2018-2019學(xué)年高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動物細(xì)胞工程 2.2.2 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3.doc

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2.2.2　動物細(xì)胞融合與單克隆抗體 [學(xué)習(xí)目標(biāo)]　1.掌握動物細(xì)胞融合的原理和方法。2.歸納單克隆抗體的制備過程及應(yīng)用。 方式一　1970年，有兩位科學(xué)家做了人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動性。思考該如何實(shí)現(xiàn)人—鼠細(xì)胞的融合，動物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株，動物細(xì)胞融合后能像電影上一樣形成雜種動物個體嗎？ 方式二　“太空婚禮” 2002年12月30日，兩場籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號飛船上舉行，植物細(xì)胞“新人”是黃花煙草和革新一號煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時在“產(chǎn)房”——電融合儀內(nèi)孕育新生命。 請思考： 新人一的婚禮流程是怎樣的？愛情結(jié)晶是什么？ 新人二的婚禮流程又是怎樣的？愛情結(jié)晶會是什么呢？ 要想知道答案，就讓我們一起來進(jìn)入今天的課題吧！ 一、動物細(xì)胞融合 1．概念：兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程，也稱細(xì)胞雜交。 2．原理：細(xì)胞膜的流動性。 3．誘導(dǎo)融合的方法 (1)物理、化學(xué)方法：與植物體細(xì)胞雜交相同，如聚乙二醇、電激等。 (2)生物方法：滅活的病毒。 4．過程：具有不同遺傳信息的兩個或多個細(xì)胞雜交細(xì)胞。 5．結(jié)果：形成單核雜交細(xì)胞，具有原來兩個或多個細(xì)胞的遺傳信息，可表現(xiàn)出兩個或多個親本的特點(diǎn)。 6．意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。如：利用動物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。 歸納總結(jié) 1．對動物細(xì)胞融合的理解 (1)動物細(xì)胞融合的過程包括細(xì)胞膜融合、細(xì)胞質(zhì)融合和細(xì)胞核融合。其中細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo)，細(xì)胞核融合是細(xì)胞融合的實(shí)質(zhì)。 (2)融合處理后的細(xì)胞不可以直接用于培養(yǎng)，還需要篩選。因?yàn)檎T導(dǎo)融合的手段只是促使細(xì)胞間的融合，不能保證所有的細(xì)胞都發(fā)生融合，形成的融合細(xì)胞也有多種，因此需要進(jìn)行篩選。 (3)細(xì)胞融合技術(shù)與有性雜交不同。有性雜交有著十分嚴(yán)格的時空關(guān)系和物種界限；動物細(xì)胞融合則不同，它通過人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏障，從而能夠按照人們的意愿，把不同物種的不同組織類型的細(xì)胞融合在一起。 2．動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的對比 比較項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合 原理 細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞融 合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合 誘導(dǎo)手段 離心、電激、振動、聚乙二醇等誘導(dǎo) 與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo) 結(jié)果 形成雜種植株 形成雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品 用途 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)展雜交親本范圍，培育新品種 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 意義 突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 例1　下列不屬于細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用的是(　　) A．細(xì)胞遺傳與細(xì)胞免疫的研究 B．生物新品種的培育 C．單克隆抗體的制備 D．瀕危動物的克隆 答案　D 解析　克隆瀕危動物是體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用，不屬于細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用。 例2　下列對植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較，描述正確的是(　　) A．動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法也完全相同 B．只有植物體細(xì)胞雜交可跨越種屬間的生殖隔離，突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 C．利用動物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為生產(chǎn)單克隆抗體開辟了新途徑 D．目前科學(xué)家終于實(shí)現(xiàn)了兩個植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn) 答案　C 解析　動物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方法有生物方法，如用滅活的病毒，而植物原生質(zhì)體融合沒有生物方法；兩個植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，但目前不能使它們的性狀全部能得以體現(xiàn)。 拓展提升　生物工程技術(shù)產(chǎn)生后代個體的遺傳物質(zhì)或基因來源 (1)轉(zhuǎn)基因生物：目的基因來自外源生物，絕大多數(shù)基因來自兩個親本。 (2)雜種植株：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細(xì)胞。 (3)經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)獲得的動物細(xì)胞：遺傳物質(zhì)只來自一個親本。 (4)動物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細(xì)胞。 (5)克隆動物：細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)來自供體動物，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自提供卵母細(xì)胞的動物個體。 二、單克隆抗體的制備 1．傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法：①向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體；②從動物血清中分離所需抗體。 (2)缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2．單克隆抗體的制備 (1)制備原理 ①B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：一種B淋巴細(xì)胞只產(chǎn)生一種單一抗體，B淋巴細(xì)胞在體外不能(填“能”或“不能”)無限增殖。 ②骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能無限增殖。 ③雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤細(xì)胞，既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)制備過程 制備特異性B淋巴細(xì)胞 　? 獲得雜交瘤細(xì)胞 　? 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測 　? 將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖 　? 提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取 (3)單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。 (4)單克隆抗體的應(yīng)用 ①作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 ②用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 歸納總結(jié) 1．血清抗體與單克隆抗體的比較 名稱 產(chǎn)生 特點(diǎn) 血清抗體 由B淋巴(漿)細(xì)胞分泌 一般從血清中分離，產(chǎn)量低、純度低、特異性差 單克隆抗體 由雜交瘤細(xì)胞分泌 特異性強(qiáng)、靈敏度高，能大量制備 2.制備單克隆抗體過程中的兩次篩選 項(xiàng)目 第一次篩選 第二次篩選 篩選原因 誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞 從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞有很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞也有很多種 篩選方法 用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長 用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群 篩選目的 得到雜交瘤細(xì)胞 得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 3.利用生物導(dǎo)彈治療癌癥 (1)組成：“生物導(dǎo)彈”＝抗癌細(xì)胞的單克隆抗體＋化學(xué)藥物(或放射性同位素或細(xì)胞毒素)。 (2)原理：單克隆抗體和癌細(xì)胞表面的特定抗原專一性結(jié)合，使藥物定向作用于癌細(xì)胞。 (3)優(yōu)點(diǎn)：用藥量小、療效高、毒副作用小。 例3　用a表示骨髓瘤細(xì)胞，b表示B淋巴細(xì)胞，則單克隆抗體制備過程中兩次篩選的目的分別為(　　) A．從a、aa、ab、bb、b中篩選出a、aa、ab；從a、aa、ab中篩選出ab B．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab、bb、b；從ab、bb、b中篩選出ab C．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab；從ab中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的ab D．從a、aa、ab、bb、b中篩選出aa；從aa中篩選出能大量增殖的aa 答案　C 解析　第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基選出雜交瘤細(xì)胞，即ab；第二次篩選是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測選出能產(chǎn)生特異性抗體的ab。 例4　將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”，能夠用于殺死人類某些癌細(xì)胞，其過程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同 B．經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖并產(chǎn)生特定抗體 C．②過程需要篩選并克隆單個雜交瘤細(xì)胞 D．抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性 答案　B 解析?、龠^程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，都是細(xì)胞膜的流動性，A正確；經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞不一定都能產(chǎn)生特定抗體，需要經(jīng)過抗體陽性檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯誤；②過程需要采用抗體陽性檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，然后進(jìn)行克隆化培養(yǎng)(包括體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，C正確；抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性，D正確。 1．動物細(xì)胞融合的原理是(　　) A．細(xì)胞膜的流動性 B．細(xì)胞膜的選擇透過性 C．細(xì)胞質(zhì)的流動性 D．細(xì)胞質(zhì)酶的活性 答案　A 解析　細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有流動性。 2．與植物原生質(zhì)體融合相比，動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是(　　) A．聚乙二醇 B．滅活的病毒 C．振動 D．電激 答案　B 解析　動物細(xì)胞融合可以用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物原生質(zhì)體融合不能用滅活的病毒誘導(dǎo)。 3．(2017湖北黃梅二中高二下期中)如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是(　　) A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T細(xì)胞 B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成 C．③同時具有脾臟細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性 D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群 答案　D 解析?、偈菑囊衙庖叩男∈笃⑴K中獲得的B淋巴細(xì)胞，A項(xiàng)錯誤；胰蛋白酶可使組織分散為單個細(xì)胞，B項(xiàng)錯誤；③為雜交細(xì)胞，若是B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞，才同時具有B淋巴細(xì)胞(可產(chǎn)生抗體)和骨髓瘤細(xì)胞(可無限增殖)的特性，C項(xiàng)錯誤；④是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D項(xiàng)正確。 4．利用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是殺傷性“彈頭”。下列對此描述不正確的是(　　) A．“瞄準(zhǔn)裝置”由識別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成 B．“彈頭”由放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成 C．“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細(xì)胞的功能 D．“生物導(dǎo)彈”是利用細(xì)胞工程技術(shù)制備出來的 答案　C 解析　“彈頭”中的藥物既能殺傷腫瘤細(xì)胞，也能殺傷正常細(xì)胞，不具有選擇性；“生物導(dǎo)彈”中的“瞄準(zhǔn)裝置”由專一識別特定腫瘤細(xì)胞的單克隆抗體構(gòu)成；“彈頭”由殺死腫瘤細(xì)胞的放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成；“生物導(dǎo)彈”是利用動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞培養(yǎng)等細(xì)胞工程技術(shù)制備出來的。 5．(2014新課標(biāo)Ⅰ，40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。 回答下列問題： (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠，理由是___________________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有__________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是___________________________________。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有________個細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是____________________。 答案　(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價最高　(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100% (3)1　100　(4)不能無限增殖 解析　(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價幾乎都達(dá)到16 000以上，小鼠Y的血清抗體的效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。 (2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的，并且不可能所有細(xì)胞都融合，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。 (3)動物細(xì)胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目最多為40＋60＝100(條)。 (4)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化，不能無限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。 [對點(diǎn)訓(xùn)練] 題組一　動物細(xì)胞融合技術(shù) 1．20世紀(jì)30年代，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細(xì)胞，這些多核細(xì)胞最可能的來源是(　　) A．細(xì)胞進(jìn)行無絲分裂造成的 B．細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時，染色體復(fù)制后沒有分開形成兩個子細(xì)胞 C．有絲分裂時，細(xì)胞核進(jìn)行了分裂，而細(xì)胞質(zhì)沒有進(jìn)行分裂 D．細(xì)胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了融合 答案　D 解析　選項(xiàng)C、D都可形成多核細(xì)胞，但結(jié)合題干信息，此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān)，故選項(xiàng)D最有可能。 2．下列關(guān)于動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的說法正確的是(　　) A．基本原理相同 B．誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法相同 C．細(xì)胞融合前的處理過程相同 D．融合后都需要進(jìn)行篩選 答案　D 解析　植物體細(xì)胞雜交的原理為細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性，而動物細(xì)胞融合利用的是細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞增殖；動物細(xì)胞融合常用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物體細(xì)胞雜交不能；動物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開，植物體細(xì)胞雜交常用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁；誘導(dǎo)融合后會形成多種融合細(xì)胞，還有未融合細(xì)胞，因此要進(jìn)行篩選。 3．動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是(　　) A．克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 B．制備單克隆抗體 C．培育新物種 D．生產(chǎn)雜交細(xì)胞 答案　B 解析　動物細(xì)胞融合技術(shù)能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，但這是它的意義，而不是它的用途；動物細(xì)胞的全能性受到限制，目前只見到高度分化的細(xì)胞核在去核卵細(xì)胞中表現(xiàn)出全能性，還未見到融合的細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性的例子，因此動物細(xì)胞融合不能用來培育新物種；生產(chǎn)雜交細(xì)胞不是細(xì)胞融合的主要目的，雜交細(xì)胞只是細(xì)胞融合完成后所形成的結(jié)構(gòu)名稱。 題組二　單克隆抗體的制備 4．運(yùn)用細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時，下列操作不必要的是(　　) A．對小動物注射抗原 B．融合并篩選雜交瘤細(xì)胞 C．培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞 D．將胰蛋白酶注入小鼠腹腔 答案　D 解析　胰蛋白酶在動物細(xì)胞培養(yǎng)時用到，是加到培養(yǎng)基中用于分離細(xì)胞的。 5．(2017河南西華一高高二下期中)下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，有關(guān)敘述不正確的是(　　) A．圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 B．利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙 C．用特定的選擇性培養(yǎng)基對乙篩選，融合細(xì)胞均能生長，未融合細(xì)胞均不能生長 D．丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁 答案　C 解析　選擇性培養(yǎng)基只能讓特定的符合條件的細(xì)胞存活下來，在題目給定的選擇性培養(yǎng)基上，只有雜交瘤細(xì)胞才能夠存活；圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原；利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合；丙為能無限增殖和分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞；為獲得大量專一性抗體，需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測、多次篩選。 6．(2017河北武邑中學(xué)高二下期中)科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，滅活的病毒的作用是(　　) A．病毒比較小，可鉆入到細(xì)胞內(nèi) B．滅活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以讓細(xì)胞聚集 C．滅活的病毒已失去感染性，對各種動物細(xì)胞不造成破壞，但所保留的融合活性可使不同的動物細(xì)胞進(jìn)行融合 D．滅活的病毒帶有目的基因，通過融合可以讓雜交細(xì)胞帶有目的基因 答案　C 解析　動物細(xì)胞融合常用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑是因?yàn)闇缁畹牟《静辉倬哂懈腥拘?，不會對?xì)胞造成破壞，但仍可促使不同的動物細(xì)胞融合。 7．在單克隆抗體制備過程中，對骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是(　　) ①B淋巴細(xì)胞?、诠撬枇黾?xì)胞　③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞?、芄撬枇黾?xì)胞自身融合細(xì)胞　⑤雜交瘤細(xì)胞 A．①②③④ B．①③⑤ C．②④ D．①③ 答案　A 解析　在題中所述特定的選擇培養(yǎng)基上，能夠存活、增殖的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞。 8．研究單克隆抗體治療癌癥的思路是(　　) A．利用單克隆抗體特異性地對抗癌細(xì)胞 B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞 C．抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成 D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合 答案　D 解析　單克隆抗體主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”，生物導(dǎo)彈就是單克隆抗體＋放射性同位素(或化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素)，這其實(shí)是借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細(xì)胞，靠藥物在原位殺死癌細(xì)胞。 [綜合強(qiáng)化] 9．用動物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯誤的是(　　) A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 B．用氯化鈣作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合 C．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 D．該雜交瘤細(xì)胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體 答案　B 解析　B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導(dǎo)；氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒進(jìn)入微生物細(xì)胞內(nèi)。 10．基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細(xì)胞混合，用滅活的病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞(　　) A．AAaa B．AaBb C．Aabb D．BBbb 答案　C 解析　基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細(xì)胞混合，用滅活的病毒處理后，會有以下情況出現(xiàn)：Aa和Aa融合形成的細(xì)胞是AAaa，Bb和Bb融合形成的細(xì)胞是BBbb，Aa和Bb融合形成的細(xì)胞是AaBb。 11．單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來越重要的作用?？茖W(xué)家米爾斯坦和科勒設(shè)計(jì)了一個用已免疫的B淋巴細(xì)胞制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)，如圖為其實(shí)驗(yàn)流程圖。則相關(guān)的敘述或說法中，不正確的是(　　) A．a(chǎn)是骨髓瘤細(xì)胞，②表示在選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng) B．制備單克隆抗體時，選擇B淋巴細(xì)胞的原因是它能分泌多種特異性抗體 C．③過程如在體外培養(yǎng)，則需要無菌、無毒，營養(yǎng)充足，溫度、pH適宜等環(huán)境條件 D．誘導(dǎo)動、植物細(xì)胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇 答案　B 解析　對于B淋巴細(xì)胞來說，每一種B淋巴細(xì)胞經(jīng)特定抗原刺激后只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷：a是骨髓瘤細(xì)胞、b是雜交瘤細(xì)胞；①是誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程；②表示在選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞的過程；③包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)；選擇性培養(yǎng)基只允許雜交瘤細(xì)胞生長、增殖，其他細(xì)胞不能生存；動物細(xì)胞培養(yǎng)需具備的條件是：無菌、無毒，營養(yǎng)充足，溫度適宜，pH適宜，充足的空氣等；誘導(dǎo)細(xì)胞融合時常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。 12．關(guān)于單克隆抗體的生產(chǎn)和應(yīng)用，錯誤的是(　　) A．對小動物注射特定抗原以獲取所需的B淋巴細(xì)胞 B．單克隆抗體比血清抗體的制備過程簡單，操作方便 C．特定的單克隆抗體可制成試劑，用于檢測人體是否受某種抗原的感染 D．治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”原理之一是利用單克隆抗體的特異性識別癌細(xì)胞 答案　B 解析　單克隆抗體的制備是用骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合后得到雜交瘤細(xì)胞；單克隆抗體的制備過程比普通抗體的制備過程復(fù)雜得多；單克隆抗體最廣泛的應(yīng)用是作為診斷試劑；如果把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體與放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”注入體內(nèi)，可借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將藥物帶到癌細(xì)胞所在位置，殺死癌細(xì)胞。 13．如圖為細(xì)胞融合過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題： (1)若A、B是植物細(xì)胞，則其融合形成的D細(xì)胞培養(yǎng)成植株，還要應(yīng)用________________技術(shù)。 (2)若A、B是動物細(xì)胞，則一般取自________________、幼齡動物的器官或組織，然后用胰蛋白酶使其分散開來。A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞工程的方法是用________________誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 (3)從A、B到C的過程中，可形成__________種類型的C細(xì)胞(僅考慮兩個細(xì)胞間的融合)。若該過程用于制備單克隆抗體，應(yīng)篩選出符合要求的D細(xì)胞，方法是用特定的________培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選出的D細(xì)胞稱為________________，常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種；前者是在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，后者是在________________內(nèi)增殖。 答案　(1)植物組織培養(yǎng)　(2)胚胎　滅活的(仙臺)病毒 (3)3　選擇性　雜交瘤細(xì)胞　液體　動物的腹腔 解析　若A、B是植物細(xì)胞，則D代表雜種植株，若A、B是動物細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時首先要用胰蛋白酶將器官、組織塊分散成單個細(xì)胞，選用的材料一般為胚胎、幼齡動物的器官或組織，因?yàn)檫@些部位的細(xì)胞代謝旺盛，細(xì)胞分裂能力強(qiáng)；能夠產(chǎn)生單克隆抗體的是雜交瘤細(xì)胞，需要用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，經(jīng)抗體專一檢測后大量克隆，以便進(jìn)行體內(nèi)或體外的生產(chǎn)。 14．如圖表示單克隆抗體的制備過程，請據(jù)圖回答下列問題： (1)據(jù)圖可知，________________技術(shù)是動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，而________技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 (2)圖中過程①常用的誘導(dǎo)因素是__________________，過程②常在________培養(yǎng)基中完成。 (3)A細(xì)胞為________細(xì)胞，其特點(diǎn)是______________________________。 (4)合成的單克隆抗體最終可以從________和________中提取。 答案　(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)　細(xì)胞融合　(2)滅活的病毒(或聚乙二醇)　選擇性　(3)雜交瘤　既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體　(4)培養(yǎng)液　小鼠腹水 解析　(1)動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(2)過程①中誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法很多，常用的主要有生物法(如用滅活的病毒)、化學(xué)法(如用聚乙二醇)、物理法(如電激等)。過程②是單克隆抗體技術(shù)的篩選過程，是在特定的選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行的。(3)A細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點(diǎn)。(4)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)一般有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種方式，體外培養(yǎng)是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；體內(nèi)培養(yǎng)是在小鼠腹腔中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從小鼠腹水中提取單克隆抗體。 15．科學(xué)家從某些能無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)許多動物細(xì)胞的分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答下面的問題： (1)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，一般選用的是_____________和____________融合。 (2)有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。 ①酶A是指________，酶B是指____________。 ②對已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的Ⅱ進(jìn)行“檢測”的原因是________________；Ⅲ指代的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是：________________________________。 ③有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖示及文字表示該過程。 答案　(1)骨髓瘤細(xì)胞　經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)　(2)①限制酶　DNA連接酶?、趯?dǎo)入成功率很低　既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體?、廴鐖D所示 解析　(1)制備單克隆抗體選用的融合細(xì)胞一般為骨髓瘤細(xì)胞(能無限增殖)與經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞(能產(chǎn)生特異性抗體)。(2)圖示Ⅰ過程為獲取目的基因，需用限制酶切取出目的基因片段；由于目的基因?qū)氤晒β什⒉桓?，故常需進(jìn)行導(dǎo)入檢測；由于Ⅲ指代的細(xì)胞具有“無限增殖”的調(diào)控基因，故可進(jìn)行無限增殖，從而產(chǎn)生大量的單克隆抗體。