2019-2020年高考生物 考前30天沖刺押題系列 專(zhuān)題17 生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用.doc

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2019-2020年高考生物 考前30天沖刺押題系列 專(zhuān)題17 生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用 一、考綱解讀 考綱下載 考綱解讀 命題規(guī)律 命題趨勢(shì) 1.利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物 1.掌握制作果酒、果醋、腐乳的原理和方法；理解發(fā)酵的條件及控制；學(xué)會(huì)運(yùn)用比色法測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽的含量。 2.了解利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶等。 3.了解血紅蛋白提取的原理。 4.知道RCR技術(shù)與DNA體內(nèi)復(fù)制的區(qū)別，了解PCR技術(shù)的基本操作方法。 5.掌握DNA粗提取的原理、方法和注意事項(xiàng)，理解DNA鑒定的原理。 從近幾年新課標(biāo)地區(qū)高考命題分析，本專(zhuān)題知識(shí)點(diǎn)考查主要體現(xiàn)在以下三個(gè)方面： （1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，果酒、果醋和腐乳的制作是考查的重點(diǎn)。 （2）生物材料中特定成分的提取和蛋白質(zhì)的分離在高考中也有體現(xiàn)。 （3）PCR技術(shù)在高考中也有所涉及。 命題角度：本專(zhuān)題與生產(chǎn)生活實(shí)際聯(lián)系緊密，在考查時(shí)注重與實(shí)踐、實(shí)驗(yàn)相結(jié)合。 考查形式：在新課標(biāo)地區(qū)以簡(jiǎn)答題形式為主，江蘇、廣東則簡(jiǎn)答、選擇均有出現(xiàn)。 命題趨勢(shì) “傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用”中“果酒、果醋、泡菜、腐乳的制作原理與技術(shù)流程”試題較多，為今后高考命題熱點(diǎn)。但命題難度不會(huì)太大，難度系數(shù)一般在0.75左右。 “生物材料中有效成分提取”將在今后高考命題中也有出現(xiàn)，但往往以選擇題形式出現(xiàn)，難度系數(shù)也在0.75左右。 2. 微生物在其他方面的應(yīng)用 3.蛋白質(zhì)的提取和分離 4. PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用 5. DNA的粗提取與鑒定 6.植物有效成分的提取 熱點(diǎn)題型1 以微生物發(fā)酵原理為基礎(chǔ)，解答與果酒、果醋、腐乳及其泡菜制作有關(guān)的試題 【例1】圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣，溶液中有氣泡產(chǎn)生；中期可以聞到酒香；后期接種醋酸菌，適當(dāng)升高溫度并通氣，酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個(gè)發(fā)酵過(guò)程培養(yǎng)液pH變化的曲線是 （ ） A．① B．② C．③ D．④ 【例2】在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有關(guān)敘述正確的是（ ） A．果醋發(fā)酵階段應(yīng)封閉充氣口，防止雜菌進(jìn)入 B．腌制腐乳的鹵湯中應(yīng)含有12％左右的酒精以抑制細(xì)菌的增殖 C．利用自然菌種發(fā)酵果酒時(shí)，將封有葡萄汁的發(fā)酵瓶進(jìn)行高壓滅菌 D．將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口部分的鹽要鋪薄一些 【例3】葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生葡萄酒，請(qǐng)利用相關(guān)的知識(shí)回答問(wèn)題： （1）利用葡萄制作葡萄酒的過(guò)程中，發(fā)揮作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （2）該微生物通過(guò)無(wú)氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，產(chǎn)生的終產(chǎn)物是＿＿＿＿和＿＿＿＿。 （3）甲、乙、丙三位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵，如圖所示。發(fā)酵過(guò)程中，每隔一段時(shí)間均需排氣一次。據(jù)圖分析，甲和丙同學(xué)的操作有誤，其中甲同學(xué)的錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異常現(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同學(xué)的錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿＿，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異?，F(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述發(fā)酵過(guò)程結(jié)束后，甲、乙、丙同學(xué)實(shí)際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。 （4）在上述制作葡萄酒的過(guò)程中，假設(shè)乙同學(xué)的某一步驟操作錯(cuò)誤導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開(kāi)，該操作錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 【解析】：本題考查制作果酒所用的微生物、發(fā)酵裝置和發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題。從葡萄酒生產(chǎn)所用的微生物的代謝特點(diǎn)、發(fā)酵過(guò)程中裝置充氣口和放氣口的控制入手解答該題。酵母菌無(wú)氧呼吸可以產(chǎn)生酒精和CO2，是葡萄酒制作過(guò)程中發(fā)揮作用的微生物。酵母菌只有在無(wú)氧條件下，才能進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；甲裝置的充氣口始終開(kāi)放，不能創(chuàng)造瓶?jī)?nèi)無(wú)氧環(huán)境，不能用來(lái)生產(chǎn)果酒；在有氧條件下，醋酸菌可以能利用葡萄糖產(chǎn)生醋酸。酵母菌在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的CO2導(dǎo)致乙裝置中氣壓升高，要定期打開(kāi)排氣管進(jìn)行放氣。丙裝置瓶中發(fā)酵液過(guò)多，淹沒(méi)了排氣管在瓶?jī)?nèi)的管口，不利于放氣；同時(shí)導(dǎo)致瓶?jī)?nèi)氧氣過(guò)少，不利于發(fā)酵前期酵母菌的大量繁殖。 題型攻略 【方法技巧】①?gòu)拇姿峋徒湍妇拇x類(lèi)型、生存條件及兩者在代謝上的聯(lián)系等角度去理解果酒和果醋的制作原理；從材料的選擇和處理、發(fā)酵液和發(fā)酵用具清潔度的保持、發(fā)酵條件的控制等角度綜合理解果酒和果醋的制作過(guò)程；從微生物的數(shù)目、代謝產(chǎn)物產(chǎn)量、產(chǎn)品的色澤口味、裝置內(nèi)發(fā)生的能用肉眼觀察到的變化及用設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的方法等角度對(duì)果酒和果醋制作結(jié)果進(jìn)行分析和評(píng)價(jià)。如在果醋的制作時(shí)，根據(jù)醋酸菌屬好氧性細(xì)菌的特征，在發(fā)酵時(shí)，應(yīng)通入無(wú)菌空氣；根據(jù)菌膜的形成情況對(duì)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。②注意傳統(tǒng)方法在腐乳制作過(guò)程中的應(yīng)用及其原理，如腌制腐乳的過(guò)程要加鹽，加鹽可以抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)；在初期也可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期制作過(guò)程中不會(huì)過(guò)早酥爛有調(diào)味作用。從乳酸菌的代謝特征入手解答制作過(guò)程中的條件控制；從具體過(guò)程的作用、乳酸菌和其他微生物間的關(guān)系入手解答泡菜制作的過(guò)程中出現(xiàn)的一些異常現(xiàn)象。如根據(jù)乳酸菌屬厭氧性細(xì)菌的特征，在制作泡菜式時(shí)，應(yīng)將裝置密封；泡菜的制作方法不當(dāng)，很容易造成泡菜變質(zhì)，甚至發(fā)霉變味，可能的原因是泡菜壇子密封不嚴(yán)或取菜工具不衛(wèi)生或鹽的比例過(guò)小，都會(huì)引起雜菌滋生、泡菜變質(zhì)。 【易錯(cuò)指導(dǎo)】（1）關(guān)于腐乳制作的某些知識(shí)辨析不清，應(yīng)通過(guò)熟記相關(guān)知識(shí)點(diǎn)來(lái)避免錯(cuò)誤的發(fā)生。易錯(cuò)點(diǎn)如下：a沒(méi)弄清楚參與腐乳形成的微生物，參與的微生物很多，但主要是毛霉；b水量的控制不適宜，含水量70%為宜，過(guò)高、過(guò)低都影響腐乳的品質(zhì)——形狀、口味等；c對(duì)鹵湯的成分和作用不熟，鹵湯中鹽、酒、香辛料都有殺菌、防腐與調(diào)味的功能；d對(duì)制作原理不熟，制作原理是毛霉產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將豆腐中的蛋白質(zhì)、脂肪分解為多肽、甘油和脂肪酸等物質(zhì)。（2）對(duì)微生物發(fā)酵過(guò)程中滅菌措施考慮得不夠全面，應(yīng)該從原料、裝置和實(shí)驗(yàn)過(guò)程三個(gè)層次進(jìn)行無(wú)菌操作。如a果酒與果醋制作中原料的消毒：①榨汁前葡萄應(yīng)先沖洗再去枝梗，因?yàn)樵谌ス５耐瑫r(shí)會(huì)使一些微生物侵入果實(shí)內(nèi)部，給消毒帶來(lái)一定的困難；②體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最強(qiáng)，其原因是濃度過(guò)低，殺菌力弱；濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其內(nèi)，因此殺菌效果受影響。b腐乳制作過(guò)程中的殺菌消毒： ①制作腐乳的玻璃瓶用溫水沖洗并用酒精消毒；②酒、鹽、香辛料都有殺菌作用；③接種、封瓶時(shí)都要進(jìn)行無(wú)菌操作。 熱點(diǎn)題型2 掌握物質(zhì)提取原理，解答從生物材料中提取特定成分的相關(guān)試題 【例1】請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)的問(wèn)題： （1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、 和 。 （2）芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于 ，易溶于 ，因此可用 作為提取劑來(lái)提取芳香油。 （3）橘子果實(shí)含有芳香油，通?？捎? 作為材料提取芳香油，而且提取時(shí)往往選用新鮮的材料，理由是 。 　?。?）對(duì)材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是 。 　?。?）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時(shí)間后，芳香油將分布于液體的 層，原因是 。加入氯化鈉的作用是 。 　?。?）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無(wú)水硫酸鈉，此劑的作用是 。 【例2】下列是與芳香油提取有關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答： （1）玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液（是、不是）純的玫瑰精油，原因是 。 （2）當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過(guò)程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和 。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢(shì)是。 （3）如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，則精油的提取量會(huì) ，原因是 。 （4）密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好放在溫度 的地方，目的是 。 (5)某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的變化趨勢(shì)如下圖所示。提取精油時(shí)采摘花的最合適時(shí)間為 天左右。 （6）從薄荷葉中提取薄荷油時(shí) （能、不能）采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是 。 摘花的最適時(shí)間為花中精油的相對(duì)含量最高的時(shí)間，即a天左右。（6）因薄荷油和玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似，易揮發(fā)、難溶于水等；故也可用于玫瑰精油相同的方法提取。 【例3】Ⅰ.下面圖一為胡蘿卜素粗品鑒定裝置示意圖，圖二為胡蘿卜素的紙層析結(jié)果示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。 （1）圖一中b的名稱是 ，a的作用是 ，e為 ，對(duì)于e實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意 ，f為 ，常用 ，如果層析液沒(méi)及e會(huì)導(dǎo)致 。 （2）圖二中A、B、C、D四點(diǎn)中，屬于標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點(diǎn)是_____，屬于提取樣品的樣點(diǎn)是_____?；€一般距底邊________cm；在圖中的層析譜中，①代表的物質(zhì)是_______，②代表的物質(zhì)是___________。 Ⅱ.為了探討提取溶劑系統(tǒng)對(duì)類(lèi)胡蘿卜素提取的影響，科研人員分別用六種不同的溶劑系統(tǒng)按相同的提取步驟進(jìn)行提取，比較類(lèi)胡蘿卜素的含量，以尋找不同植物品種的最佳的提取溶劑，請(qǐng)據(jù)圖表作答：。 （1）表中所用的提取溶劑，均為有機(jī)溶劑，原因是____________。 （2）在本實(shí)驗(yàn)中，提取步驟必需相同，理由：________________。 （3）請(qǐng)依據(jù)圖一，寫(xiě)出它的實(shí)驗(yàn)課題：______________________________，其實(shí)驗(yàn)自變量為_(kāi)_________，因變量為_(kāi)__________。 （4）從圖一和圖二及兩者比較中，你能得出哪兩個(gè)結(jié)論？_________________________。 【答案】：Ⅰ.（1）色譜容器，防止層析液揮發(fā) ，樣品原點(diǎn)，點(diǎn)樣應(yīng)該快速細(xì)致并保持濾紙干燥，溶液 石油醚 ，胡蘿卜素溶解在層析液中，導(dǎo)致鑒定失?。唬?）A和D；B和C；2 ，胡蘿卜素；其他色素和雜質(zhì)。 Ⅱ.（1）有機(jī)溶劑能充分溶解類(lèi)胡蘿卜素；（2）確保單一變量；（3）探究六種溶劑系統(tǒng)對(duì)枸杞中類(lèi)胡蘿卜素提取的影響；六種溶劑；類(lèi)胡蘿卜素量；（5）結(jié)論一：六種溶劑對(duì)同一品種的類(lèi)胡蘿卜素的提取量影響不同；結(jié)論二：不同品種的最佳提取的溶劑種類(lèi)不同。 題型攻略 【知識(shí)儲(chǔ)備】蒸餾、壓榨和萃取三種方法的比較 提取方法 水蒸氣蒸餾 壓榨法 有機(jī)溶劑萃取 實(shí)驗(yàn)原理 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái) 通過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油 使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油 方法步驟 （1）水蒸氣蒸餾 （2）分離油層 （3）除水過(guò)濾 （1）石灰水浸泡、漂洗 （2）壓榨、過(guò)濾、靜置 （3）再次過(guò)濾 （1）粉碎、干燥 （2）萃取、過(guò)濾 （3）濃縮 適用范圍 適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油 適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取 適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中 優(yōu)點(diǎn) 簡(jiǎn)單易行，便于分離 生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能 出油率高，易分離 局限性 水中蒸餾導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問(wèn)題 分離較為困難，出油率相對(duì)較低 使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響芳香油的質(zhì)量 特別注意： ①水蒸氣蒸餾要適當(dāng)延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間，溫度不能太高。 ②用于萃取的有機(jī)溶劑必須事先精制，除去雜質(zhì)。 ③壓榨時(shí)原料必須要浸透，這樣壓榨時(shí)不會(huì)滑脫，出油率高，不堵塞篩眼；使用石灰水充分浸泡原料，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率。 【易錯(cuò)指導(dǎo)】①層析時(shí)沒(méi)有選擇干凈的濾紙，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯；為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染，應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙，可以帶手套進(jìn)行操作。②點(diǎn)樣時(shí)點(diǎn)樣斑點(diǎn)太大（直徑應(yīng)大于0.5 cm），導(dǎo)致最終在濾紙形成一條線，無(wú)法辨認(rèn)被提取的色素；點(diǎn)樣斑點(diǎn)的直徑應(yīng)小于0.5 cm。③將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀，卷紙時(shí)將濾紙兩邊相互接觸，由于毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，溶劑前沿不齊，影響結(jié)果；為避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，卷紙時(shí)不能將濾紙兩邊相互接觸。④層析液沒(méi)及樣品原點(diǎn)，色素溶解于層析液中，造成實(shí)驗(yàn)失??；層析液不可沒(méi)及樣品原點(diǎn)，以免色素溶解于層析液中，使鑒定失敗。⑤沒(méi)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照；層析是否提取到胡蘿卜素，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)樣品中的β-胡蘿卜素作對(duì)比予以確認(rèn)。 熱點(diǎn)題型3 掌握原理和流程，正確解答DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)的相關(guān)問(wèn)題 【例1】下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有 A．提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞 B．用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì) C．蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA D．蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化 【例2】PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答： （1）A過(guò)程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過(guò)程的原理敘述，正確的是 。 A.該過(guò)程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵 B.該過(guò)程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵 C.該過(guò)程不需要解旋酶的作用 D.該過(guò)程與人體細(xì)胞的過(guò)程完全相同 （2）C過(guò)程要用到的酶是。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以 加入, （需要/不需要）再添加。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有: 。 （3）如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“94℃~55℃~72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占 。 （4）如果模板DNA分子共有a個(gè)堿基對(duì)，其中含有胞嘧啶m個(gè)，則該DNA復(fù)制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸個(gè) 。 （5）PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于 。假設(shè)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測(cè)所用DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占 。 【例3】某生物興趣小組開(kāi)展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下： 材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份l0g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于一20℃條件下保存24 h。 DNA粗提?。? 第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入l5 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過(guò)濾。取濾液備用。 第二步：先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol／L NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測(cè)：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝螅糜诜兴屑訜? min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20℃ + + + + + + -20℃ + + + + + + + + + 分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程，回答下列問(wèn)題： (1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是 。 (2)第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少 。 (3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 ①結(jié)論1：與20℃相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在-20℃條件下保存，DNA的提取量較多。 結(jié)論2： 。 ②針對(duì)結(jié)論I．請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專(zhuān)? 。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是： ，然后用體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精溶液使DNA析出。 題型攻略 【知識(shí)儲(chǔ)備】1.生物體內(nèi)DNA復(fù)制與PCR反應(yīng)的區(qū)別 比較項(xiàng)目 體內(nèi)復(fù)制 PCR反應(yīng) 解旋 在解旋酶作用下，細(xì)胞提供能量，部分解開(kāi) 加熱至90℃，雙鏈全部解開(kāi)，不需要解旋酶 引物 一小段RNA 可以是RNA或單鏈DNA分子片段 特點(diǎn) 邊解旋邊復(fù)制，半保留復(fù)制 體外迅速擴(kuò)增 TaqDNA聚合酶 不需要（只需DNA聚合酶） 需要 循環(huán)次數(shù) 受生物體自身控制 30多次 相同點(diǎn) 生物體內(nèi)的DNA復(fù)制或PCR體外DNA擴(kuò)增都需要模板，四種脫氧核苷酸，且都需要在一定的緩沖液中進(jìn)行，都遵循半保留復(fù)制。 2.血紅蛋白的分離方法及相關(guān)原理 方法 原理 凝膠色譜法 根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) 電泳法 根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同進(jìn)行分離 3. DNA粗提取與鑒定不同試劑用途及原理比較 試劑 濃度 用 途 原理（“△”為實(shí)驗(yàn)的主要原理） NaCl 溶液 2mol/L 溶解DNA DNA在氯化鈉溶液中的溶解度隨溶液濃度的變化而改變，溶解度在2mol/L時(shí)最大、0.14mol/L時(shí)最小 △ 0.14mol/L 析出DNA 0.015mol/L 鑒定時(shí)的溶媒 該濃度下也能溶解DNA 酒精 95%（體積分?jǐn)?shù)） 除雜以提純DNA DNA不溶于酒精，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液 △ 二苯胺 鑒定劑 DNA遇二苯胺（沸水?。?huì)染成藍(lán)色 △ 檸檬酸鈉 0.1g/mL 抗凝劑 除去血液中的鈣離子，防止血液凝固 【方法技巧】①不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時(shí)，應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。②材料不同，所采用的提取方法不同：a植物組織，取材→研磨→過(guò)濾→沉淀。b雞血，制備雞血細(xì)胞液→提取核DNA→溶解細(xì)胞核內(nèi)DNA→析出并濾取DNA→DNA再溶解→提取較純凈的DNA。