高中生物 第二部分 酶的應(yīng)用 實驗6 α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測學(xué)案 浙科版選修1

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1、 第二部分 酶的應(yīng)用 實驗6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測 一、酶與固定化酶 1．酶：活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的一類有機(jī)物，它是生物體內(nèi)各種化學(xué)反應(yīng)的催化劑。 2．固定化酶：將________的酶用________或________方法________，使之成為________而又有________。 3．將酶改造成固定化酶的原因是： 由于酶________，且不利于________，所以要將酶改造成固定化酶。 4．酶固定化的方法有： ________法、________法、________法和________法等。本實驗用的是________法。 5．固定化酶作用

2、的機(jī)理： 將固定化酶________，當(dāng)________時，在________的作用下________。 答案：2.水溶性　物理　化學(xué)　固定在某種介質(zhì)上　不溶于水　酶活性的制劑 3．在水溶液中很不穩(wěn)定　工業(yè)化使用 4．吸附　共價偶聯(lián)　交聯(lián)　包埋　吸附 5．裝柱　底物經(jīng)過該柱　酶　轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物 二、淀粉水解的過程及其在淀粉指示劑下的顏色反應(yīng)： 答案：糊精　藍(lán)　紅　不顯 三、α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用檢測的實驗 1．實驗?zāi)康模? (1)制備________。 (2)進(jìn)行________的測試。 2．實驗原理： 將________酶固定在________上，一定

3、濃度的淀粉溶液經(jīng)過________后，可使淀粉水解成________。用________測試，若流出物呈________色，表明有________生成。 3．本實驗使用的酶及特性： 本實驗使用的酶是________酶，其作用的最適宜pH為________，最適宜溫度為________。 4．實驗設(shè)備及用品： 5 mL塑料注射器、50 mL燒杯、滴管、自行車用氣門芯及夾子、注射器架、試管或微量離心管3支。 5．實驗材料及其制備： (1)材料：固定化的α淀粉酶、可溶性淀粉酶、5 mol/L KI—I2溶液。 (2)部分材料的制備： ▲α淀粉酶的固定化： 在燒杯中將5 mg____

4、____溶于4 mL蒸餾水中 (由于________，可能有些不溶物) ↓ 再加入5g________，不時攪拌30 min ↓ 30 min后將上述溶液裝入1支注射器中 (該注射器的下端接有________并用________封住) 石英砂體積約4 mL ↓ 用________倍體積的蒸餾水________此注射器以 除去__________________，流速為1 mL/min ▲可溶性淀粉溶液：取________mg可溶性淀粉溶于100 mL________中，攪拌均勻。 ▲可溶性淀粉溶液：稱取0.127 g________和0.83 g________。加蒸餾

5、水100 mL，完全溶解后裝入滴瓶中。 6．實驗步驟： (1)淀粉溶液流經(jīng)固定化酶柱 將灌注了________的注射器放在注射器架上，用滴管加________溶液，使該溶液以________mL/min的流速過柱。 (2)接取流出物 待從固定化酶柱中流出________mL的溶液后，接收________mL流出液。 (3)流出物鑒定 在流出物中加入________溶液，觀察顏色。用水稀釋________倍后再觀察顏色。 (4)洗滌、保存固定化酶柱。 實驗后，用________倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱。放置在________℃冰箱中保存。 (5)幾天后取出冰箱中該固定化酶柱，

6、重復(fù)實驗，觀察結(jié)果。 7．實驗結(jié)果的比較： 答案：1.(1)固定化α淀粉酶　(2)淀粉水解 2．α淀粉　石英砂　固定化酶柱　糊精　淀粉指示劑 紅　糊精 3．枯草桿菌的α淀粉　5.5～7.5　50～75 ℃ 5．實驗材料及其制備： (2)α淀粉酶　酶不純　石英砂　氣門芯　夾子　10 洗滌　未吸附的游離淀粉酶　50　熱水　碘　碘化鉀 6．(1)固定化酶　淀粉　0.3　(2) 5　0.5　(3)KII2 1　(4)10　4 7．藍(lán)　紅　紅 6EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F375