殺死，使細胞膜喪失選擇透過性，D錯誤。 題組二　鑒定提取類實驗 4．(2018·廣東模擬)下列有關組織細胞中化合物鑒定實驗的敘述，正確的是(　　) A．蛋白酶和蛋白質(zhì)的混合溶液中加入雙縮脲試劑后，會產(chǎn)生紫色反應 B．將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)無色，水浴加熱后有磚紅色沉淀生成 C．觀察DNA與RNA在細胞中分布的實驗中，用鹽酸處理有利于DNA與吡羅紅結(jié)合 D．酵母菌進行有氧呼吸和無氧呼吸的產(chǎn)物都能用酸性重鉻酸鉀溶液來鑒定 答案　A 解析　蛋白酶本身就是蛋白質(zhì)，因此用雙縮脲試劑鑒定會產(chǎn)生紫色反應，

15、A正確；斐林試劑本身具有藍色，因此將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)藍色，B錯誤；觀察DNA與RNA在細胞中分布的實驗中，用鹽酸處理有利于DNA與甲基綠結(jié)合，C錯誤；酸性重鉻酸鉀溶液只能用于鑒定酒精，酵母菌有氧呼吸不產(chǎn)生酒精，D錯誤。 5．(2018·旌陽區(qū)校級模擬)以下關于實驗步驟的敘述(試劑、藥品的濃度和用量符合要求)，正確的是(　　) A．鑒定蛋白質(zhì)：豆?jié){→CuSO4溶液→NaOH溶液→觀察顏色變化 B．鑒定還原糖：蘋果勻漿→CuSO4溶液→NaOH溶液→水浴加熱→觀察顏色變化 C．提取綠葉中的色素：剪碎綠葉→SiO2＋CaCO3→無水乙醇→研磨→過濾 D．觀察DNA和RNA

16、在細胞中的分布：制片→解離→漂洗→染色→顯微鏡觀察 答案　C 解析　蛋白質(zhì)的鑒定應先加NaOH溶液，再加CuSO4溶液，A錯誤；用斐林試劑鑒定還原糖時，應將NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合使用，B錯誤；提取綠葉中的色素的流程為剪碎綠葉→SiO2＋CaCO3→無水乙醇→研磨→過濾，C正確；觀察DNA和RNA在細胞中的分布：取口腔上皮細胞涂片→烘干→水解→沖洗涂片→染色→觀察，D錯誤。 6．(2017·石家莊期末)現(xiàn)提供可配制斐林試劑的溶液：甲液(0.1 g·mL－1的NaOH溶液)、乙液(0.05 g·mL－1的CuSO4溶液)以及蒸餾水，如果充分利用上述試劑及必需的實驗用具，可靈活性地鑒別出下列哪些物質(zhì)(　　) ①葡萄糖?、谡崽恰、畚傅鞍酌浮、躌NA A．只有① B．①和② C．①和③ D．②、③和④ 答案　C 解析　①葡萄糖是還原糖，可以用斐林試劑鑒定，所以用上述試劑可以檢測，①正確；②蔗糖是非還原糖，不能用斐林試劑鑒定，②錯誤；胃蛋白酶是蛋白質(zhì)，可以用雙縮脲試劑鑒定，可以用上述試劑鑒定，但使用時需要將斐林試劑的乙液稀釋為質(zhì)量分數(shù)為0.01 g·mL－1，③正確；以上試劑只能鑒定還原糖和蛋白質(zhì)，而不能鑒定RNA，④錯誤。 8