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1、專題十四 發(fā)酵工程
[強化練習·知能提升]
1.(2019·臨沂高三模擬)取9個潔凈培養(yǎng)皿,均分為三組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),各組分別加入等量的不同培養(yǎng)基,每個平板均接種0.1 mL大腸桿菌菌液,37 ℃培養(yǎng)36小時后,統(tǒng)計菌落數(shù)(見表),以下相關(guān)敘述錯誤的是( ?。?
組別
培養(yǎng)基
各平板的菌落數(shù)
1
2
3
Ⅰ
瓊脂、C6H12O6、NH4NO3
30
31
27
Ⅱ
瓊脂、C6H12O6、NH4NO3、維生素
169
178
193
Ⅲ
瓊脂、NH4NO3、維生素
0
0
1
A.Ⅰ組和Ⅱ組說明維生素可以促進大腸桿菌生長繁殖
B.Ⅱ組和Ⅲ組說明大腸
2、桿菌正常生長需要葡萄糖
C.三組實驗均采用了稀釋涂布平板法,以便菌落計數(shù)
D.三組實驗所使用的培養(yǎng)基均需62 ℃、30 min滅菌
解析:選D。Ⅰ組和Ⅱ組培養(yǎng)基成分的差異是有無維生素,結(jié)果可以說明維生素可以促進大腸桿菌的生長繁殖,A正確;Ⅱ組和Ⅲ組的差異是有無葡萄糖,結(jié)果說明,沒有葡萄糖大腸桿菌不能正常生長,B正確;采用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌便于菌落計數(shù),C正確;對培養(yǎng)基加熱到62 ℃不能徹底滅菌,應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌,D錯誤。
2.(2019·山東濰坊調(diào)研)下列有關(guān)使用高壓蒸汽滅菌鍋的操作,錯誤的是( ?。?
A.加水時,水面應(yīng)與三角擱架平齊
B.加蓋時,將排氣軟管插入內(nèi)層
3、滅菌桶的排氣槽內(nèi)
C.加熱時,待冷空氣完全排盡后關(guān)上排氣閥
D.切斷電源后,打開排氣閥使壓力表降到零后開蓋
解析:選D。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時,加水時,水面應(yīng)與三角擱架平齊,A正確;加蓋時,應(yīng)該將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi),B正確;加熱時,應(yīng)該等冷空氣完全排盡后再關(guān)上排氣閥,C正確;切斷電源后,應(yīng)該等壓力表降到零后再打開排氣閥并開蓋,D錯誤。
3.下列關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述,錯誤的是 ( )
A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上
C.將實驗
4、組和對照組平板倒置,37 ℃恒溫培養(yǎng)24~48小時
D.確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)
解析:選D。首先要進行培養(yǎng)基的制備,用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板,A正確;取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上,B正確;將實驗組和對照組平板倒置,37 ℃恒溫培養(yǎng)24~48小時,C正確;確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在30~300的實驗組平板進行計數(shù),求其平均值,再通過計算得出土壤中細菌總數(shù),D錯誤。
4.(2019·濟南高三模擬)下圖所示的裝置可用于生物技術(shù)實踐的相關(guān)實驗,下列有關(guān)敘述錯誤的是(
5、)
A.乙裝置可先用于果酒的制作,后用于果醋的制作
B.利用裝置甲制作泡菜時,應(yīng)按照清水與鹽的質(zhì)量比為4∶1的比例配制鹽水
C.用裝置乙制作果酒時溫度應(yīng)控制在30 ℃左右,制作果醋時應(yīng)適當降溫
D.裝置乙的排氣口通過一個長而彎曲的膠管,可防止空氣中微生物的污染
解析:選C。乙裝置可先用于果酒的制作,后用于果醋的制作,先密封后通入空氣,A正確;利用裝置甲制作泡菜時,應(yīng)按照清水與鹽的質(zhì)量比為4∶1的比例配制鹽水,B正確;用裝置乙制作果酒時溫度應(yīng)控制在18~25 ℃,制作果醋時溫度為30~35 ℃,制作果醋時應(yīng)適當升溫,C錯誤;裝置乙的排氣口通過一個長而彎曲的膠管,排出果酒制備時產(chǎn)生的
6、二氧化碳,而且能防止空氣中微生物的污染,D正確。
5.(不定項)下列有關(guān)實驗操作流程的敘述,錯誤的是( ?。?
A.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序為計算→稱量→溶化→倒平板→滅菌
B.在制作果醋的過程中,要將溫度嚴格控制在30~35 ℃,時間控制在7~8 d左右
C.在泡菜的制作過程中要保證泡菜壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的有氧環(huán)境
D.果酒制作的實驗流程是挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒
解析:選AC。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序為計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板,A錯誤;在制作果醋的過程中,要將溫度嚴格控制在30~35 ℃,時間控制在7~8 d左右,B正確;在制作泡菜時,應(yīng)
7、向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水,以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境,C錯誤;果酒制作的實驗流程是挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒,D正確。
6.(不定項)關(guān)于微生物的實驗室培養(yǎng),下列敘述正確的是( ?。?
A.為避免污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰上進行
B.瓊脂是從紅藻中提取的多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑
C.接種環(huán)、接種針、試管口等常使用灼燒滅菌法
D.試管、燒杯、培養(yǎng)基等可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌
解析:選BCD。為避免污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行,A錯誤;瓊脂在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑,它是從紅藻中提取的一種多糖,B正確;常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法
8、,接種環(huán)、接種針、試管口等常使用灼燒滅菌法,C正確;培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌,試管、燒杯等也可采用高壓蒸汽滅菌法滅菌,D正確。
7.楊梅是某地特色水果之一,某工廠對其深加工,進行了楊梅酒和楊梅醋的研制。請根據(jù)所學知識回答下列問題:
(1)在制備楊梅酒過程中,需要控制的發(fā)酵溫度為 。發(fā)酵罐頂上彎管中常需要加水,其主要目的是 。發(fā)酵一定時間后,觀察到 ,說明發(fā)酵基本完畢。
(2)在制備楊梅醋過程中,發(fā)酵罐內(nèi)需要先填充經(jīng) 處理的木材刨花,然后加入含 菌的培養(yǎng)液,加木材刨花的目的是 ?。辉僮尠l(fā)酵完畢的楊梅酒流入發(fā)酵罐進行楊梅
9、醋發(fā)酵,楊梅醋的pH可通過 來調(diào)節(jié)。
(3)若發(fā)酵好的楊梅酒全部制成楊梅醋,則發(fā)酵制醋過程中CO2的產(chǎn)生量 。
A.是釀酒過程的兩倍
B.與釀酒過程的相等
C.是釀酒過程的一半
D.幾乎為零
解析:(1)進行酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18~25 ℃,酒精發(fā)酵的條件是無氧環(huán)境,因此在發(fā)酵罐頂上彎管中常需要加水,以創(chuàng)造無氧環(huán)境。因為酒精發(fā)酵過程中有二氧化碳產(chǎn)生,所以發(fā)酵一定時間后,觀察到發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有氣泡冒出,說明發(fā)酵基本完畢。(2)在制備楊梅醋過程中,發(fā)酵罐內(nèi)填充的木材刨花應(yīng)進行滅菌處理,醋酸發(fā)酵需要醋酸菌,因此發(fā)酵罐內(nèi)需要加入含醋酸菌的培養(yǎng)液。加木材刨花的目
10、的是使醋酸菌附著在刨花上,能使細菌充分接觸反應(yīng)物。讓發(fā)酵完畢的楊梅酒流入發(fā)酵罐進行楊梅醋發(fā)酵,可通過控制楊梅酒的流速來調(diào)節(jié)楊梅醋的pH。(3)由果酒到果醋的反應(yīng)過程中無二氧化碳氣體產(chǎn)生,因此發(fā)酵制醋過程中CO2的產(chǎn)生量幾乎為零。
答案:(1)18~25 ℃ 防止空氣進入 發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有氣泡冒出 (2)滅菌 醋酸 使該菌附著在刨花上(使該菌充分接觸反應(yīng)物) 控制楊梅酒的流速?。?)D
8.食品安全國家標準GB 4789.40-2016是奶粉中可能含有的細菌克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)的檢測標準,其流程如下,請回答下列問題:
(1)①過程中的BPW培養(yǎng)基為 ?。ㄌ睢肮腆w”“液體”
11、或“半固體”)培養(yǎng)基。
(2)②過程選擇培養(yǎng)時,mLST-Vm培養(yǎng)基中添加的萬古霉素是一種抗生素,分析可得,克羅諾桿菌屬對該抗生素 (填“敏感”或“不敏感”)。
(3)由于②過程的培養(yǎng)產(chǎn)物細菌濃度未知,為避免對其進行稀釋的工作,從②轉(zhuǎn)移至③培養(yǎng)時,需采用的接種方法為 。③過程所需的顯色培養(yǎng)基在制備時的次序是 。
A.調(diào)節(jié)pH B.稱量藥品 C.溶化
D.倒平板 E.滅菌
(4)克羅諾桿菌屬能產(chǎn)生黃色素,積累到一定量的時候,可使整個菌落呈現(xiàn)黃色,據(jù)此,除注釋中的成分外,TSA培養(yǎng)基中還應(yīng)包含 。
(5)食品安全關(guān)系每個人的生命,對一種細菌的鑒定程序
12、也相當嚴格。在上述檢驗程序中,步驟 (填序號)對克羅諾桿菌屬具有一定的選擇或鑒定作用。
解析:(1)①過程中的BPW培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。
(2)②過程選擇培養(yǎng)時,mLST-Vm培養(yǎng)基中添加的萬古霉素是一種抗生素,分析可得,克羅諾桿菌屬對該抗生素不敏感。
(3)由于②過程的培養(yǎng)產(chǎn)物細菌濃度未知,為避免對其進行稀釋的工作,從②轉(zhuǎn)移至③培養(yǎng)時,需采用的接種方法為劃線(接種)法。③過程所需的顯色培養(yǎng)基在制備時的次序是:B.稱量藥品、C.溶化、A.調(diào)節(jié)pH、E.滅菌、D.倒平板。
(4)克羅諾桿菌屬能產(chǎn)生黃色素,積累到一定量的時候,可使整個菌落呈現(xiàn)黃色,形成菌落需配制固體培養(yǎng)基,據(jù)此,除注釋中的成分外,TSA培養(yǎng)基中還應(yīng)包含瓊脂。
(5)食品安全關(guān)系每個人的生命,對一種細菌的鑒定程序也相當嚴格。在上述檢驗程序中,步驟②③④⑤對克羅諾桿菌屬具有一定的選擇或鑒定作用。
答案:(1)液體
(2)不敏感
(3)劃線(接種)法 BCAED
(4)瓊脂
(5)②③④⑤
5