水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料課件

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1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),實(shí)驗(yàn)一 魚蝦飼料的總消化率及其蛋白質(zhì)消化率的測定,【,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?】,掌握用外源指示劑,Cr,2,O,3,間接測量魚、蝦飼料消化率的基本方法。,【,實(shí)驗(yàn)原理和基礎(chǔ)知識,】,與飼料均勻混合的外源指示劑,Cr,2,O,3,完全不被動(dòng)物吸收而隨糞便排出。根據(jù)指示劑及蛋白質(zhì),(,或其他營養(yǎng)成分,),在食物及糞便中的含量變化。飼料的總消化率和蛋白質(zhì)的消化率由如下兩式給出：,飼料總消化率：,D(,)=1,B,B,、,100,蛋白質(zhì)消化率：,D,、,(,)=1-(A,、,A,B,B,、,),

2、100,A,、,A,、分別為飼料和糞便中的粗蛋白含量。,B,、,B,、分別為飼料和糞便中的,Cr,2,O,3,含量。,【,實(shí)驗(yàn)用品,】,1,、實(shí)驗(yàn)魚可根據(jù)實(shí)際情況選擇實(shí)驗(yàn)魚的種類，但易于馴化、習(xí)慣實(shí)驗(yàn)環(huán)境的魚類,(,如：金魚、錦鯉、羅非魚等,),較好。體重,20,25g,，每試驗(yàn)組,10,尾。,2,、水族箱每試驗(yàn)組配,50,100L,容積的水族箱,2,個(gè)，一個(gè)作投飼槽、一個(gè)作排泄槽。,3,、充氧設(shè)備每水族箱配微型充氣泵一臺。,4,、集糞工具每組配虹吸管,1,支、漏斗,2,個(gè)。,5,、小撈網(wǎng),1,個(gè)。,6,、,100,目分樣篩,1,個(gè)。,【,實(shí)驗(yàn)操作步驟,】,1,、試驗(yàn)飼料的制備,試驗(yàn)飼料可直接

3、用市售魚、蝦飼料，經(jīng)重新粉碎后使用。所有干性原料要經(jīng)粉碎，并通過,100,目篩?；瘜W(xué)純,Cr,2,O,3,也要經(jīng)過,100,目篩。按每千克干飼料的,1,準(zhǔn)確稱取,Cr,2,O,3,，與少量的干性原料混合，分四次逐步擴(kuò)大到全部干性飼料組分，充分混合均勻，混合操作可在大白搪瓷盆進(jìn)行。因,Cr,2,O,3,為綠色，所以從盆壁上是否留有團(tuán)狀綠色痕跡來判斷混合的均勻程度。混合均勻程度決定試驗(yàn)的成敗。平均每組制作,200g,飼料。,2,、投飼與糞便采集,把試驗(yàn)魚置于投飼槽、充氣，用試驗(yàn)飼料暫養(yǎng),3,天。每天清理糞便及殘餌，并適量換水。停食數(shù)小時(shí)后，再一次投足量試驗(yàn)飼料讓魚群飽食。然后用撈網(wǎng)把魚捕到條件完全

4、相同的排泄槽開始觀察排糞，排糞后及時(shí)用虹吸管收取，經(jīng)過濾，收集烘干，保存分析用。虹吸過程盡量不要把條狀糞便弄破。,為了獲得可靠的結(jié)果，通常要同時(shí)作三個(gè)重復(fù)組，或把排糞后的魚再移回投飼槽喂飽，再移到排泄槽，再收集糞便，如此重復(fù)兩次。但這里僅為了掌握基本方法、收集足夠供分析的糞便即可,(,約,300mg,干品,),。,3,、樣品分析,（,1,）飼料中干物質(zhì)的測定。,（,2,）飼料中灰分的測定。,（,3,）飼料中粗蛋白質(zhì)的測定。,（,4,）,Cr,2,O,3,的濕式灰化定量法。,4,、消化率的計(jì)算及不同實(shí)驗(yàn)組間的結(jié)果比較：,根據(jù)凱氏定氮法測得的飼料及糞便的蛋白質(zhì)水平，以及以上獲得,Cr,2,O,3,

5、數(shù)據(jù)，用上述計(jì)算公式，便可算出飼料的總消化率及蛋白質(zhì)消化率。因?yàn)椴煌囼?yàn)組所用的試驗(yàn)飼料一樣，試驗(yàn)魚及試驗(yàn)條件相似，方法相同，所以其結(jié)果有很強(qiáng)的可比性。各試驗(yàn)組可將試驗(yàn)結(jié)果與其他組的結(jié)果進(jìn)行比較，并予討論。,【,作業(yè)與思考,】,1,、試驗(yàn)魚的暫養(yǎng)應(yīng)注意哪些方面？,實(shí)驗(yàn)二飼料中干物質(zhì)的測定,【,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?】,測定飼料中干物質(zhì)質(zhì)量,【,實(shí)驗(yàn)原理和基礎(chǔ)知識,】,飼料中營養(yǎng)物質(zhì)，包括有機(jī)物質(zhì)和無機(jī)物質(zhì)均存在于飼料的干物質(zhì)中。飼料中干物質(zhì)含量的多少與飼料的營養(yǎng)價(jià)值及家畜的采食量均有密切關(guān)系。風(fēng)干飼料例如各種籽實(shí)飼料、油餅、糠麩、藁秕、青干草、魚粉、血粉等可以直接在,100,105,溫度下烘干，烘去飼料中

6、蛋白質(zhì)、淀粉及細(xì)胞膜上的吸附水，得到風(fēng)干飼料的干物質(zhì)量百分比。含水分多的新鮮飼料如青飼料、青貯飼料、多汁飼料以及畜類和鮮肉等均可先測定初水分后制成半干樣本；再在,100,105,溫度下烘干，測得半干樣本中的干物質(zhì)量，而后計(jì)算新鮮飼料或鮮糞或肉中干物質(zhì)量百分比。,【,實(shí)驗(yàn)用品,】,一、實(shí)驗(yàn)器材,1,、一個(gè)學(xué)生做,2,個(gè)測定所需儀器數(shù)量,稱量瓶：鋁質(zhì)、帶蓋、容量為,30,毫升,2,個(gè),干燥器：,30,厘米直徑,1,個(gè),坩堝鉗：,1,把,精密天平：,1,架,藥匙：,1,個(gè),小毛刷：,1,把,2,、公用儀器,鼓風(fēng)烘箱：,100,105 1,臺,二、試劑,硅膠,500,克,凡士林,10,克,以上均為干燥

7、器用,【,實(shí)驗(yàn)操作步驟,】,1,、用普通天平稱出,200,300,克剛采集的樣品,(,實(shí)驗(yàn)魚的糞便,),，放入,60,70,烘箱中，,5,6,個(gè)小時(shí)后取出。磨碎，制得半干樣本。,2,、將洗凈的稱量瓶放在,100,105,的鼓風(fēng)烘箱內(nèi)，開蓋烘,1,小時(shí)。用坩堝鉗取出稱量瓶，并移入干燥器中冷卻約,30,分鐘后，稱重,(,稱量瓶放入烘箱時(shí)須啟蓋，冷卻和稱重時(shí)須嚴(yán)蓋,),。,3,、在稱量瓶中稱取,2,克風(fēng)干樣本,(,實(shí)驗(yàn)飼料,),和半干樣本。將稱量瓶和樣本放入,100,105,烘箱內(nèi)，將瓶蓋揭開少許。,4,、樣本在烘箱內(nèi)烘,5,6,小時(shí)后緊蓋瓶蓋，移入干燥器中，冷卻,30,分鐘，進(jìn)行第一次稱重。,5,

8、、按照上述方法，繼續(xù)將稱量瓶放入烘箱內(nèi)，烘,1,小時(shí)后進(jìn)行第二次稱重，直至前后兩次稱重的差數(shù)在,0.002,克。,6,、干物質(zhì)計(jì)算值采用數(shù)次稱重的最低值。,7,、稱量瓶中的干物質(zhì)保留作測定粗蛋白。,【,結(jié)果計(jì)算與方法,】,1,、風(fēng)干樣本,(,或半干樣本,),中,105,干物質(zhì),式中：,W,1,=,稱量瓶重,(,克,),W,2,=,稱量瓶重,(,克,)+,風(fēng)干樣本重,(,克,),W=W,2,-W,1,=,風(fēng)干樣本重,(,克,),W,3,=,稱量瓶重,(,克,)+105,干物質(zhì)重,(,克,),【,注意事項(xiàng),】,本試驗(yàn)所用鼓風(fēng)烘箱測定飼料樣本中干物質(zhì)的方法，并不是絕對正確的。有以下幾個(gè)可能，會(huì)引起測

9、定結(jié)果的誤錯(cuò)。,1,、加熱時(shí)樣本中揮發(fā)性物質(zhì)可能與樣本中水分一起損失，例如，青貯料中的揮發(fā)性脂肪酸。,2,、樣本中有些物質(zhì)如脂肪，在加熱時(shí)可能在空氣中氧化，使樣本重量不但不減少，反而會(huì)增加。在這種情況下，測定樣本中干物質(zhì)需在真空烘箱或裝有二氧化碳的特殊烘箱中進(jìn)行。,3,、有些飼料，在,105,時(shí)可能發(fā)生某些化學(xué)變化。例如，含糖分高的糖漿。這類飼料應(yīng)在較低溫度和減壓條件下進(jìn)行干燥。,【,作業(yè)與思考,】,1,、某種飼料半干樣本,105,干物質(zhì)百分比為,90,，該飼料空氣干燥干物質(zhì)為,30,，計(jì)算該種新鮮飼料的干物質(zhì)百分比。,實(shí)驗(yàn)三粗蛋白質(zhì)的測定,(,凱氏定氮法,),【,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?】,1,、掌握飼料

10、中粗蛋白質(zhì)測定方法。,2,、測定各種樣本的粗蛋白質(zhì)含量。,【,實(shí)驗(yàn)原理和基礎(chǔ)知識,】,飼料中含氮物質(zhì)包括純蛋白質(zhì)和氨化物,(,氨化物有氨基酸、酰胺、硝酸鹽及銨鹽等,),，兩者總稱為粗蛋白質(zhì)。凱氏定氮法的基本原理是用濃硫酸分解樣本中蛋白質(zhì)與氨化物，使它們含氨物都轉(zhuǎn)變成氨氣，氨氣被濃硫酸吸收變?yōu)榱蛩徜@。硫酸銨在濃堿的作用下放出氨氣。通過蒸餾，氨氣隨汽水順著冷凝管流入硼酸溶液，與之結(jié)合成為四硼酸銨，后者用鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定，即可測定放出的氨氮量。根據(jù)氮量，乘以特定系數(shù)，一般為,6.25,，即可得出樣本中粗蛋白質(zhì)含量。上述過程中的化學(xué)反應(yīng)如下：,2CH,3,CHNH,2,COOH+13H,2,S0,

11、4,(NH,4,),2,S0,4,+6C0,2,+12S0,2,+16H,2,O,(NH,4,),2,S0,4,+2NaOH,2NH,3,+2H,2,0+Na,2,S0,4,4H,3,B0,3,+NH,3,NH,4,HB,4,0,7,+5H,2,0,NH,4,HB,4,0,7,+HCI+5H,2,0,NH,4,CI+4H,3,B0,3,【,實(shí)驗(yàn)用品,】,一、實(shí)驗(yàn)器材,1,、一個(gè)學(xué)生做,2,個(gè)測定，所需,儀器,數(shù)量,凱氏燒瓶,100,毫升,2,個(gè),分析天平,1,架,玻璃珠,6,粒,量筒,50,毫升,1,個(gè),漏斗,46,厘米直徑,2,個(gè),容量瓶,100,毫升,2,個(gè),三角瓶,150,毫升,26,個(gè)

12、,滴定管,1,支,移液管,10,或,5,毫升,1,支,2,、,公用儀器,數(shù)量,量筒,5,毫升,2,個(gè),量筒,10,或,20,毫升 各,1,個(gè),半微量凱氏蒸餾器,1,套,電爐,1000,瓦,1,個(gè),蒸氣發(fā)生瓶,3000,毫升、平底短頸,1,個(gè),定時(shí)鐘,1,個(gè),毒氣柜,1,架,二、試劑,一個(gè)學(xué)生做,2,個(gè)測定所需藥品數(shù)量,粉末硫酸鉀,-,硫酸銅混合物,(3,：,1,研磨混勻,)0.5,克,硫酸,(,比重,1,84,，無氮,)24,毫升,硼酸溶液,2,20,毫升,氫氧化鈉溶液,30,40,毫升,甲基紅一甲烯藍(lán)混合指示劑,1,毫升,(,取,200,毫升,0,1,甲基紅乙醇溶液與,50,毫升,1,甲烯藍(lán)

13、乙醇溶混勻。此混合指示劑在堿性溶液呈綠色，在酸性溶液紫紅色,),標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液,(0.01,摩爾升。,)600,毫升,【,實(shí)驗(yàn)操作步驟,】,1,、凱氏定氮儀的構(gòu)造和安裝,凱氏定氮儀由蒸汽發(fā)生器、反應(yīng)管及冷凝器三部分組成。蒸氣發(fā)生器包括電爐及一個(gè),1.2,升的燒瓶。蒸氣發(fā)生器借橡皮管與反應(yīng)管相連，反應(yīng)管上端有一個(gè)玻璃杯，樣品和堿液可由此加入到反應(yīng)室，反應(yīng)室中心有一長玻璃管，其上端通過反應(yīng)室外層與蒸氣發(fā)生器相連，下端靠近反應(yīng)室的底部。反應(yīng)室外層下端有一開口，上有一皮管夾，由此可放出冷凝水及反應(yīng)廢液。反應(yīng)產(chǎn)生的氨可通過反應(yīng)室上端細(xì)管及冷凝器通到吸收瓶中，反應(yīng)管及冷凝管之間借磨口連接，防止漏氣。,安裝儀

14、器時(shí)，先將冷凝管垂直地固定在鐵架臺上，冷凝管下端不要距離實(shí)驗(yàn)臺太近，以免放不下吸收瓶。反應(yīng)管固定在另一鐵架，蒸氣發(fā)生器放在電爐上，安裝完畢不得輕易移動(dòng)。,2,、消化,(1),稱取飼料樣本,0.5,克兩份，糞便樣本,0.5,克兩份，將稱樣紙卷成筒狀，小心無損地將樣本放入,100,毫升洗凈烘干的凱氏燒瓶中。另取,2,個(gè)凱氏燒瓶作為對照，測定試劑中可能含有的微量物質(zhì)。,(2),分別加入硫酸鉀硫酸銅混合物,0.2,克，濃硫酸,5,毫升。再加玻璃珠,2,粒，以防消化時(shí)液體濺失。,(3),在凱氏瓶上加一個(gè)小漏斗，將凱氏燒瓶放在消化架的電爐上加熱。開始加熱時(shí)，先用小火，以免瓶內(nèi)產(chǎn)生大量泡沫，溢出瓶口。等泡沫

15、停止產(chǎn)生后，再加強(qiáng)火力。消化時(shí)經(jīng)常轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶，使全部樣本浸入硫酸內(nèi)。如有黑泡濺在瓶壁，應(yīng)待燒瓶冷卻后加少量蒸餾水沖洗之，再繼續(xù)加熱消化。如有黑炭粒不能全部消化，則待燒瓶冷卻后，補(bǔ)加少量濃硫酸，繼續(xù)加熱，直至瓶內(nèi)溶液澄清呈透明淡綠色為止，消化才告完畢。,一般飼料消化需,3,4,小時(shí)，消化過程中產(chǎn)生,SO,2,，有刺鼻味，故需在毒氣柜中進(jìn)行。,(4),燒瓶冷卻后加蒸餾水,10,毫升，搖勻，然后將燒瓶中溶液無損地移入,50,毫升容量瓶內(nèi)，用蒸餾水沖洗凱氏燒瓶數(shù)次，洗液亦注入容量瓶中，并以蒸餾水稀釋至刻度，混勻備用。,3,、蒸餾,(1),蒸餾器的洗滌：蒸氣發(fā)生器中盛有幾滴硫酸酸化的蒸餾水，關(guān)閉皮管夾，將

16、蒸餾發(fā)生器的水燒開，讓蒸氣通過整個(gè)儀器。,15,分鐘后，在冷凝器下端放一個(gè)盛有,5,毫升,2,硼酸溶液和,1.2,滴指示液的錐形瓶。冷凝管下端應(yīng)完全浸沒在液體中，繼續(xù)蒸餾,1.2,分鐘，錐形瓶內(nèi)的溶液如不變色則證明蒸餾器內(nèi)部已洗滌干凈。移開錐形瓶通氣,1,分鐘，用水沖洗冷凝管口，然后用手涅緊橡皮管，由于反應(yīng)外層蒸氣冷縮，壓力減低，反應(yīng)室凝結(jié)的水可自動(dòng)吸出進(jìn)入，打開皮夾將廢水排出。,(2),取,50,毫升錐形瓶數(shù)個(gè)，各加入,5,毫升,2,硼酸溶液和混合指示劑,2,滴，置于蒸餾裝置的冷凝管下，使管口浸入硼酸溶液內(nèi)。,(3),煮沸蒸氣發(fā)生瓶中蒸餾水。用移液管取,10,毫升消化液，細(xì)心地由凱氏蒸餾裝置上的小玻杯注入反應(yīng)室，將小玻杯棒狀玻璃塞塞緊，使之不漏氣。取,10,毫升,30,的氫氧化鈉溶液注入小玻杯，小心地輕輕提起棒狀玻塞，使氫氧化鈉溶液流入反應(yīng)室，立刻將玻塞蓋緊，加水于小玻杯，使少許水流入反應(yīng)室以洗滌堿液，部分水留于小玻杯，以防漏氣。夾緊外套管出口的橡皮管，開始蒸餾。蒸氣吹入反應(yīng)室，用定時(shí)鐘定時(shí)，使氨氣通過冷凝管流入錐形瓶的硼酸溶液中，此時(shí)錐形瓶中的溶液由紫色變成綠色，蒸餾,3-5,分鐘