（新課標(biāo)通用）2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 考點(diǎn)42 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用訓(xùn)練檢測（含解析）

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1、考點(diǎn)42　微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 一、基礎(chǔ)題組 1．利用選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物，通過缺氮培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基，可從土壤中分離出的微生物依次是(　　) A．硝化細(xì)菌、放線菌、根瘤菌 B．根瘤菌、青霉菌、圓褐固氮菌 C．圓褐固氮菌、放線菌、硝化細(xì)菌 D．圓褐固氮菌、酵母菌、硝化細(xì)菌 答案　D 解析　缺氮培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基上能生長的生物依次是自生固氮微生物、真菌、硝化細(xì)菌。根瘤菌屬于共生固氮微生物，放線菌不屬于真菌，因此只有D項(xiàng)符合題意。 2．下列關(guān)于制備固體培養(yǎng)基時倒平板的敘述，正確的是(　　) A．倒好的

2、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理 B．應(yīng)將打開的培養(yǎng)皿的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到培養(yǎng)皿的皿蓋上 C．為了防止微生物落入培養(yǎng)基，要在火焰旁進(jìn)行操作 D．倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，要立即將平板倒過來放置 答案　C 解析　培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿都應(yīng)該在倒平板之前進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A錯誤；倒平板時，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10～20 mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，等培養(yǎng)基冷卻凝固后，再將平板倒過來放置，D錯誤。 3. 在分離、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中，劃線接種如圖甲、培養(yǎng)結(jié)果如圖乙。有關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．接

3、種前應(yīng)對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 B．連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落 C．接種過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次 D．圖甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置 答案　D 解析　用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基在接種前應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確；微生物接種采用連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落，B正確；由圖甲可知，平板共劃線4次，每次劃線前和劃線結(jié)束后均需灼燒接種環(huán)，所以至少需要對接種環(huán)灼燒5次，C正確；由圖乙可知，圖甲中d區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置，D錯誤。 4．下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是(　　) A．利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù) B．接種時連續(xù)劃線的目的是將聚

4、集的菌種逐步稀釋獲得單菌落 C．以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌 D．用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少 答案　A 解析　用稀釋涂布平板法可以分離微生物也可以對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，A錯誤；接種劃線可以將菌體分散，經(jīng)過培養(yǎng)可以得到單菌落，B正確；以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌，C正確；在泡菜腌制過程中，開始亞硝酸鹽含量增加，一般腌制10天后含量開始下降，D正確。 5．高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中是極為重要的酶制劑。研究者從熱泉中篩選出了能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，篩選過程如下圖所示。 (1)進(jìn)行②過程所用的接種方法是

5、______________。微生物篩選培養(yǎng)過程，為了防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行____________處理，整個過程中需要進(jìn)行____________操作。 (2)培養(yǎng)基一般要含有細(xì)菌生存所需的水、無機(jī)鹽、碳源和________________。 (3)部分嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可釋放____________分解培養(yǎng)基中的淀粉，在不同菌落周圍形成大小不同的透明圈，應(yīng)挑出______________的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上。 (4)分離細(xì)胞時通常用固體培養(yǎng)基，原因是_____________________________________________________

6、___。 (5)培養(yǎng)微生物實(shí)驗(yàn)中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過__________處理后才能丟掉，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 答案　(1)稀釋涂布平板法　滅菌　無菌 (2)氮源 (3)淀粉酶　透明圈大 (4)固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落，便于進(jìn)行篩選 (5)滅菌 解析　微生物培養(yǎng)前需對培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌處理，整個接種過程中需要進(jìn)行無菌操作；培養(yǎng)基的成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源；本題是要選擇能產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，所以能產(chǎn)生淀粉酶的細(xì)菌會分解培養(yǎng)基中的淀粉，培養(yǎng)基中出現(xiàn)以淀粉分解菌為中心的透明圈，依此可挑選出相應(yīng)的菌落。 6．某實(shí)驗(yàn)小組為了研究不同的碳源對纖維素分解菌

7、分解纖維素能力的影響，以稻草粉、纖維素粉和濾紙漿為纖維素來源，研究了A、B、C、D四種纖維素分解菌，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。請分析回答下列問題： 菌株 CMC酶活性[(mg·mL)/30 min] 稻草粉 纖維素粉 濾紙漿 A 0.27 0.24 0.56 B 0.68 0.34 0.63 C 0.83 0.33 0.78 D 0.18 0.30 0.53 (1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分除了碳源還有________________，培養(yǎng)基滅菌的常用方法為________________。接種微生物的常用方法有_______

8、_________________。 (2)實(shí)驗(yàn)室分離纖維素分解菌的培養(yǎng)基一般要加入__________，該物質(zhì)能和纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素分解菌將纖維素分解后，紅色復(fù)合物消失，形成的________的大小可作為判斷纖維素酶活性大小的依據(jù)。 (3)分析表格可知，該實(shí)驗(yàn)的自變量是______________，若要分解稻草粉中的纖維素，則最好選擇________(填表格中的字母)菌株。 (4)通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)論是________________________________________________________________________ ________

9、________________________________________________________________。 答案　(1)氮源、水和無機(jī)鹽　高壓蒸汽滅菌法　平板劃線法和稀釋涂布平板法 (2)剛果紅　透明圈　(3)纖維素的來源、菌種　C (4)不同菌株對同一碳源作用產(chǎn)生的酶活性不一樣，同一菌株對不同纖維素碳源的分解能力也不一樣 解析　(1)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，培養(yǎng)基滅菌常用的方法為高壓蒸汽滅菌法。平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物常用的方法。 (2)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素

10、被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。透明圈越大，說明纖維素酶活性越大。 (3)該實(shí)驗(yàn)研究不同的碳源對纖維素分解菌分解纖維素能力的影響，并研究了A、B、C、D四種纖維素分解菌， 因此自變量為纖維素的來源、菌種。由表格可知，以稻草粉為纖維素來源時，纖維素分解菌C的CMC酶活性最高，因此要分解稻草粉中的纖維素，最好選擇C菌株。 7．在調(diào)查和分離湖水中耐鹽細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，先將10升湖水水樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到多個培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請分析回答下列問題： (1)可以通

11、過提高培養(yǎng)基中________的濃度，篩選被調(diào)查細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為________培養(yǎng)基。 (2)要提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置的對照組是________________。為檢驗(yàn)(1)中篩選方法的效果，可以設(shè)置的對照組是________________。 (3)在微生物的培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是____________。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長，需將培養(yǎng)皿________培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學(xué)中可以被稱為________。 (4)根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計(jì)算湖水中該種細(xì)菌的密度，但計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少，

12、原因是 ________________________________________________________________________。 (5)在3個細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的樣品液0.1 mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別是156、178和191。該過程采取的接種方法是________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為________個。 答案　(1)鹽(NaCl)　選擇 (2)未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)基　未加高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng) (3)高壓蒸汽滅菌　倒置　種群 (4)當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，在平板上觀察到的是一個菌落 (5

13、)稀釋涂布平板法　1.75×108 解析　(5)每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M＝(156＋178＋191)÷3÷0.1×105＝1.75×108個。 8．某興趣小組欲調(diào)查學(xué)校某區(qū)域土壤中微生物的種類，并進(jìn)行了微生物的分離等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法從土壤中分離分解纖維素的微生物，在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是________________________；分離得到的純化單菌落屬于________(填“種群”或“群落”)；篩選纖維素分解菌常用________法，根據(jù)菌落周圍是否出現(xiàn)________來判定。 (2)

14、該小組采用平板劃線法分離土壤中的微生物，操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是 ________________________________________________________________________。 (3)鑒定土壤中微生物的種類，可以通過菌落的________________________(至少兩點(diǎn))等特征。在實(shí)驗(yàn)中小組每隔24小時統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止________________________________。 答案　(1)檢測培養(yǎng)基滅

15、菌是否合格　種群　剛果紅染色　透明圈 (2)灼燒　將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落 (3)形狀、大小、隆起程度及顏色　因培養(yǎng)時間不足導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)目 解析　(1)在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格；分離得到的純化單菌落是同種生物，屬于種群；篩選纖維素分解菌常用剛果紅染色法，根據(jù)菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈來判定。 (2)接種環(huán)常采用灼燒滅菌法滅菌；在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落。 (3)鑒定土壤中微生物的種類，可以通過菌落的形狀、大小、隆起程度及顏色

16、等特征。在實(shí)驗(yàn)中小組每隔24小時統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)目。 9．下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)表格和所學(xué)知識回答下列相關(guān)問題： 成分 含量 成分 含量 蛋白胨 10.0 g 乳糖 5.0 g 蔗糖 5.0 g K2HPO2 2.0 g 顯色劑(伊紅美藍(lán)) 0.2 g 瓊脂 12.0 g 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000 mL (1)大腸桿菌的同化類型為________，從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看，大腸桿菌屬于________。 (2)

17、在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是________________，因此需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”)，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和________?？諝庵械募?xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使________，還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)。 (3)根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于________(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需將培養(yǎng)基中________換成________，若要鑒定分解尿素的細(xì)菌，還需將伊紅美藍(lán)換成________。 (4)培養(yǎng)大腸桿菌時，常用的接種方法是________________和_____________

18、___。通過上述方法可以分離得到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，稱為________。 (5)(多選)使用以下微生物發(fā)酵生產(chǎn)特定產(chǎn)物時，所利用的主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌相同的是(　　) A．制作果酒 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳 答案　(1)異養(yǎng)型'分解者 (2)防止外來雜菌的污染'滅菌'消毒'蛋白質(zhì)變性 (3)鑒別'蛋白胨' 尿素' 酚紅指示劑 (4)平板劃線法' 稀釋涂布平板法' 菌落 (5)BC 解析　該培養(yǎng)基含有顯色劑(伊紅美藍(lán))，可使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)金屬光澤，因此屬于鑒別培養(yǎng)基。若要分離能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)以尿素為唯一氮源，

19、因此應(yīng)將蛋白胨換成尿素。若要鑒別尿素分解菌，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。制作果酒、果醋、泡菜和腐乳利用的微生物分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌和毛霉，其中醋酸菌、乳酸菌與大腸桿菌都屬于原核生物，酵母菌和毛霉屬于真核生物。 二、模擬題組 10．(2018·成都一診)土壤中的苯酚(C6H5OH)對環(huán)境有極大的污染，實(shí)驗(yàn)室希望能從土壤中分離出能專一性降解苯酚的微生物，下圖是部分實(shí)驗(yàn)過程?；卮鹣铝袉栴}： (1)為了分離純化目的菌種，①～④步驟的培養(yǎng)基中都加入了一定濃度的苯酚，該物質(zhì)能為微生物提供________，除此之外，培養(yǎng)基中一般都還需要水、______________等營養(yǎng)物質(zhì)。 (2)

20、制備步驟④所需要的固體培養(yǎng)基，操作順序是：計(jì)算→稱量→________→________→倒平板。為了在步驟⑤的平板上形成單個的菌落，涂布平板前，需要對培養(yǎng)液進(jìn)行多次稀釋，原因是______________________________________________。 (3)研究人員想通過比較試管甲和乙中微生物的生長情況，來證明分離出來的微生物只能以苯酚作為碳源，若甲試管中的液體培養(yǎng)基中的唯一碳源是苯酚，那么，乙試管中培養(yǎng)基成分與甲相比，區(qū)別是______________________。研究人員對甲、乙兩只試管進(jìn)行接種時，所選菌種都來自步驟⑤平板上的同一個單菌落，這樣做的目的是____

21、______________________。 答案　(1)碳源　氮源和無機(jī)鹽 (2)溶化　滅菌　在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成單個細(xì)胞 (3)用其他碳源替代苯酚　保證甲、乙兩支試管中的微生物種類是相同的 解析　(1)①～④步驟的培養(yǎng)基中苯酚可以為微生物提供碳源，此外培養(yǎng)基中還應(yīng)該包括水、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)成分。 (2)制備固體培養(yǎng)基的操作順序?yàn)椋河?jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。為了在步驟⑤的平板上形成單個的菌落，涂布平板前，需要對培養(yǎng)液進(jìn)行多次稀釋，是因?yàn)樵谙♂尪茸銐蚋叩木豪?，聚集在一起的微生物易于分散成單個細(xì)胞。 (3)甲乙試管是對照實(shí)驗(yàn)，如果甲加入的是

22、苯酚，則乙試管加入的是可以替代苯酚的其他碳源。研究人員對甲、乙兩只試管進(jìn)行接種時，所選菌種都來自步驟⑤平板上的同一個單菌落，以保證甲、乙兩支試管中的微生物種類是相同的。 11．(2018·山東二模)科研人員從青藏高原祁連山地區(qū)的土壤中分離篩選出一株高效耐低溫原油降解菌YF28－1(8)，應(yīng)用該菌能夠提高高寒地區(qū)石油等烴類污染物的分解效率，為我國的環(huán)境保護(hù)事業(yè)做出貢獻(xiàn)。請回答相關(guān)問題： (1)選擇青藏高原祁連山地區(qū)進(jìn)行篩選，其原因是________________________________________。 (2)篩選原油降解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入________作為唯一碳源。從功能上看

23、，該種培養(yǎng)基稱為________培養(yǎng)基。 (3)用平板劃線法純化該細(xì)菌時，第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始的原因是__________________________________________________。 (4)研究人員設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究該菌降解原油的最適溫度。實(shí)驗(yàn)分為5組，下圖A～E為各組培養(yǎng)一段時間后菌落的生長情況。本實(shí)驗(yàn)所使用的接種方法是______________________，接種操作時應(yīng)特別注意控制的無關(guān)變量是________________。A～E組控制的不同條件是________。若要確定更準(zhǔn)確的最適溫度，應(yīng)該在________組和________組所

24、對應(yīng)的溫度范圍內(nèi)設(shè)置更小的溫度梯度，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。 答案　(1)該地區(qū)的微生物更耐低溫 (2)原油(或石油)　選擇 (3)將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落 (4)稀釋涂布平板法　接種的菌液量(或涂布器的滅菌情況)　溫度　B　D 解析　(1)要篩選出耐低溫的原油降解菌，需從低溫環(huán)境去選擇。 (2)要想篩選出能降解石油的細(xì)菌，培養(yǎng)基中只有一種碳源，即原油，這是一種選擇培養(yǎng)基。 (3)第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始的原因是將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落。 (4)由圖示可知，該實(shí)驗(yàn)的接種方法為稀釋涂布平板法。接種時應(yīng)特別注意控制的無關(guān)變量是接種的菌液量、涂布

25、器的滅菌情況等。A～E組控制的不同條件是溫度。從圖中可以看出C組的菌落數(shù)最多，因此要確定更準(zhǔn)確的最適溫度，應(yīng)該在B和D所對應(yīng)的溫度范圍內(nèi)設(shè)置更小的溫度梯度，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。 12．(2018·廣東一模)下圖表示某種感染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程，其中Ⅳ中出現(xiàn)6個菌落。請回答下列有關(guān)問題： (1)Ⅳ中是固體培養(yǎng)基，與Ⅱ(Ⅲ)中的液體培養(yǎng)基所含的基本成分相同，都含有____________________，不同的是制作Ⅳ時加入了________以使培養(yǎng)基呈固態(tài)。 (2)鑒定前進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，目的是__________________________________；兩次接種均應(yīng)在________條件

26、下操作，防止雜菌污染。 (3)Ⅳ中出現(xiàn)的理想菌落應(yīng)分別由________所形成。若菌落連成片，則應(yīng)對Ⅲ中的培養(yǎng)液進(jìn)行________處理再接種；通過觀察菌落的________能初步鑒定可疑細(xì)菌。 (4)為進(jìn)一步了解這種細(xì)菌對抗生素的敏感性以方便對癥下藥，現(xiàn)用青霉素、羅紅霉素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，請簡述實(shí)驗(yàn)思路：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________

27、________________________________________________________________________。 答案　(1)水、碳源、氮源、無機(jī)鹽　瓊脂 (2)讓細(xì)菌繁殖，獲得足夠數(shù)量的細(xì)菌用于實(shí)驗(yàn)　無菌 (3)單個活細(xì)菌　稀釋　特征 (4)分別配制濃度適宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌)，再分別處理Ⅳ中各兩個菌落，另兩個菌落作對照，然后在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況[或分別配制濃度適宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌)，準(zhǔn)備多個與Ⅳ相同的(無菌)培養(yǎng)基，平均分成三組，用青霉素、羅紅霉素溶液分別處理兩組，另一組不處理作對照，然后同時對三

28、組進(jìn)行接種，在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況] 解析　(1)固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基的基本成分都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽；固體培養(yǎng)基含有瓊脂以使培養(yǎng)基呈固態(tài)。 (2)鑒定前進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，目的是讓細(xì)菌繁殖，獲得足夠數(shù)量的細(xì)菌用于實(shí)驗(yàn)；兩次接種均應(yīng)在無菌條件下操作，防止雜菌污染。 (3)Ⅳ號培養(yǎng)基中出現(xiàn)的理想菌落應(yīng)分別由單個活細(xì)菌所形成；若菌落連成片，則應(yīng)對Ⅲ中的培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋處理再接種；通過觀察菌落的特征能初步鑒定可疑細(xì)菌。 (4)根據(jù)題意分析，實(shí)驗(yàn)的目的是探究這種細(xì)菌對青霉素、羅紅霉素的敏感性，自變量是抗生素的種類，根據(jù)單一變量原則和對照性原則設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：分別配制濃度適宜且相同的青霉

29、素、羅紅霉素溶液(無菌)，再分別處理Ⅳ中各兩個菌落，另兩個菌落作對照，然后在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況。[或分別配制濃度適宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌)，準(zhǔn)備多個與Ⅳ相同的(無菌)培養(yǎng)基，平均分成三組，用青霉素、羅紅霉素溶液分別處理兩組，另一組不處理作為對照，然后同時對三組進(jìn)行接種，在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況。 13．(2018·保定一模)下表是某研究小組配制的適合尿素分解菌生長的培養(yǎng)基，請回答下列問題： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 瓊脂

30、15.0 g 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000 mL (1)上述培養(yǎng)基的成分中，為尿素分解菌提供碳源的是________，提供氮源的是________。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于________培養(yǎng)基；從功能上看，屬于________培養(yǎng)基。 (2)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于________________________，此時平板上的菌落數(shù)較能準(zhǔn)確的反映樣品中的活菌數(shù)。 (3)培養(yǎng)過程中，常選擇菌落數(shù)在________區(qū)間的平板統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的真實(shí)數(shù)目低，原因是______________________________

31、__________________________________________ __________________。 (4)尿素分解菌經(jīng)X射線照射后不能正常生長，添加某種維生素后才能正常生長，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)葡萄糖　尿素　固體　選擇 (2)樣品稀釋液中的一個活菌 (3)30～300　

32、當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落 (4)X射線照射導(dǎo)致尿素分解菌發(fā)生基因突變，從而缺少合成某種維生素必需的酶 解析　(1)題中表格的培養(yǎng)基成分中，為尿素分解菌提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于固體培養(yǎng)基；從功能上看，屬于選擇培養(yǎng)基。 (2)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，此時平板上的菌落數(shù)較能準(zhǔn)確的反映樣品中的活菌數(shù)。 (3)培養(yǎng)過程中，常選擇菌落數(shù)在30～300區(qū)間的平板統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的真實(shí)數(shù)目低，是因?yàn)楫?dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落。 (4)尿

33、素分解菌經(jīng)X射線照射后不能正常生長，添加某種維生素后才能正常生長，可能是因?yàn)閄射線照射導(dǎo)致尿素分解菌發(fā)生基因突變，從而缺少合成某種維生素必需的酶。 三、高考題組 14．(2017·全國卷Ⅰ)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}： (1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是________________________________________________________________________。 但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的

34、主要作用是____________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇__________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是____________________________。 (3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有__________________________(答出兩點(diǎn)即可)。 答案　(1)脲酶　分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物　為細(xì)胞生命活動提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料　

35、(2)尿素　其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用　(3)為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定 解析　(1)有些細(xì)菌能分解尿素是因?yàn)檫@些細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解成CO2和NH3。能分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2作為碳源合成有機(jī)物，但這些細(xì)菌可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是作為能源物質(zhì)氧化分解為細(xì)胞生命活動提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，這樣只有能分解尿素的細(xì)菌才能在培養(yǎng)基上生存。若選擇“NH4

36、NO3”或“尿素＋NH4NO3”作為氮源，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用。 (3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，它們可以為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng)；同時，KH2PO4和Na2HPO4還可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定。 15．(2017·江蘇高考)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題： (1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有________。 (

37、2)將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸________，以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應(yīng)進(jìn)一步________，以便于菌落計(jì)數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加________。 (3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中________(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。 (4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng)，下表中1～5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為______________________。 管號 1 2 3 4 5 6 苯酚濃度(mg/L)

38、 1 如果廢水為50 mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋________(填序號：①5　②10?、?0)倍后，再進(jìn)行比色。 答案　(1)蛋白胨、苯酚 (2)增加　稀釋涂布　凝固劑 (3)③ (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8?、? 解析　(1)分析富集培養(yǎng)基的成分可知，培養(yǎng)基中蛋白胨、苯酚中含C，可作為碳源。 (2)在接種培養(yǎng)時，隨轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加，應(yīng)逐漸增加培養(yǎng)基中苯酚(碳源)的含量，以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若接種培養(yǎng)后平板中菌落過于密集，應(yīng)繼續(xù)稀釋涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計(jì)數(shù)與分離。稀釋涂布時所用的培養(yǎng)基為

39、固體培養(yǎng)基，制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加瓊脂等物質(zhì)作為凝固劑。 (3)利用連續(xù)劃線法接種時，越在最后劃線區(qū)域，菌落的密度越小，越容易獲得單菌落，所以，圖中③區(qū)域更易獲得單菌落。 (4)根據(jù)表中6號比色管中苯酚濃度為1 mg/L可以推知，1～5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L。根據(jù)題意，廢水為50 mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，要使稀釋后的苯酚殘留液濃度介于0～1 mg/L之間，需將殘留液稀釋20倍左右，再進(jìn)行比色。 16．(2018·全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一

40、定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。 回答下列問題： (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有__________________(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有________________(答出兩點(diǎn)即可)。 (3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的

41、微生物。加入的顯色劑是________，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是______________________________________________________。 (4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果： 甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133； 乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。 有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是__________________________________________

42、____________________________。 答案　(1)細(xì)菌　選擇　(2)碳源、無機(jī)鹽　蛋白質(zhì)、核酸　(3)碘液　淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈　(4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差 解析　(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其他微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細(xì)菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (2)微生物生長需要多種營養(yǎng)物質(zhì)，除氮源外，還需要碳源、無機(jī)鹽、水以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮

43、源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸。 (3)依據(jù)淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。 (4)乙同學(xué)結(jié)果不合理，因?yàn)?個平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。 17．(2018·全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。 回答下列問題： (1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)_______(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)

44、是________________________________。 (3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能__________________，在照射前，適量噴灑__________________，可強(qiáng)化消毒效果。 (4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是____________________。 答案　(1)可以　(2)在達(dá)到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少　(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)　消毒液　(4)氯氣 (5)未

45、將鍋內(nèi)冷空氣排盡 解析　(1)能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。 (2)煮沸消毒法即在100 ℃煮沸5～6 min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75 ℃煮30 min 或在80 ℃煮15 min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點(diǎn)是在達(dá)到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。 (3)因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。 (4)乙醇消毒后有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；氯氣具有強(qiáng)氧化性可以用于水源消毒，因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。 (5)采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。 - 14 -