江蘇省高考生物二輪復習 專題12 現(xiàn)代生物科技專題課件

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1、1.基因工程的誕生(A)。2.基因工程的原理及技術(shù)(A)。3.基因工程的應用(B)。4.蛋白質(zhì)工程(A)。5.植物的組織培養(yǎng)(B)。6.動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆(A)。7.細胞融合與單克隆抗體(A)。8.動物胚胎發(fā)育的基本過程(A)。直擊考綱9.胚胎工程的理論基礎(chǔ)(A)。10.胚胎干細胞的移植(A)。11.胚胎工程的應用(B)。12.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題(A)。13.生物武器對人類的威脅(A)。14.生物技術(shù)中的倫理問題(A)。15.生態(tài)工程的原理(A)。16.生態(tài)工程的實例及應用(B)。直擊考綱真 題 重 溫知 能 回 歸 典 題 特 訓基因工程與蛋白質(zhì)工程考點34判斷下列有關(guān)基因工程和

2、蛋白質(zhì)工程的敘述判斷下列有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述(1)限制性核酸內(nèi)切酶和限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具連接酶是兩類常用的工具酶，用前者可切割煙草花葉病毒的核酸酶，用前者可切割煙草花葉病毒的核酸(2009浙江，浙江，3B和和2010浙江，浙江，2A) ()(2)每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點點(2011浙江，浙江，6B) () 真 題 重 溫(3)應用應用DNA探針技術(shù)可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株探針技術(shù)可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達中目的基因的存在及其完全表達(2011四川，四川，5D)()

3、(4)自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌整合到細菌DNA上，屬于基因工程上，屬于基因工程(2010大綱大綱全國全國，5D) ()(5)從某海洋動物中獲得一基因，其表達產(chǎn)物為一種從某海洋動物中獲得一基因，其表達產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強的多肽抗菌性和溶血性均較強的多肽P1。目前在。目前在P1的基礎(chǔ)的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物，首先要做上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是依據(jù)的是依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽(2013廣東，廣東，3C)()(6)采用蛋白質(zhì)工程進一步改造采用蛋白質(zhì)工程

4、進一步改造AFB1解毒酶的基本途解毒酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核構(gòu)，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列苷酸序列(2012天津，天津，8節(jié)選節(jié)選) ()1.掌握基因工程的主干知識圖解掌握基因工程的主干知識圖解 知 能 回 歸(1)目的基因的獲目的基因的獲(2)基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體的構(gòu)建(目的基因啟動子終止子標目的基因啟動子終止子標記基因記基因)(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞導入植物：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法導入植物：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

5、、基因槍法、花粉管通道法導入動物：顯微注射法導入微生物導入動物：顯微注射法導入微生物導入微生物細胞：感受態(tài)細胞法導入微生物細胞：感受態(tài)細胞法(用用Ca2處理處理)(4)目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定插入檢測：插入檢測：DNA分子雜交分子雜交轉(zhuǎn)錄檢測：轉(zhuǎn)錄檢測：DNARNA分子雜交分子雜交翻譯檢測：抗原翻譯檢測：抗原抗體雜交抗體雜交個體水平檢測：抗性接種實驗個體水平檢測：抗性接種實驗2.基本工具基本工具項目項目限制酶限制酶DNA連接酶連接酶載體載體作用作用切割目的基因和切割目的基因和載體載體拼接拼接DNA片段，形片段，形成重組成重組DNA攜帶目的基因進攜帶目的基因進入受體細胞入受體細胞

6、作用作用部位部位兩個核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成兩個核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵的磷酸二酯鍵作用作用特點特點(條件條件)識別特定的識別特定的核苷酸序列；核苷酸序列；在特定位點在特定位點上切割上切割EcoliDNA連接酶只連接酶只能連接黏性末端；能連接黏性末端；T4DNA連接酶能連連接酶能連接黏性末端和平末接黏性末端和平末端端能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復制；定存在并大量復制；有多個限制酶切割有多個限制酶切割位點；具有特殊的位點；具有特殊的標記基因標記基因3.基因表達載體的構(gòu)建過程基因表達載體的構(gòu)建過程1.(2014廣東，廣東，25)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶利用基

7、因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制制劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是(多選多選)() 典 題 特 訓A.過程需使用逆轉(zhuǎn)錄酶過程需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B.過程需使用解旋酶和過程需使用解旋酶和PCR獲取目的基因獲取目的基因C.過程使用的感受態(tài)細胞可用過程使用的感受態(tài)細胞可用NaCl溶液制備溶液制備D.過程可利用過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導入分子雜交鑒定目的基因是否已導入受體受體 細胞細胞解析A項，過程項，過程是通過逆轉(zhuǎn)錄獲取是通過逆轉(zhuǎn)錄獲取DNA，逆轉(zhuǎn)錄過程需，逆轉(zhuǎn)錄過程需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。B項，過程項，過程指的是從指的是從cDNA文庫中

8、獲取目的基因，不文庫中獲取目的基因，不需要利用需要利用PCR技術(shù)，也用不到解旋酶。技術(shù)，也用不到解旋酶。C項，過程項，過程中使用的感受態(tài)細胞要用中使用的感受態(tài)細胞要用CaCl2溶液制備，溶液制備，而不是用而不是用NaCl溶液制備。溶液制備。D項，過程項，過程鑒定目的基因是否已經(jīng)導入受體細胞，可以鑒定目的基因是否已經(jīng)導入受體細胞，可以用標記的目的基因為探針來檢測受體細胞中是否存在目用標記的目的基因為探針來檢測受體細胞中是否存在目的基因，即利用的基因，即利用DNA分子雜交鑒定。分子雜交鑒定。答案AD2.(2014重慶，重慶，4)下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖

9、。以下相關(guān)敘述，正確的是示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是()A.的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與聚合酶參與B.侵染植物細胞后，重組侵染植物細胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到的染色體上質(zhì)粒整合到的染色體上C.的染色體上若含抗蟲基因，則就表現(xiàn)出抗蟲性狀的染色體上若含抗蟲基因，則就表現(xiàn)出抗蟲性狀D.只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異解析A項，項，為重組為重組Ti質(zhì)粒，其構(gòu)建需要限制性核酸質(zhì)粒，其構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和內(nèi)切酶和DNA連接酶參與。連接酶參與。B項，含重組項，含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細胞后，重組質(zhì)

10、粒的農(nóng)桿菌侵染植物細胞后，重組Ti質(zhì)質(zhì)粒上的目的基因整合到受體細胞粒上的目的基因整合到受體細胞()的染色體上，而并非的染色體上，而并非整個重組整個重組Ti質(zhì)粒整合到質(zhì)粒整合到的染色體上。的染色體上。答案DC項，目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定能進行表達，所以項，目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定能進行表達，所以抗蟲基因?qū)胫参锛毎?，培育成的植株也不一定具有抗抗蟲基因?qū)胫参锛毎螅嘤傻闹仓暌膊灰欢ň哂锌瓜x性狀。蟲性狀。D項，轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是否培育成功，可以從個體水平上項，轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是否培育成功，可以從個體水平上進行檢測，即觀察植株是否具有抗蟲性狀，如果具有抗蟲進行檢測，即觀察植株是否具有抗蟲性

11、狀，如果具有抗蟲性狀則說明發(fā)生了可遺傳變異性狀則說明發(fā)生了可遺傳變異(基因重組基因重組)。3.(2014江蘇，江蘇，23改編改編)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，錯誤的是錯誤的是(多多選選) ()A.切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識別切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識別6 個核個核 苷酸序列苷酸序列B.PCR反應中溫度的周期性改變是為反應中溫度的周期性改變是為變性、復性、延伸變性、復性、延伸 創(chuàng)造條件創(chuàng)造條件C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標記基因載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標記基因D.抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必抗蟲基因

12、即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必 能正常表達能正常表達解析A項，限制性核酸內(nèi)切酶大多特異性地識別項，限制性核酸內(nèi)切酶大多特異性地識別6個核苷個核苷酸序列，但也有少數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶能識別酸序列，但也有少數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶能識別4個、個、5個或個或8個核苷酸序列。個核苷酸序列。答案ACB項，項，PCR反應中溫度反應中溫度的的周期性變化是為變性、復性和延周期性變化是為變性、復性和延伸創(chuàng)造條件。伸創(chuàng)造條件。C項，載體質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標記基因，供重項，載體質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標記基因，供重組組DNA的鑒定和選擇，而不是抗生素合成基因。的鑒定和選擇，而不是抗生素合成基因。D項，

13、目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定能正常表達。項，目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定能正常表達。4.圖圖1表示含有目的基因表示含有目的基因D的的DNA片段長度片段長度(bp即堿基對即堿基對)和部分堿基序列，圖和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有序列?，F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma4種限制種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別性核酸內(nèi)切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為：為：CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。下列分析中正確的是下列分析中正確的是()A.若用限制酶若用限制酶Msp完全切割圖完全切割圖1中中DNA片段，會破壞

14、片段，會破壞2 個磷酸二酯鍵個磷酸二酯鍵B.若圖若圖1所示所示DNA虛線方框內(nèi)的堿基對被虛線方框內(nèi)的堿基對被TA替換，用替換，用 限制酶限制酶Sma完全切割后會產(chǎn)生完全切割后會產(chǎn)生3種不同的種不同的DNA片段片段C.若切割圖若切割圖2中的質(zhì)粒以便拼接目的基因中的質(zhì)粒以便拼接目的基因D應選擇限制酶應選擇限制酶 BamH和和MboD.若用上述條件構(gòu)建含有目的基因若用上述條件構(gòu)建含有目的基因D的重組質(zhì)粒并成功導的重組質(zhì)粒并成功導 入細菌體內(nèi)，則此細菌在添加抗生素入細菌體內(nèi)，則此細菌在添加抗生素A和和B的培養(yǎng)基中的培養(yǎng)基中 不能存活不能存活解析由由題意可知，圖題意可知，圖1中的目的基因含有中的目的基因

15、含有2個限制酶個限制酶Msp的的切割位點，完全切割后會破壞切割位點，完全切割后會破壞4個磷酸二酯鍵，故個磷酸二酯鍵，故A錯誤；錯誤；答案D若圖中堿基對被替換后，限制酶若圖中堿基對被替換后，限制酶Sma的切割位點只有的切割位點只有1個，完個，完全切割后能產(chǎn)生全切割后能產(chǎn)生2種不同的種不同的DNA片段，故片段，故B錯誤；錯誤；若切割圖若切割圖2中的質(zhì)粒，并且不能破壞目的基因，最好選擇限制酶中的質(zhì)粒，并且不能破壞目的基因，最好選擇限制酶BamH進行切割，故進行切割，故C錯誤；錯誤；由于插入目的基因后會破壞抗生素由于插入目的基因后會破壞抗生素A抗性基因，但沒破壞抗生抗性基因，但沒破壞抗生素素B抗性基因

16、，故在含有抗生素抗性基因，故在含有抗生素A和抗生素和抗生素B的培養(yǎng)基中不能存的培養(yǎng)基中不能存活，活，D正確。正確。5.(2014新課標新課標，40)植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并性與某個基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。旱性?；卮鹣铝袉栴}：回答下列問題：(1)理論上，基因組文庫含有生物的理論上，基因組文庫含有生物的_基因；而基因；而cDNA文庫中含有生物的文庫中含有生物的_基因?；颉＝馕龌蚪M文庫含有生物的全

17、部基因，而基因組文庫含有生物的全部基因，而cDNA文庫文庫中含有生物的部分基因。中含有生物的部分基因。答案全部全部部分部分(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，再從中基因組文庫，再從中_出所需的耐旱基因。出所需的耐旱基因。解析植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關(guān)，若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立因有關(guān)，若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，包含該生物的所有基因，然后該植物的基因組文庫，包含該生物的所有基因，然后再從中篩選出所需的耐旱基因。再從中篩選

18、出所需的耐旱基因。篩選篩選(3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導入植物入植物_的體細胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再的體細胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達，生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達，應檢測此再生植株中該基因的應檢測此再生植株中該基因的_，如果檢測，如果檢測結(jié)果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的結(jié)果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的_是是否得到提高。否得到提高。解析若從植物甲中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到若從植物甲中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，通常采用的方法

19、是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化耐旱性低的植物乙中，通常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細胞后，經(jīng)過植物組法。將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細胞后，經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生織培養(yǎng)得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達，應檢測該耐旱基因是否合成了相應植株中正確表達，應檢測該耐旱基因是否合成了相應的蛋白質(zhì)，即檢測此再生植株中該基因的表達產(chǎn)物，的蛋白質(zhì)，即檢測此再生植株中該基因的表達產(chǎn)物，如果檢測結(jié)果呈陽性，說明已經(jīng)合成了相應的蛋白質(zhì)，如果檢測結(jié)果呈陽性，說明已經(jīng)合成了相應的蛋白質(zhì)，這時再進行個體生物學檢測，即在田間試驗中檢測植這時再進行個體生物學檢測，即在田

20、間試驗中檢測植株的耐旱性是否得到提高。株的耐旱性是否得到提高。答案乙表達產(chǎn)物耐旱性乙表達產(chǎn)物耐旱性(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為31時，則可推測該耐旱時，則可推測該耐旱基因整合到了基因整合到了_(填填“同源染色體同源染色體的一條上的一條上”或或“同源染色體的兩條上同源染色體的兩條上”)。解析假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱和不耐旱植株的數(shù)量比為代中耐旱和不耐旱植株的數(shù)量比為31，符合基因的，符合基因的分離定律，說明得到的二倍

21、體轉(zhuǎn)基因耐旱植株為雜合分離定律，說明得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株為雜合子，因此可推測該耐旱基因只整合到了同源染色體的子，因此可推測該耐旱基因只整合到了同源染色體的一條上。一條上。同源染色體的一條上同源染色體的一條上6.(2014山東，山東，36)人組織纖溶酶原激活物人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：流程如下：(1)htPA基因與載體用基因與載體用_切割切割后，通過后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達連接酶連接，以構(gòu)建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞載體。檢測目的基因

22、是否已插入受體細胞DNA，可采用，可采用_技術(shù)技術(shù)。解析用同種限制性核酸內(nèi)切酶對目的基因和載體進行用同種限制性核酸內(nèi)切酶對目的基因和載體進行切割，以形成相同的黏性末端。檢測目的基因是否已插切割，以形成相同的黏性末端。檢測目的基因是否已插入受體細胞入受體細胞DNA，常用，常用DNA分子雜交技術(shù)。分子雜交技術(shù)。同種限制性核酸內(nèi)切酶同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種或同種限限制制酶酶)DNA分子雜交分子雜交(或核酸探針或核酸探針)(2)為獲取更多的卵為獲取更多的卵(母母)細胞，要對供體母羊注射促性腺細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其激素，使其_。采集的精子需要經(jīng)過采集的精子需要經(jīng)過_，才具備受精能力。

23、，才具備受精能力。解析對供體母羊注射促性腺激素可以使其超數(shù)排卵，對供體母羊注射促性腺激素可以使其超數(shù)排卵，采集的精子需要經(jīng)過獲能處理后才具備受精能力。采集的精子需要經(jīng)過獲能處理后才具備受精能力。超數(shù)排卵超數(shù)排卵獲能獲能(處理處理)( 3 ) 將 重 組 表 達 載 體 導 入 受 精 卵 常 用 的 方 法 是將 重 組 表 達 載 體 導 入 受 精 卵 常 用 的 方 法 是_，為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入，為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行目的基因的胚胎進行_。利用胚胎分割和胚胎移。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細胞植技術(shù)可獲得多

24、個轉(zhuǎn)基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細胞的的_。解析將重組表達載體導入受精卵將重組表達載體導入受精卵(動物細胞動物細胞)常用的方常用的方法是顯微注射法。為了獲得母羊，需要對胚胎進行性別法是顯微注射法。為了獲得母羊，需要對胚胎進行性別鑒定。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因鑒定。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，依據(jù)的原理是早期胚胎細胞的全能性。個體，依據(jù)的原理是早期胚胎細胞的全能性。顯微注射法顯微注射法性別鑒定性別鑒定全能性全能性(4)若在轉(zhuǎn)若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測到基因母羊的羊乳中檢測到_，說明目的基因成功表達。，說明目的基因成功表達。解析目的基因成功表達的標志是在

25、轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳目的基因成功表達的標志是在轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳中檢測到中檢測到htPA，即人組織纖溶酶原激活物，即人組織纖溶酶原激活物。htPA(或人或人組織組織纖溶酶原激活物纖溶酶原激活物)7.(2014海南，海南，31)下面是將某細菌的基因下面是將某細菌的基因A導入大腸桿導入大腸桿菌內(nèi)，制備菌內(nèi)，制備“工程菌工程菌”的示意圖。請據(jù)圖回答：的示意圖。請據(jù)圖回答：(1)獲得獲得A有兩條途徑：一是以有兩條途徑：一是以A的的mRNA為模板，在為模板，在_的催化下，合成互補的單鏈的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后在，然后在_作用下合成雙鏈作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二，從而獲得所需基因；二

26、是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的_序列，推測出相應的序列，推測出相應的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的的_序列，再通過化學方法合成所需基因。序列，再通過化學方法合成所需基因。解析利用利用逆轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是：以逆轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是：以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA，然后，然后在在DNA聚合酶的作用下，合成雙鏈聚合酶的作用下，合成雙鏈DNA分子；根據(jù)蛋白分子；根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過程是：根據(jù)目標蛋白質(zhì)的氨基質(zhì)工程合成目的基因的過程是：根據(jù)目標蛋白質(zhì)的

27、氨基酸序列，推測相應的酸序列，推測相應的mRNA序列，然后按照堿基互補配序列，然后按照堿基互補配對原則，推測對原則，推測DNA中脫氧核苷酸的排列順序，通過化學中脫氧核苷酸的排列順序，通過化學方法合成。方法合成。答案逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶氨基酸脫氧核苷酸聚合酶氨基酸脫氧核苷酸(2)利用利用PCR技術(shù)擴增技術(shù)擴增DNA時，需要在反應體系中添加時，需要在反應體系中添加的有機物質(zhì)有的有機物質(zhì)有_、_、4種脫氧核苷酸和耐熱性的種脫氧核苷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以聚合酶，擴增過程可以在在PCR擴增儀中完成。擴增儀中完成。解析PCR過程中需要酶、底物、模板、引物和能量過程中需要酶、底物、模

28、板、引物和能量等條件。等條件。引物引物(目的基因或目的基因或A基因基因)模板模板( 3 ) 由由 A 和 載 體和 載 體 B 拼 接 形 成 的拼 接 形 成 的 C 通 常 稱 為通 常 稱 為_。解析目的基因和載體結(jié)合，形成基因表達載體。目的基因和載體結(jié)合，形成基因表達載體。基因表達載體基因表達載體(4)在基因工程中，常用在基因工程中，常用Ca2處理處理D，其目的是，其目的是_。解析在利用大腸桿菌做受體細胞時，需要先用在利用大腸桿菌做受體細胞時，需要先用Ca2處處理，使之成為感受態(tài)細胞，有利于其吸收重組理，使之成為感受態(tài)細胞，有利于其吸收重組DNA分子。分子。使其使其成為成為感受態(tài)感受態(tài)

29、細胞，使大腸桿菌更容易吸收重組細胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子分子真 題 重 溫知 能 回 歸 典 題 特 訓細胞工程考點35判斷下列有關(guān)細胞工程的敘述判斷下列有關(guān)細胞工程的敘述(1)在在“羊胎兒皮膚組織塊羊胎兒皮膚組織塊成纖維細胞成纖維細胞”過程中，需過程中，需要用胰蛋白酶處理，在培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于要用胰蛋白酶處理，在培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中，的氣體環(huán)境中，CO2的作用是維持培養(yǎng)基的的作用是維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定，另外為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細胞產(chǎn)物積累對穩(wěn)定，另外為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細胞產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害，應定期更換培養(yǎng)液細胞自身造成危

30、害，應定期更換培養(yǎng)液(2012山東，山東，35(2)和和2010福建，福建，32(3)整合整合) () 真 題 重 溫(2)不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細胞雜交過不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細胞雜交過程，該技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠緣雜種程，該技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠緣雜種(2009全全國卷國卷，4AB) ()(3)培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞，培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞，克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變(2010浙江，浙江，4AB) ()(4)二倍體細胞和惡

31、性細胞系一樣傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限二倍體細胞和惡性細胞系一樣傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的的(2010浙江，浙江，4CD) ()(5)二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株，若用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成植株，若用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子人工種子(2011江蘇，江蘇，16BC) ()1.植物體細胞雜交與單克隆抗體制備過程比較植物體細胞雜交與單克隆抗體制備過程比較 知 能 回 歸步驟步驟植物體細胞雜交過程植物體細胞雜交過程單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程第一步第一步原生質(zhì)體的制備原生質(zhì)體的制備(

32、酶解法酶解法)正常小鼠免疫處理正常小鼠免疫處理第二步第二步原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合(物、化法物、化法)動物細胞融合動物細胞融合(物、化、物、化、生物法生物法)第三步第三步雜種植株的篩選與培養(yǎng)雜種植株的篩選與培養(yǎng)雜交瘤細胞篩選與培養(yǎng)雜交瘤細胞篩選與培養(yǎng)第四步第四步雜種植株的誘導與鑒定雜種植株的誘導與鑒定單克隆抗體的提純單克隆抗體的提純相同點相同點兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱為克隆，兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱為克隆，都不涉及減數(shù)分裂；都不涉及減數(shù)分裂；均為無菌操作，需要適宜的溫度、均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件等條件(1)誘導融合

33、的方法分別有哪些？融合的細胞類型有哪誘導融合的方法分別有哪些？融合的細胞類型有哪幾種幾種？提示提示誘導植物體細胞的原生質(zhì)體融合的方法主要誘導植物體細胞的原生質(zhì)體融合的方法主要有離心、振動、電激或用聚乙二醇作為誘導劑。有離心、振動、電激或用聚乙二醇作為誘導劑。動物細胞融合常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的動物細胞融合常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒病毒(誘導動物細胞融合的特有因素誘導動物細胞融合的特有因素)、電激等。、電激等。融合的細胞類型：前者融合的細胞類型：前者AA、BB、AB。后者。后者瘤瘤、瘤瘤、B瘤、瘤、BB。(2)各自的原理分別有哪些？各自的原理分別有哪些？提示提示前者有細胞膜的流

34、動性和植物細胞的全能性，后前者有細胞膜的流動性和植物細胞的全能性，后者有細胞膜的流動性和細胞增殖者有細胞膜的流動性和細胞增殖。2.掌握克隆動物培育掌握克隆動物培育流程圖流程圖D個體的性別、性狀與哪個個體相同？個體的性別、性狀與哪個個體相同？提示提示根據(jù)發(fā)育成新個體根據(jù)發(fā)育成新個體D的重組細胞核由動物的重組細胞核由動物B提供，提供，而性別及大多數(shù)遺傳性狀是由核內(nèi)遺傳物質(zhì)決定的，故而性別及大多數(shù)遺傳性狀是由核內(nèi)遺傳物質(zhì)決定的，故B、D兩者的性別及大多數(shù)遺傳性狀相同。兩者的性別及大多數(shù)遺傳性狀相同。1.(2014浙江，浙江，3)下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是是

35、()A.連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型B.某些癌細胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細胞某些癌細胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細胞C.由多個祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆由多個祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀 典 題 特 訓解析A項，連續(xù)細胞系的細胞一般都培養(yǎng)了多次，二倍項，連續(xù)細胞系的細胞一般都培養(yǎng)了多次，二倍體核型發(fā)生了改變，大多數(shù)細胞具有異倍體核型。體核型發(fā)生了改變，大多數(shù)細胞具有異倍體核型。答案BB項，細胞癌變是由基因突變引起的，如果癌細胞在一定項，細胞癌變是由基因突變引起的

36、，如果癌細胞在一定條件下條件下(如用秋水仙胺等藥物治療如用秋水仙胺等藥物治療)，則有可能恢復成正常，則有可能恢復成正常細胞。細胞。C項，細胞克隆的最基本的要求是：必須確定所建立的克項，細胞克隆的最基本的要求是：必須確定所建立的克隆來源于單個細胞。隆來源于單個細胞。D項，未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系具有異質(zhì)性。項，未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系具有異質(zhì)性。2.下圖表示四倍體蘭花葉片通過植物組織培養(yǎng)成植株的過程，下圖表示四倍體蘭花葉片通過植物組織培養(yǎng)成植株的過程，下列相關(guān)敘述中正確的是下列相關(guān)敘述中正確的是(多選多選)()A.過程中發(fā)生了有絲分裂和減數(shù)分裂過程中發(fā)生了有絲分裂和減數(shù)分裂B.階段需要生長素而階段僅

37、需要細胞分裂素階段需要生長素而階段僅需要細胞分裂素C.階段為脫分化過程階段為脫分化過程D.此蘭花的花藥離體培養(yǎng)所得的植株體細胞有兩個染色體組此蘭花的花藥離體培養(yǎng)所得的植株體細胞有兩個染色體組解析過程均發(fā)生了有絲分裂。植物組織培養(yǎng)的過程均發(fā)生了有絲分裂。植物組織培養(yǎng)的各個階段均需要生長素和細胞分裂素刺激。各個階段均需要生長素和細胞分裂素刺激。階段細胞階段細胞失去分化狀態(tài)變成愈傷組織，為脫分化過程。蘭花是四失去分化狀態(tài)變成愈傷組織，為脫分化過程。蘭花是四倍體，花粉細胞含兩個染色體組，經(jīng)離體培養(yǎng)所得的植倍體，花粉細胞含兩個染色體組，經(jīng)離體培養(yǎng)所得的植株體細胞含兩個染色體組。株體細胞含兩個染色體組。答

38、案CD3.如圖為小白鼠的胚胎干細胞分化示意圖。如圖為小白鼠的胚胎干細胞分化示意圖。直到今天也不能用類似直到今天也不能用類似_(某種植物細某種植物細胞工程的技術(shù)手段胞工程的技術(shù)手段)的方法直接獲得完整的動物個體。的方法直接獲得完整的動物個體。因此，培育因此，培育“克隆鼠克隆鼠”的過程，實際是通過的過程，實際是通過_來來實現(xiàn)的。實現(xiàn)的。請回答：請回答：(1)圖中分化程度最低的是圖中分化程度最低的是_。在體外培養(yǎng)條。在體外培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)液中加入件下，培養(yǎng)液中加入_因子，可誘導胚胎干細胞因子，可誘導胚胎干細胞向不同類型的組織細胞分化。科學家將小鼠已分化體細向不同類型的組織細胞分化?？茖W家將小鼠已分化

39、體細胞的細胞核移入卵母細胞的細胞質(zhì)中，培育出胞的細胞核移入卵母細胞的細胞質(zhì)中，培育出“克隆克隆鼠鼠”，這里用卵母細胞的原因，這里用卵母細胞的原因是是_。解析圖中分化程度最低的是胚胎干細胞。在體外培養(yǎng)條圖中分化程度最低的是胚胎干細胞。在體外培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，可誘導胚胎干細胞向件下，培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，可誘導胚胎干細胞向不同類型的組織細胞分化。科學家將小鼠已分化體細胞的不同類型的組織細胞分化。科學家將小鼠已分化體細胞的細胞核移入卵母細胞的細胞質(zhì)中，培育出細胞核移入卵母細胞的細胞質(zhì)中，培育出“克隆鼠克隆鼠”，這，這里用卵母細胞的原因是：卵母細胞可以給它提供表達全能里用卵母細

40、胞的原因是：卵母細胞可以給它提供表達全能性的環(huán)境。直到今天也不能用類似植物組織培養(yǎng)性的環(huán)境。直到今天也不能用類似植物組織培養(yǎng)(某種植某種植物細胞工程的技術(shù)手段物細胞工程的技術(shù)手段)的方法直接獲得完整的動物個體。的方法直接獲得完整的動物個體。因此，培育因此，培育“克隆鼠克隆鼠”的過程，實際是通過的過程，實際是通過(動物體細胞動物體細胞)核移植來實現(xiàn)的。核移植來實現(xiàn)的。答案胚胎干細胞分化誘導卵母細胞可以給它提供表胚胎干細胞分化誘導卵母細胞可以給它提供表達全能性的環(huán)境植物組織培養(yǎng)達全能性的環(huán)境植物組織培養(yǎng)(動物體細胞動物體細胞)核移植核移植(2)在培育轉(zhuǎn)基因鼠的過程中，人們將關(guān)鍵基因通過逆轉(zhuǎn)在培育轉(zhuǎn)

41、基因鼠的過程中，人們將關(guān)鍵基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細胞，使其變成多功能干細錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細胞，使其變成多功能干細胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進入成纖維細胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進入成纖維細胞的胞的_，它能夠攜帶外源基因進入受體細胞，它能夠攜帶外源基因進入受體細胞。解析在培育轉(zhuǎn)基因鼠的過程中，人們將關(guān)鍵基因通過在培育轉(zhuǎn)基因鼠的過程中，人們將關(guān)鍵基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細胞，使其變成多功能逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細胞，使其變成多功能干細胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進入成纖干細胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進入成纖維細胞的載體，

42、它能夠攜帶外源基因進入受體細胞。維細胞的載體，它能夠攜帶外源基因進入受體細胞。載體載體(3)在制取單克隆抗體過程中，用在制取單克隆抗體過程中，用_細胞細胞與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)多次篩選最終得到能分泌與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)多次篩選最終得到能分泌_的的雜交瘤細胞。雜交瘤細胞。解析在制取單克隆抗體過程中，用效應在制取單克隆抗體過程中，用效應B淋巴細胞淋巴細胞(漿漿細胞細胞)與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)多次篩選最終得到能分泌與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)多次篩選最終得到能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞。特異性抗體的雜交瘤細胞。效應效應B淋巴淋巴(漿漿)特異性抗體特異性抗體4.(2014新課標新課標，40)某研究者用抗原某研究者

43、用抗原(A)分別免疫分別免疫3只只同種小鼠同種小鼠(X、Y和和Z)，每只小鼠免疫，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如圖所示。，結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞淋巴細胞(染染色體數(shù)目為色體數(shù)目為40條條)，并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓，并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞瘤細胞(染色體數(shù)目為染色體數(shù)目為60條條)按一定比例加入試管中，再按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融

44、合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，加入聚乙二醇誘導細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞抗體的雜交瘤細胞。回答下列問題：回答下列問題：(1)制備融合所需的制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到抗體效價需達到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這這3只免疫小鼠中，最適合用于制備只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是淋巴細胞的是_小小鼠，理由是鼠，理由是_。解析據(jù)圖分析可知，第四次注射后據(jù)圖分析可知，

45、第四次注射后X、Y、Z小鼠的血小鼠的血清抗體效價幾乎都達到清抗體效價幾乎都達到16 000以上，小鼠以上，小鼠Y的血清抗體的血清抗體的效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。的效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。4YY小鼠的血清抗體效價最高小鼠的血清抗體效價最高(2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能胞和雜交瘤細胞外，可能還有還有_，體系中出體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是現(xiàn)多種類型細胞的原因是_。解析融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外，融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外，還有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和還

46、有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和B淋巴細胞的自身融淋巴細胞的自身融合細胞。細胞的融合是隨機的，并且不可能所有細胞都合細胞。細胞的融合是隨機的，并且不可能所有細胞都融合，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。融合，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。B淋巴細胞相互融合淋巴細胞相互融合形成形成的的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的，細胞融合是隨機的，且且融合融合率率達不到達不到100%(3)雜交瘤細胞中有雜交瘤細胞中有_個個細胞核，染色體數(shù)目最多是細胞核，染色體數(shù)目最多是_條條。解析動物細胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細動物細胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細

47、胞遺傳信息的單核細胞。雜交瘤細胞的細胞核中的染色胞遺傳信息的單核細胞。雜交瘤細胞的細胞核中的染色體數(shù)目最多為體數(shù)目最多為4060100(條條)。1100(4)未融合的未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是原因是_。解析正常細胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過免疫的正常細胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過免疫的B淋巴細胞高度分化，不能無限增殖，而是經(jīng)多次傳代培淋巴細胞高度分化，不能無限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。養(yǎng)后逐漸衰老死亡。不能無限增殖不能無限增殖5.科學家從某無限增殖的細胞中分離出無限增殖調(diào)控基科學家從某無限增殖的細胞中分離出無限增殖調(diào)控

48、基因因(prG)，該基因能激發(fā)細胞分裂，這為單克隆抗體的，該基因能激發(fā)細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答下列問題：制備提供了更為廣闊的前景。請回答下列問題：(1)利用利用_技術(shù)制備單克隆抗體，技術(shù)制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、常用聚乙二醇、_、電激等誘導因素誘、電激等誘導因素誘導細胞融合。再經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的導細胞融合。再經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的能分泌所需抗體的_細胞。細胞。解析在利用動物細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的過程在利用動物細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的過程中，常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等方法誘導細胞中，常用聚乙二醇、滅

49、活的病毒、電激等方法誘導細胞融合，融合后的細胞經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng)，最終獲得融合，融合后的細胞經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng)，最終獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。答案動物細胞融合滅活的病毒雜交瘤動物細胞融合滅活的病毒雜交瘤(2)有人提出用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細胞來生產(chǎn)單克隆抗有人提出用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細胞來生產(chǎn)單克隆抗體，請完成設(shè)計方案：體，請完成設(shè)計方案：取取_細胞的細胞核，移植到去核的能細胞的細胞核，移植到去核的能夠夠_的細胞中，構(gòu)成重組細胞。的細胞中，構(gòu)成重組細胞。(假定移植后細假定移植后細胞核中基因的表達狀態(tài)不受影響胞核中基因的表達狀態(tài)不受影響)將

50、重組細胞在將重組細胞在_條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠小鼠_內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體。內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體。解析產(chǎn)生單克隆抗體的細胞應具有兩個特點：能無限產(chǎn)生單克隆抗體的細胞應具有兩個特點：能無限增殖和產(chǎn)生特定抗體。若用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細胞首增殖和產(chǎn)生特定抗體。若用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細胞首先取特定抗原刺激的先取特定抗原刺激的B淋巴細胞的細胞核，移植到去核淋巴細胞的細胞核，移植到去核的能夠無限增殖的細胞中，構(gòu)成重組細胞；然后將重組的能夠無限增殖的細胞中，構(gòu)成重組細胞；然后將重組細胞進行動物細胞培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，以獲細胞進行動物細胞培養(yǎng)或注射到小鼠

51、腹腔內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體。得大量單克隆抗體。答案特定抗原刺激的特定抗原刺激的B淋巴無限增殖淋巴無限增殖體外體外腹腔腹腔(3)也有人提出，可以直接通過基因工程導入該調(diào)控基因也有人提出，可以直接通過基因工程導入該調(diào)控基因(prG)來制備單克隆抗體，其思路如圖所示來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。酶酶A是指是指_，酶，酶B是指是指_。圖中圖中表示表示_，對，對進行檢測與鑒定的目的是進行檢測與鑒定的目的是_，具有的特點是具有的特點是_。解析基因工程中第一步獲取目的基因；第二步用限制基因工程中第一步獲取目的基因；第二步用限制性核酸內(nèi)切酶和性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理供體連接酶處理供體DNA和質(zhì)

52、粒，獲和質(zhì)粒，獲取基因表達載體取基因表達載體(重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒)；第三步將重組質(zhì)粒導入受；第三步將重組質(zhì)粒導入受體細胞；第四步檢測目的基因是否導入和表達。體細胞；第四步檢測目的基因是否導入和表達。 限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶連接酶目的基因目的基因(無限增殖調(diào)控基因或無限增殖調(diào)控基因或prG)檢測目的基因是否導入檢測目的基因是否導入和和既能無限增殖，又能既能無限增殖，又能產(chǎn)生產(chǎn)生是否表達是否表達特定特定抗體抗體 6.我國科學家張道遠先生通過從耐旱灌木白花檉柳中克我國科學家張道遠先生通過從耐旱灌木白花檉柳中克隆得到隆得到TSOD基因，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)化到棉花中，獲基因，利用轉(zhuǎn)基因

53、技術(shù)轉(zhuǎn)化到棉花中，獲得了具備更強抗旱性的得了具備更強抗旱性的T4代轉(zhuǎn)基因棉花株系。下圖為轉(zhuǎn)代轉(zhuǎn)基因棉花株系。下圖為轉(zhuǎn)基因抗旱棉花的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：基因抗旱棉花的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：(1)過程表示用過程表示用_擴增擴增目的基因的方法。目的基因的方法。過過程用到的工具酶有程用到的工具酶有_。步驟步驟一般用一般用_處理處理農(nóng)桿菌，農(nóng)桿菌，使其易吸收周圍環(huán)境中的使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。分子。解析過程表示用過程表示用PCR技術(shù)擴增目的基因。技術(shù)擴增目的基因。過程用過程用到的工具酶有限制酶到的工具酶有限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶)、DNA連接酶。連接酶。步驟步驟一

54、般用一般用Ca2(或或CaCl2)處理農(nóng)桿菌，使其易吸收處理農(nóng)桿菌，使其易吸收周圍環(huán)境中的周圍環(huán)境中的DNA分子。分子。PCR技術(shù)技術(shù)限制酶限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶)、DNACa2(或或CaCl2)連接酶連接酶(2)將重組質(zhì)粒導入棉花細胞除步驟將重組質(zhì)粒導入棉花細胞除步驟所示的方法外，還所示的方法外，還可采用可采用_。如果受體細胞是動。如果受體細胞是動物的受精卵，則一般采用的方法是物的受精卵，則一般采用的方法是_。解析將重組質(zhì)粒導入棉花細胞除步驟將重組質(zhì)粒導入棉花細胞除步驟所示的方法外，所示的方法外，還可采用花粉管通道法還可采用花粉管通道法(基因槍法基因槍法)。如果受體細胞是動

55、。如果受體細胞是動物的受精卵，則一般采用的方法是顯微注射法。物的受精卵，則一般采用的方法是顯微注射法。花粉管通道法花粉管通道法(基因槍法基因槍法)顯微注射法顯微注射法(3)外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了_技術(shù)技術(shù)，利用了，利用了_的原理，步驟的原理，步驟表示表示_。解析外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了植物組織培外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，利用了植物細胞的全能性的原理，步驟養(yǎng)技術(shù)，利用了植物細胞的全能性的原理，步驟表表示脫分化、再分化。示脫分化、再分化。植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性植物細胞的全能性脫分化、再分化脫分化、再分化(4

56、)為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功，可先用放射為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素標記的性同位素標記的_作作探針進行分子水平鑒定，再探針進行分子水平鑒定，再_進行個體進行個體水平鑒定棉花植株的抗旱性水平鑒定棉花植株的抗旱性。解析為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功，可先用為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素標記的抗旱基因放射性同位素標記的抗旱基因(TSOD基因、目的基因基因、目的基因)作探針進行分子水平鑒定，再移栽到干旱土地中進行個作探針進行分子水平鑒定，再移栽到干旱土地中進行個體水平鑒定棉花植株的抗旱性。體水平鑒定棉花植株的抗旱性?？购祷蚩购祷?TSO

57、D基因、目的基因基因、目的基因)移栽到干旱土地中移栽到干旱土地中真 題 重 溫知 能 回 歸 典 題 特 訓胚胎工程考點361.判斷下列有關(guān)胚胎工程及其應用的敘述判斷下列有關(guān)胚胎工程及其應用的敘述(1)絕大多數(shù)精卵細胞的識別具有物種特異性絕大多數(shù)精卵細胞的識別具有物種特異性(2012浙江，浙江，2A) ()(2)卵裂期胚胎中細胞數(shù)目和有機物總量在不斷增加卵裂期胚胎中細胞數(shù)目和有機物總量在不斷增加(2009江蘇，江蘇，8A) ()(3)早期胚胎培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加早期胚胎培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清入血清(2011江蘇，江蘇，18C) () 真 題 重 溫(4)受精

58、卵發(fā)育到原腸胚階段才能進行胚胎移植受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進行胚胎移植(2011江蘇，江蘇，18B) ()(5)試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)移植技術(shù)(2011江蘇，江蘇，18D) ()(6)胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細胞團均等分割胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細胞團均等分割(2009江蘇，江蘇，8B) ()(7)利用胚胎分割技術(shù)可以獲得兩個基因型完全相同的胚胎利用胚胎分割技術(shù)可以獲得兩個基因型完全相同的胚胎(2010江蘇，江蘇，16C) ()(8)胚胎干細胞具有細胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等胚胎干細胞具有細胞核大、核仁小

59、和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點特點(2009江蘇，江蘇，8C) ()2.(2013江蘇，江蘇，13)軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病，基軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病，基因型為因型為HH的個體早期死亡。一對夫妻均為該病患者，希望的個體早期死亡。一對夫妻均為該病患者，希望通過胚胎工程技術(shù)輔助生育一個健康的孩子。下列做法錯誤通過胚胎工程技術(shù)輔助生育一個健康的孩子。下列做法錯誤的是的是()A.首先經(jīng)超排卵處理后進行體外受精首先經(jīng)超排卵處理后進行體外受精B.從囊胚中分離細胞，培養(yǎng)后檢測基因型從囊胚中分離細胞，培養(yǎng)后檢測基因型C.根據(jù)檢測結(jié)果篩選基因型為根據(jù)檢測結(jié)果篩選基因型為hh的胚胎的胚胎D.將胚胎培養(yǎng)至

60、原腸胚期后移植到將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮子宮解析胚胎移植的時期是桑椹胚或囊胚，胚胎移植的時期是桑椹胚或囊胚，D錯誤。錯誤。D3.(2013山東，山東，35節(jié)選節(jié)選)科學家通過誘導黑鼠體細胞去分化獲科學家通過誘導黑鼠體細胞去分化獲得誘導性多能干細胞得誘導性多能干細胞(iPS)，繼而利用，繼而利用iPS細胞培育出與黑鼠細胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如下遺傳特性相同的克隆鼠，流程如下：(1)圖中圖中2細胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，該細胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，該過程稱為過程稱為_；也可以從灰鼠體內(nèi)取出卵子，；也可以從灰鼠體內(nèi)取出卵子， 通過通過_后進行早期胚

61、胎培養(yǎng)獲得。后進行早期胚胎培養(yǎng)獲得。(2)圖中重組囊胚通過圖中重組囊胚通過_技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用_方法保存。方法保存。(3)小鼠胚胎干細胞小鼠胚胎干細胞(ES)可由囊胚的可由囊胚的_分離培分離培養(yǎng)獲得。養(yǎng)獲得。iPS與與ES細胞同樣具有發(fā)育全能性，有望在對人類細胞同樣具有發(fā)育全能性，有望在對人類iPS細胞進行定向細胞進行定向_后用于疾病的細胞治療。后用于疾病的細胞治療。解析細胞胚胎可從灰鼠輸卵管內(nèi)沖卵獲得；重組囊胚通過細胞胚胎可從灰鼠輸卵管內(nèi)沖卵獲得；重組囊胚通過胚胎移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)，暫不進行胚胎移植的胚胎可胚胎

62、移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)，暫不進行胚胎移植的胚胎可放入放入196 的液氮中冷凍保存；胚胎干細胞簡稱的液氮中冷凍保存；胚胎干細胞簡稱ES或或EK細胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細胞。內(nèi)細細胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細胞。內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，可以作為干細胞的來源，胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，可以作為干細胞的來源，iPS與與ES細胞一樣，可通過誘導定向分化修補某些功能異常細胞一樣，可通過誘導定向分化修補某些功能異常的細胞來治療疾病的細胞來治療疾病。答案(1)沖卵體外受精沖卵體外受精(2)胚胎移植冷凍胚胎移植冷凍(或低溫或低溫)(3)內(nèi)細胞團誘導分化內(nèi)細胞團誘導分

63、化1.早期胚胎發(fā)育過程的流程分析早期胚胎發(fā)育過程的流程分析 知 能 回 歸2.胚胎工程操作流程分析胚胎工程操作流程分析(以牛為例以牛為例)(1)上述圖示中幾次用到了激素？分別是什么作用上述圖示中幾次用到了激素？分別是什么作用？提示提示兩次。第一次用促性腺激素對供體做超數(shù)排卵處兩次。第一次用促性腺激素對供體做超數(shù)排卵處理；第二次用激素對受體和供體母牛進行同期發(fā)情處理。理；第二次用激素對受體和供體母牛進行同期發(fā)情處理。(2)胚胎移植過程進行哪兩次檢查？胚胎移植過程進行哪兩次檢查？提示提示第一次是對收集的胚胎進行檢查；第二次是對受第一次是對收集的胚胎進行檢查；第二次是對受體母畜是否妊娠進行檢查。體母

64、畜是否妊娠進行檢查。(3)胚胎移植所用胚胎是有性生殖還是無性生殖產(chǎn)生的胚胎移植所用胚胎是有性生殖還是無性生殖產(chǎn)生的？提示提示是有性生殖還是無性生殖，取決于胚胎是由受精是有性生殖還是無性生殖，取決于胚胎是由受精卵形成，還是通過核移植技術(shù)形成重組細胞發(fā)育而成或卵形成，還是通過核移植技術(shù)形成重組細胞發(fā)育而成或胚胎分割形成。其中通過核移植技術(shù)和胚胎分割形成的胚胎分割形成。其中通過核移植技術(shù)和胚胎分割形成的胚胎是無性生殖產(chǎn)生的。胚胎是無性生殖產(chǎn)生的。(4)胚胎移植胚胎移植(胚胎能夠移入受體、胚胎收集、胚胎在受體胚胎能夠移入受體、胚胎收集、胚胎在受體能夠存活、胚胎能夠正常生長發(fā)育能夠存活、胚胎能夠正常生長

65、發(fā)育)的生理學基礎(chǔ)是什么？的生理學基礎(chǔ)是什么？提示提示哺乳動物排卵后，同種供受體生殖器官的生理哺乳動物排卵后，同種供受體生殖器官的生理變化是相同的，這是胚胎能夠移入受體的生理基礎(chǔ)。變化是相同的，這是胚胎能夠移入受體的生理基礎(chǔ)。早期胚胎形成后，未與母體子宮建立聯(lián)系，而是處于早期胚胎形成后，未與母體子宮建立聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)，這是胚胎收集的生理基礎(chǔ)。游離狀態(tài)，這是胚胎收集的生理基礎(chǔ)。提示提示受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應，受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應，這是胚胎在受體內(nèi)能夠存活的生理基礎(chǔ)。這是胚胎在受體內(nèi)能夠存活的生理基礎(chǔ)。供體胚胎可與受體子宮建立聯(lián)系，且不影響

66、供體胚胎供體胚胎可與受體子宮建立聯(lián)系，且不影響供體胚胎的遺傳特性，這是供體胚胎正常發(fā)育的生理基礎(chǔ)。的遺傳特性，這是供體胚胎正常發(fā)育的生理基礎(chǔ)。3.胚胎干細胞的培養(yǎng)流程胚胎干細胞的培養(yǎng)流程1.(2014江蘇，江蘇，2)下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述，正確的是下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述，正確的是()A.通過細胞分裂不斷增加細胞數(shù)量，并在一定時期發(fā)生通過細胞分裂不斷增加細胞數(shù)量，并在一定時期發(fā)生細胞細胞 分化分化B.胚胎發(fā)育過程中細胞不斷分裂，但不發(fā)生凋亡胚胎發(fā)育過程中細胞不斷分裂，但不發(fā)生凋亡C.隨著細胞分裂次數(shù)的增加，蛙胚的有機物總量不斷增加隨著細胞分裂次數(shù)的增加，蛙胚的有機物總量不斷增加D.發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)逐漸增加發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)逐漸增加 典 題 特 訓解析A項，在蛙的胚胎發(fā)育過程中，通過細胞分裂增加項，在蛙的胚胎發(fā)育過程中，通過細胞分裂增加細胞數(shù)量，在囊胚期細胞開始分化。細胞數(shù)量，在囊胚期細胞開始分化。答案AB項，胚胎發(fā)育過程中，既有細胞的分裂和分化，也有細項，胚胎發(fā)育過程中，既有細胞的分裂和分化，也有細胞的衰老和凋亡。胞的衰老和凋