（江蘇專用）2019年高考生物一輪總復(fù)習(xí) 第12單元 生物技術(shù)實(shí)踐 第1講 微生物的分離與培養(yǎng)學(xué)案.doc

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第1講　微生物的分離與培養(yǎng) 考綱考情 考查內(nèi)容 等級(jí)要求 考查詳情 微生物的分離和培養(yǎng) B 17年—非選—T31考查微生物的分離與培養(yǎng)選擇相關(guān)知識(shí) 16年—多選—T25考查微生物的選擇的相關(guān)知識(shí) 15年—單選—T19以文字?jǐn)⑹龅男问娇疾閱芜x微生物分離與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 15年—非選—T31微生物的分離與培養(yǎng) 某種微生物數(shù)量的測(cè)定,C,15年—單選—T13考查血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的使用 微生物的應(yīng)用,B, 14年—非選—T30結(jié)合β－胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)考查微生物的分離和培養(yǎng)的操作過(guò)程及注意事項(xiàng) 13年—單選—T18 結(jié)合廢水處理問(wèn)題考查微生物的分離和培養(yǎng)的操作過(guò)程及注意事項(xiàng) 13年—多選—T24探究微生物對(duì)秸稈的分解作用 知識(shí)整合 一、微生物的培養(yǎng) 1．培養(yǎng)基 (1)概念：人們按照微生物對(duì)________的不同需求，配制出供其________的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。 (2)營(yíng)養(yǎng)組成：一般都含有________________和無(wú)機(jī)鹽。此外，還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)________、氧氣以及________________的要求。 (3)種類 ①按照物理狀態(tài)可分為：________培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。 ②按化學(xué)成分可分為：________、合成培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。 ③按功能可分為：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、________、鑒別培養(yǎng)基等。 2．微生物培養(yǎng)的基本技術(shù) (1)無(wú)菌操作技術(shù) 含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止________________的方法。 關(guān)鍵：防止________________的入侵。 具體措施 ①消毒 a．特點(diǎn)：使用較為_(kāi)_______的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體________(不包括芽孢和________)。 b．常用方法：煮沸消毒法、________、化學(xué)藥劑消毒法。 ②滅菌 a．特點(diǎn)：指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外________________________，包括芽孢和孢子。 b．常用方法：________滅菌、干熱滅菌、________滅菌、紫外線消毒。 (2)接種技術(shù) ①平板劃線法：是通過(guò)________在瓊脂固體培養(yǎng)基表面________的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。 ②________法：是將菌液進(jìn)行一系列的________，然后將________的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。 二、微生物的分離與計(jì)數(shù) 1．微生物的分離 (1)原理：根據(jù)微生物對(duì)________________________等要求的不同，通過(guò)只提供目的微生物生長(zhǎng)的必需條件，或加入____________________使非目的微生物不能生長(zhǎng)，從而達(dá)到____________________的目的。 (2)鑒定依據(jù)：________的特征。 (3)方法：________________和________________。 2．微生物的數(shù)量測(cè)定 準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)器材：無(wú)菌條件 ↓ 采集土壤，制備懸液：配成____________的系列懸液 ↓ 選擇適于分離特定微生物的培養(yǎng)基：平板培養(yǎng)基的制備 ↓ 接種：無(wú)菌操作 ↓ 培養(yǎng)與觀察：____________________________ ↓ 計(jì)數(shù)菌落：選取______________的一組為代表，進(jìn)行統(tǒng)計(jì) 每克土壤樣品的細(xì)菌數(shù)＝ 3．分解纖維素的微生物的分離——纖維素分解菌的篩選 (1)取樣：選擇富含________的環(huán)境。 (2)將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 ①制備鑒別培養(yǎng)基：主要的碳源是______________________ ②剛果紅染色法 a．先培養(yǎng)____________________，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)。 b．倒平板時(shí)加入______________________________。 考點(diǎn)突破 考點(diǎn)1　無(wú)菌操作技術(shù)與微生物 的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)　　1.消毒和滅菌的區(qū)別 條件 結(jié)果 常用方法 應(yīng)用范圍 消毒 較為溫和的物理或化學(xué)方法 僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高溫的液體 化學(xué)藥劑消毒法 用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源 滅菌,強(qiáng)烈的理化因素,殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子, 灼燒滅菌法,接種工具 干熱滅菌法,玻璃器皿、金屬用具 高壓蒸汽滅菌法,培養(yǎng)基及容器 2．三種常用滅菌方法的比較 滅菌方法 適用材料或用具 滅菌條件 滅菌時(shí)間 灼燒滅菌 接種環(huán)、接種針或其他金屬工具 酒精燈火焰的充分燃燒層 直至燒紅 干熱滅菌 玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等 干熱滅菌箱內(nèi)，160℃～170℃ 1 h～2 h 高壓蒸 汽滅菌 培養(yǎng)基等 高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；100 kPa，121 ℃ 15 min～ 30 min 　　3.平板劃線法與稀釋涂布平板法的比較 (1)平板劃線法(如圖1所示) 幾種平板劃線方法示意圖 圖1 (2)稀釋涂布平板法 ①系列稀釋操作(如圖2所示) 圖2 ②涂布平板操作(如圖3所示) 圖3 (3)兩種純化細(xì)菌方法(平板劃線與稀釋涂布平板)比較 項(xiàng)目 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 適用范圍 平板劃線法 可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離 不能計(jì)數(shù) 適用于好氧菌 稀釋涂布 平板法 可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征 吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延 適用于厭氧菌和兼性厭氧菌 1．平板劃線時(shí)注意事項(xiàng) (1)接種環(huán)的灼燒 ①第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物 ②每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末端 ③劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者 (2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進(jìn)行操作，以免溫度太高殺死菌種 (3)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連 (4)劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破 2．稀釋涂布平板注意事項(xiàng) (1)稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2 cm處 (2)涂布平板時(shí) ①涂布器用體積分?jǐn)?shù)為70%酒精消毒，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃 ②不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精 ③酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體 3．“倒平板”的意義 平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染 例1　(2016江蘇高考)(多選)漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。如圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C．在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，通過(guò)劃線進(jìn)一步純化 D．斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株 1．空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： ①配置培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作無(wú)菌平板； ③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； ④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于________________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了____________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________________(選填“正確”或“不正確”)。 考點(diǎn)2　生物的分離與計(jì)數(shù) 1．測(cè)定微生物數(shù)量的方法 (1)直接計(jì)數(shù)法：常用的是顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。 (2)間接計(jì)數(shù)法：常用的是稀釋平板計(jì)數(shù)法。 2．測(cè)定微生物數(shù)量方法的實(shí)際應(yīng)用 (1)土壤中好氧型細(xì)菌的計(jì)數(shù)： ①制備土壤稀釋液：取土壤表層3～5 cm處的土樣；制備系列稀釋液。 ②取樣及倒平板：該實(shí)驗(yàn)的接種方法是稀釋涂布平板法。 ③培養(yǎng)。 ④觀察記錄結(jié)果：計(jì)算每克土壤樣品菌數(shù)。 (2)檢測(cè)某種食品中的細(xì)菌總數(shù)和大腸桿菌菌落數(shù) 一般說(shuō)來(lái)，大腸桿菌菌落總數(shù)越多，說(shuō)明食品的衛(wèi)生質(zhì)量越差。 (3)土壤中分解尿素細(xì)菌的計(jì)數(shù) 某些細(xì)菌中含有尿素分解酶，能將培養(yǎng)基中的尿素分解成氨，該物質(zhì)的水溶液會(huì)使酚酞指示劑呈現(xiàn)紅色。 3．制備系列稀釋液的方法 將1 g土樣放入99 mL無(wú)菌水中，制成102倍的稀釋液，用1 mL無(wú)菌移液管吸取上述濃度的溶液0.5 mL，移入裝有4.5 mL無(wú)菌水的試管中，即配制成103倍的稀釋液，用同樣的方法可以配制成104、105、106倍的稀釋液，將待測(cè)樣品進(jìn)行稀釋的目的是使微生物細(xì)胞分散開(kāi)，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更接近真實(shí)值。 4．分離微生物實(shí)例 【分解纖維素的微生物的分離】 (1)纖維素酶 ①組成：纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。 ②作用 纖維素纖維二糖葡萄糖 (2)纖維素分解菌的篩選 ①原理 ②篩選方法：剛果紅染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。 ③培養(yǎng)基：以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。 ④實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣：富含纖維素的環(huán)境 ↓ 選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度 ↓ 梯度稀釋：制備系列稀釋液 ↓ 涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 ↓ 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 (3)分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較 分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)中先用選擇培養(yǎng)基，再用鑒別培養(yǎng)基。 ①選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng)，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng)。 ②鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，為固體培養(yǎng)基，細(xì)菌可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見(jiàn)的菌落。剛果紅染色法應(yīng)用的就是鑒別培養(yǎng)基。 (4)結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 內(nèi)容 現(xiàn)象 結(jié)論 有無(wú)雜 菌污染 的判斷 對(duì)照的培養(yǎng)皿中無(wú)菌落生長(zhǎng) 未被雜菌污染 培養(yǎng)物中菌落數(shù)偏高 被雜菌污染 菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高 培養(yǎng)物中混入其他氮源 選擇培養(yǎng)基 的篩選作用,牛肉膏培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目,選擇培養(yǎng)基具篩選作用 樣品的 稀釋操作,得到2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30～300的平板,操作成功 重復(fù)組 的結(jié)果,若選取同一種土樣，統(tǒng)計(jì)結(jié)果應(yīng)接近 1．從混合樣品中分離某種微生物的方法通常有兩種 (1)利用該分離對(duì)象對(duì)某一營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而使它成為一種加富培養(yǎng)基。 (2)利用該分離對(duì)象對(duì)某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物，經(jīng)培養(yǎng)后，原來(lái)占優(yōu)勢(shì)的微生物生長(zhǎng)受抑制，而分離對(duì)象卻可乘機(jī)大大增殖，在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)。 2．選擇培養(yǎng)基及其應(yīng)用 (1)選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)需要的微生物的生長(zhǎng)，目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。 (2)選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例 ①培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。 ②培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。 ③培養(yǎng)基中缺氮源時(shí)，可以分離固氮微生物，因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存。 ④當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分離效果。如石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的。 ⑤改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。 例2　圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加________作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成______色。 (2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。 該過(guò)程采取的接種方法是________________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)_______108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較________。 (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為_(kāi)_______，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含________個(gè)氨基酸。 2．某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生________________________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是________________________________________，但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇________(選填“尿素”、“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有______________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。 例3　某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸菌能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。回答下列問(wèn)題： (1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用________________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是________________________________________________________________________________。 (2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有________________________________和________________________________。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出________________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在－20℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的________(選填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。 3．(2017東臺(tái)模擬)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．用平板劃線法分離大腸桿菌時(shí)，需要多次灼燒接種環(huán) B．倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落，造成污染 C．新配置的培養(yǎng)基可以用高壓蒸汽滅菌或干熱滅菌的方法滅菌 D．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染 請(qǐng)根據(jù)下列關(guān)鍵詞的提示，歸納構(gòu)建本課時(shí)知識(shí)體系 微生物的分離　培養(yǎng)基配置　純化　消毒　滅菌　分裝　包扎　擱置斜面　平板劃線法、稀釋涂布平板法 隨堂演練 1．下列關(guān)于微生物的分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行消毒 B．分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度 C．測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計(jì)數(shù)法 D．分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源 2．(2015江蘇卷)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋 B．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 D．用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上 3．欲分離篩選出能分泌脂肪酶的細(xì)菌，應(yīng)選擇下列固體培養(yǎng)基(僅列出了碳氮源)中的(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．蛋白胨、檸檬酸鐵銨 B．橄欖油、硫酸銨 C．乳糖、酵母膏 D．葡萄糖、蛋白胨 4．下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)或純化的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．微生物在培養(yǎng)前要先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種 B．培養(yǎng)液中溶氧量的變化會(huì)影響酵母菌的繁殖和代謝途徑 C．分離自養(yǎng)型微生物的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基 D．分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和涂布平板法 5．(多選)不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營(yíng)養(yǎng)的描述中，不正確的是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素 B．碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì) C．無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) D．水不是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一 6．下列有關(guān)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是(　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　 A．分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解產(chǎn)生氮?dú)? B．用選擇培養(yǎng)基選擇出分解尿素的細(xì)菌，殺死其他微生物 C．統(tǒng)計(jì)尿素分解菌的數(shù)目時(shí)，以菌落數(shù)在300以上的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) D．用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)尿素分解菌，指示劑變紅 7．(2015江蘇高考)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來(lái)發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是________(填序號(hào))。 ①酒精燈?、谂囵B(yǎng)皿　③顯微鏡?、軣o(wú)菌水 (2)在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過(guò)多的原因是__________________________________________________________________________。 (3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是____________________________________________________。 (4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見(jiàn)下圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的________有關(guān)。 圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是________(填圖中序號(hào))。 (5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見(jiàn)下圖，推測(cè)菌株________更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是____________________________________________________________________________________________________________________。 第7題圖