生物人教版選修1檢測：專題2 課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) Word版含解析

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1、 課題2　土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) 題型一　選擇培養(yǎng)基的作用及配制方法 1．從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種的方法不包括(　) A．根據(jù)微生物對碳源需求的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基 B．根據(jù)微生物對特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需求，在培養(yǎng)基中增減不同的特殊營養(yǎng)物質(zhì) C．根據(jù)微生物對抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素 D．根據(jù)微生物耐熱性的不同，利用高溫、高壓消滅不需要的雜菌 答案　D 解析　利用高溫、高壓消滅不需要的雜菌的同時也會將需要篩選的微生物殺死，因此不能通過該方法得到目的微生物，D錯誤。 2．某混合樣品中微生物R含量極少，要得到大量的R，比較理想

2、的方法是采用(　) A．天然培養(yǎng)基 B．稀釋涂布平板法 C．利用適合R生長但同時抑制或阻止其他種類微生物生長的選擇培養(yǎng)基 D．用顯微鏡直接觀察、尋找，再培養(yǎng) 答案　C 解析　在培養(yǎng)過程中可以通過選擇該微生物能生長繁殖而抑制其他微生物生長繁殖的培養(yǎng)基，使微生物R能在該培養(yǎng)基上成為優(yōu)勢菌種而大量繁殖，C正確。 3．可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是(　) A．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 B．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑 C．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹Ⅲ試劑 D．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑 答案　A 解析　分解尿素的細菌

3、與其他細菌的重要區(qū)別是分解尿素的細菌能以尿素為氮源，該細菌合成的脲酶將尿素分解成了氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變紅，我們可以準確地鑒定出該種細菌能夠分解尿素。 題型二　菌落數(shù)目的統(tǒng)計方法 4．下列不屬于菌種計數(shù)方法的是(　) A．平板劃線法　 B．稀釋涂布平板法 C．鏡檢法　 D．濾膜法 答案　A 解析　平板劃線法可用于菌種的純化和分離，不能用于計數(shù)，A錯誤；稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目，鏡檢法也是測定微生物數(shù)量的常用方法，B、C正確；濾膜法常用于檢測水樣中大腸桿菌數(shù)目，通常是將已

4、知體積的水樣過濾后，將濾膜放到伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌數(shù)量，D正確。 5．下列關(guān)于統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法的敘述，不正確的是(　) A．采用平板計數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往少于實際的活菌數(shù) B．當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落 C．為了保證結(jié)果準確，一般采用密度較大的平板進行計數(shù) D．在某一濃度下涂布三個平板，若三個平板統(tǒng)計的菌落數(shù)在30～300間且差別不大，則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計結(jié)果 答案　C 解析　當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，A正確；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，

5、一個活菌會形成一個菌落，B正確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，密度過大會不好計數(shù)，影響結(jié)果的準確性，C錯誤；涂布三個平板，作為重復(fù)組，若三個平板統(tǒng)計的菌落數(shù)在30～300間且相差不大，取其平均值作為統(tǒng)計結(jié)果能增強實驗的說服力與準確性，D正確。 題型三　細菌分離與計數(shù)的實驗設(shè)計 6．下列關(guān)于測定土壤中微生物的數(shù)量，正確的敘述是(　) A．一般選用103～107倍的稀釋液分別涂布 B．測定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋 C．測定真菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋 D．當(dāng)?shù)谝淮螠y量某種細菌的數(shù)量，可以將101～107倍的稀釋液分別涂布到平板

6、上培養(yǎng) 答案　B 解析　由于土壤中各類微生物的數(shù)量不同，在進行分離與計數(shù)時，就需要按照不同的稀釋度分別進行涂布，A錯誤；測定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104、105倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)，B正確；測定真菌的數(shù)量，一般選用102、103、104倍稀釋，C錯誤；當(dāng)?shù)谝淮螠y量某種細菌的數(shù)量，可將稀釋的范圍放寬點，將103～107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)，D錯誤。 7．在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時，甲組實驗用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實驗用氮源除含尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作、培養(yǎng)與觀察，則乙組實驗屬于(　) A．空白對照　B．自身對照

7、C．相互對照　D．條件對照 答案　D 解析　本實驗甲組為實驗組，乙組為對照組，給實驗組某種處理，給對照組另一條件的處理，為條件對照。 8．關(guān)于土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗中，下列操作需要在酒精燈火焰旁進行的一組是(　) ①土壤取樣?、诜Q取土壤?、巯♂屚寥廊芤骸、芡坎计桨濉、菸⑸锏呐囵B(yǎng) A．①②③④⑤　 B．②③④⑤ C．③④⑤　 D．②③④ 答案　D 解析　土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗需進行無菌操作，其中①土壤取樣是在室外進行，⑤微生物的培養(yǎng)是在恒溫箱中進行，其余過程都需要在酒精燈火焰旁進行，D正確。 9．在“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)”課題中，以土壤

8、中的細菌為研究對象，要達到的目的是(　) ①從土壤中分離出能夠分解尿素的細菌　②從土壤中分離出能夠分解氨的細菌?、劢y(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌?、芙y(tǒng)計所取土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌 A．①③　B．②④　C．①②　D．③④ 答案　A 解析　從土壤中分離分解尿素的細菌并對其計數(shù)，統(tǒng)計的是每克土壤樣品中含多少分解尿素的細菌，用公式“每克樣品中菌株數(shù)＝(C/V)×M”進行推測，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)，①③正確。 10．下列屬于菌落特征的是(　) ①菌落的形狀?、诰涞拇笮　、劬涞?/p>

9、多少 ④隆起程度?、蓊伾、抻袩o莢膜 A．①②③④　B．①②④⑤ C．②③④⑥　D．①②③④⑤⑥ 答案　B 解析　菌落特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等，有無莢膜是單個細菌細胞的特征，不是菌落的特征。 11．在做“分離能分解尿素的細菌”的實驗時，A同學(xué)從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106倍的培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)在同樣的稀釋倍數(shù)下的培養(yǎng)基中只篩選出大約50個菌落。A同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有(　) ①土樣不同?、谂囵B(yǎng)基被污染　③操作失誤?、軟]有設(shè)置對照 A．①②③　B．②③④　C．①③④　D．①②④ 答案　A 解析　A同學(xué)比其他同學(xué)所得的實驗結(jié)果的數(shù)據(jù)大許多，

10、可能是由于選取的土樣不同、培養(yǎng)基滅菌不徹底或操作過程中培養(yǎng)基被污染，也可能是操作失誤造成的，如所配制的培養(yǎng)基中混入其他含氮物質(zhì)、稀釋度不夠準確等。 12．欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌，下列實驗操作中不正確的是(　) A．將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋 B．同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板 C．可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照 D．用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細菌 答案　D 解析　將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋，以便于統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，A正確；為避免偶然誤差對實驗結(jié)果的影響，同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板，B正確；生物實驗要遵

11、循對照原則，故要將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照，排除非測試因素對實驗結(jié)果的影響，可使結(jié)論更有說服力，C正確；在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可篩選出分解尿素的細菌，D錯誤。 13．圖表所示配方的培養(yǎng)基可篩選某種細菌，該細菌可以在該培養(yǎng)基上生長、形成菌落。請回答下列問題： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 瓊脂 15.0 g 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000 mL (1)該培養(yǎng)基可篩選的細菌是____________，理由是_________

12、___________。 (2)如果從土壤中獲取的樣本含該細菌的數(shù)量較少，則需要對樣本中的細菌進行擴大培養(yǎng)，____________(填“能”或“不能”)用表格中的培養(yǎng)基，因為____________________________________________________。 (3)如果對該細菌進行計數(shù)，則將得到的細菌用____________法接種，為了確定該細菌確實屬于所要分離的細菌，需要在培養(yǎng)基中加入____________(試劑)。 (4)另一種接種細菌的方法是____________，該方法操作時，每一次劃線前都要進行灼燒，目的是_____________________

13、_____。 答案　(1)尿素分解菌　培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源 (2)不能　擴大培養(yǎng)應(yīng)該用液體培養(yǎng)基，表格配方中含瓊脂，是固體培養(yǎng)基　(3)稀釋涂布平板　酚紅指示劑 (4)平板劃線法　殺死殘留在接種環(huán)上的細菌 解析　(1)根據(jù)表格分析，培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，說明該培養(yǎng)基篩選的細菌是尿素分解菌。 (2)圖表所示培養(yǎng)基中含有瓊脂，說明是固體培養(yǎng)基，不能用于菌種的擴大培養(yǎng)，擴大培養(yǎng)應(yīng)該用液體培養(yǎng)基。 (3)微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中后者可以用于菌種的計數(shù)；以尿素為唯一氮源且含酚紅指示劑的培養(yǎng)基可以選擇和鑒別尿素分解菌。 (4)利用平板劃線法接種時，每一次

14、劃線前都要進行灼燒，目的是殺死殘留在接種環(huán)上的細菌。 14．下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程。 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加________作指示劑，產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成________色。 (2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1 mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。 該過程采取的接種方法是______________________，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為________×108個；與血細胞計數(shù)板相比，此計

15、數(shù)方法測得的細菌數(shù)目較________。 (3)在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是________，需要消毒的是________。(填序號) ①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 ②玻棒、試管、錐形瓶和吸管 ③實驗操作者的雙手 (4)實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行________處理后，才能倒掉。 答案　(1)尿素　酚紅　紅　(2)稀釋涂布平板法　1.75　少　(3)①②?、邸?4)滅菌 解析　(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑。由于尿素被脲酶分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高，從而使酚紅指示劑變紅。 (2)

16、用于統(tǒng)計細菌菌落數(shù)的常用方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，故選擇細菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)。每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細菌數(shù)目，所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為(156＋178＋191)÷3÷0.1×105＝1.75×108(個)。由于兩個或多個細菌連接在一起時，往往統(tǒng)計的是一個菌落，此外，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的是活菌數(shù)，而血細胞計數(shù)板統(tǒng)計的是細菌總數(shù)，所以用此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較少。 (3)在實驗中，①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和②玻棒、試管、錐形瓶、吸管需要滅菌，③實驗操作者的雙手需要消毒。 (4)為了防止污染環(huán)境，實驗結(jié)

17、束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后才能倒掉。 1．對表層土壤中自生固氮菌的分離采取的原理(方法)是(　) A．依據(jù)自生固氮菌的生長繁殖不需要氮源 B．依據(jù)不同微生物生長繁殖所需pH不同 C．依據(jù)不同微生物生長繁殖所需溫度條件不同 D．依據(jù)不同微生物代謝類型不同 答案　A 解析　在無氮培養(yǎng)基上只有固氮菌能正常生長繁殖，可根據(jù)此特點來分離自生固氮菌，A正確。 2. 在光亮處用同一種培養(yǎng)液分別培養(yǎng)單細胞綠藻和單細胞酵母菌，其結(jié)果如圖所示(甲為綠藻，乙為酵母菌)。造成這種現(xiàn)象的原因是(　) A．培養(yǎng)液中缺少無機鹽 B．培養(yǎng)液中氧氣含量太高 C．培養(yǎng)液中有機成分少

18、 D．培養(yǎng)液中不含二氧化碳 答案　C 解析　酵母菌為異養(yǎng)型生物，需直接攝取有機物，而綠藻是植物，可以進行光合作用合成有機物，所以在培養(yǎng)液中酵母菌最終被淘汰說明培養(yǎng)液中有機成分少，C正確。 3．如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細菌的過程示意圖，有關(guān)敘述錯誤的是(　) A．在配制步驟②、③所用的培養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)pH后高壓蒸汽滅菌 B．步驟③純化分解尿素細菌的原理是將聚集的細菌分散，可以獲得單細胞菌落 C．步驟③采用稀釋涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素 D．步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力 答案　C 解析　在配制步驟②、③的培

19、養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)pH值后再高壓蒸汽滅菌，A正確；步驟③純化分解尿素細菌的原理是將聚集的細菌分散，可以獲得單細胞菌落，B正確；要篩選出能高效分解尿素細菌，所用的培養(yǎng)基要以尿素為唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有含氮有機物，因此步驟③所用的培養(yǎng)基中不能含有牛肉膏和蛋白胨，C錯誤；步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力，D正確。 4．用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中的細菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是(　) A．涂布了1個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230 B．涂布了2個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238 C．涂布了3個平板，

20、統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163 D．涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是212、240和250，取平均值234 答案　D 解析　在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力與準確性，A、B錯誤；C項雖然涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與其他的相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，此時，不能簡單地用3個平板的計數(shù)值來求平均值，C錯誤。 5．為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染和選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置的對照組的培養(yǎng)基分別是(　) A．未接種的選擇培養(yǎng)基，未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B．未接種的培養(yǎng)基，接種了的牛肉膏蛋

21、白胨培養(yǎng)基 C．接種了的選擇培養(yǎng)基，接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D．接種了的培養(yǎng)基，未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 答案　B 解析　若要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，可將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)，一段時間后若有菌落產(chǎn)生，說明培養(yǎng)基被污染，若無菌落產(chǎn)生，說明培養(yǎng)基沒有被污染。要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，接種了的選擇培養(yǎng)基是實驗組，將等量的稀釋相同倍數(shù)的菌液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，作為對照組，在相同的條件下進行培養(yǎng)，觀察比較對照組和實驗組中的菌落數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，綜上所述，B正確，A、C、D錯誤。 6．下列有關(guān)微生物分離、

22、培養(yǎng)和計數(shù)的敘述，正確的是(　) A．分離土壤中微生物時，需要先對土壤滅菌，再進行培養(yǎng) B．測定土壤中細菌數(shù)量時，一般選用103～107倍的稀釋液 C．測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法或平板劃線法進行計數(shù) D．統(tǒng)計菌落數(shù)目時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落 答案　D 解析　分離土壤中微生物時，需要對培養(yǎng)基滅菌，但不能對土壤樣品進行滅菌，A錯誤；由于土壤中各類微生物的數(shù)量不同，在進行分離和計數(shù)時，就需要按照不同的稀釋度分別進行涂布，測定土壤中細菌的數(shù)量一般選擇104、105、106倍的稀釋液，B錯誤；測定土壤樣品中的細菌數(shù)目常用稀釋涂布平板法，平板劃線法不

23、能用于計數(shù)，C錯誤；統(tǒng)計菌落數(shù)目時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落，D正確。 7．下圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是(　) A．3號試管的稀釋倍數(shù)為103倍 B．4號試管中稀釋液進行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰為5號試管的10倍 C．5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個 D．該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要高 答案　C 解析　3號試管中的菌落稀釋倍數(shù)為104倍，A錯誤；4號試管中稀釋液進行平板培養(yǎng)，稀釋倍數(shù)比5號試管的低10倍，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，得到的菌落平均數(shù)可能是5號試管的10倍，

24、B錯誤；5號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(168＋175＋167)÷3÷0.1×106＝1.7×109個，C正確；稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細菌細胞長成一個菌落，使該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要低，D錯誤。 8．下列是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是(　) A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上 C．將實驗組和對照組平板倒置，37 ℃恒溫培養(yǎng)24～48小時 D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300

25、以上的實驗組平板進行計數(shù) 答案　D 解析　用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時，需要先滅菌再倒平板，A正確；測定土壤中細菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)，體積為0.1 mL，為了保證實驗的準確性，需進行對照，同時保證無關(guān)變量相同且適宜，因此需取等體積的無菌水，分別涂布于各組平板上，B正確；實驗組和對照組需要在37 ℃恒溫箱培養(yǎng)一段時間，再觀察計數(shù)，C正確；對照組無菌說明培養(yǎng)基滅菌成功且操作過程中沒有雜菌污染，那么在菌落計數(shù)時應(yīng)選擇菌落數(shù)在30～300間的實驗組平板進行計數(shù)，D錯誤。 9．人和哺乳動物的尿液中含有尿素，大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染。土壤中有些細菌

26、含有脲酶，可降解尿素。下圖是某同學(xué)從土壤中篩選出降解尿素菌株的實驗流程。請回答有關(guān)問題： ―→―→―→ (1)用以________為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細菌。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。分離培養(yǎng)細菌時必須進行________操作。 (2)采用________________法時需要將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)、菌落計數(shù)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在__________________旁進行操作。稀釋處理的目的是________________________________________，接種后的培養(yǎng)皿倒置于適宜溫度的恒溫箱中培養(yǎng)，平板

27、倒置培養(yǎng)的目的主要是____________________________。 (3)在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若培養(yǎng)基中存在分泌脲酶的細菌，其菌落周圍會出現(xiàn)________，這是由于尿素被分解產(chǎn)生________，遇培養(yǎng)基中所加酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化所致。變色區(qū)域越大，表明該菌株降解尿素的能力________。 (4)分離細菌時使用固體平面培養(yǎng)基的原因是_________________________。 答案　(1)尿素　選擇　無菌　(2)稀釋涂布平板　酒精燈火焰　得到單菌落，避免土壤溶液中菌體濃度過高　防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染　 (3)紅色環(huán)帶　氨(或NH3)　越

28、強　(4)固體培養(yǎng)基上細菌分裂產(chǎn)生的子代個體不易分散，從而形成菌落 解析　(1)欲篩選出能降解尿素的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一氮源，不能降解尿素的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。分離培養(yǎng)細菌時必須進行無菌操作。 (2)常用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)、菌落計數(shù)，稀釋菌液的過程中每一步都要在酒精燈火焰旁進行，以避免周圍微生物的污染。為了得到單菌落，需將土壤溶液進行一系列的梯度稀釋，從而使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，進而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落，便于純化分離菌種。平板倒置培養(yǎng)的目的主要是防止培養(yǎng)過程中皿蓋上的冷凝水滴落在培養(yǎng)基表面，造成雜菌污染。 (3)細菌合成的脲酶

29、將尿素分解成氨，遇酚紅指示劑變紅。降解尿素能力越強的菌株，菌落周圍形成的紅色環(huán)帶越大。 (4)液體培養(yǎng)基中難以得到成形的菌落，而固體培養(yǎng)基上可以形成肉眼可見的菌落。 10．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑(含氮有機化合物)在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細菌(已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)。 (1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行________處理。 (2)要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質(zhì)、用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點是_______

30、_______________________________。 (3)在劃線培養(yǎng)時，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是____________________________或有氧條件抑制了這些細菌的生長。 (4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是________，有透明帶菌落利用的氮源主要是________，據(jù)此可篩選出目的菌。 (5)科研人員用放射線處理該細菌獲得兩個突變株A和B，然后對突變株A和B進行實驗，結(jié)果如下表所示： 接種的 菌種 一般培 養(yǎng)基 實驗處理及結(jié)果 A 不生長 添加營養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長 B 不生長

31、 添加營養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長 A＋B 能生長 不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長 突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長的原因是________________________。突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是__________ _____________________________________________________________________。 答案　(1)稀釋 (2)以該除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基 (3)培養(yǎng)基中缺少這些細菌可利用的氮源 (4)氮氣　該除草劑 (5)突變株A缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶　突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突

32、變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供 解析　(1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理。 (2)從物理性質(zhì)來看，題圖上培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；從用途方面來看，該培養(yǎng)基是以該含氮除草劑為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。 (3)在以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上，不能降解該除草劑的細菌(除具有固氮能力的細菌外)是不能生長的。 (4)含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明，被菌落分解后可產(chǎn)生透明帶，無透明帶說明除草劑未被分解，菌落利用的氮源是空氣中的氮氣，而菌落周圍形成透明帶是由于該除草劑被某些細菌降解導(dǎo)致的。 (5)突變株A的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株

33、B的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)乙。突變株A由于缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶，所以不能在一般培養(yǎng)基上生長，不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲和乙，二者混合培養(yǎng)時都能生長，最可能的原因是突變株A為突變株B提供了營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株B為突變株A提供了營養(yǎng)物質(zhì)甲。 11．自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將它們分離提純，然后進行數(shù)量測定。下面是對某水樣中大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗，請回答有關(guān)問題。 步驟：①制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液； ②用稀釋涂布平板法接種樣品； ③在適宜溫度下培養(yǎng)。 結(jié)果分析： (1)一位同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上菌落數(shù)

34、的平均值為43.4，那么每毫升樣品中的菌株數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)____________。 (2)用這種方法測定微生物數(shù)量時，實際的活菌數(shù)往往要比統(tǒng)計的菌落數(shù)________，因為______________________________。 (3)某同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，________(填“能”或“不能”)肯定大腸桿菌的品系被污染了。原因是________________________________。 答案　(1)2.17×108 (2)多　當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 (3)不能　不能確定雜菌的來源 解析　(1)每毫升樣品中的菌株數(shù)為43.4÷0.2×106＝2.17×108。 (2)因為肉眼可見的菌落可能由兩個或多個細胞連在一起生長而成，所以實際的活菌數(shù)往往要比統(tǒng)計的菌落數(shù)多。 (3)雜菌的出現(xiàn)可能是由于培養(yǎng)基滅菌不徹底或在培養(yǎng)過程中感染了雜菌。