2019年春高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動物細(xì)胞工程 2.2.2 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3.doc

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　動物細(xì)胞融合與單克隆抗體 1. 掌握動物細(xì)胞融合技術(shù)。　2.理解單克隆抗體技術(shù)。(重、難點(diǎn))　3．了解動物細(xì)胞融合和單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用。(重點(diǎn)) 一、動物細(xì)胞融合(閱讀教材P52) 概念 是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程，也稱細(xì)胞雜交 原理 細(xì)胞膜的流動性 結(jié)果 形成雜交細(xì)胞 誘導(dǎo)因素 ①聚乙二醇(PEG)、②滅活的病毒、③電激等 應(yīng)用 ①成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段；②制備單克隆抗體 意義 克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性 二、單克隆抗體(閱讀教材P52～P54) .傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法：①向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體；②從動物血清中分離所需抗體。 (2)缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2．單克隆抗體的制備過程 .單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用 (1)優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量高。 (2)應(yīng)用 ①作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 ②用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 判一判 (1)(2018曲阜高二檢測)細(xì)胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比，其優(yōu)越性在于能定向地改造生物的性狀。() (2)(2018南京師大附中高二期中)制備單克隆抗體時，要選用已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞。(√) (3)(2018南京師大附中高二期中)B淋巴細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，而漿細(xì)胞能產(chǎn)生抗體。(√) (4)動物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。() (5)動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是相同的。() 　動物細(xì)胞融合 結(jié)合下面動物細(xì)胞融合的過程，探究下列問題： (1)融合過程：細(xì)胞膜融合→細(xì)胞質(zhì)融合→細(xì)胞核融合。 (2)細(xì)胞膜融合的過程體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有一定的流動性。 (3)融合后重組細(xì)胞的特點(diǎn)：融合形成的雜種細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的遺傳信息，通過動物細(xì)胞培養(yǎng)，雜種細(xì)胞表現(xiàn)出兩個親本細(xì)胞的特點(diǎn)。 植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較 項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合 原理 細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動性 步驟 酶解法去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，形成雜種體細(xì)胞，再經(jīng)過植物組織培養(yǎng)形成雜種植株 分散成單個細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞融合 誘導(dǎo)方法 物理方法、化學(xué)方法 物理方法、化學(xué)方法、滅活病毒 結(jié)果 形成雜種植株 形成雜種細(xì)胞 1．下列關(guān)于動物細(xì)胞融合的說法，錯誤的是(　　) A．動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程 B．動物細(xì)胞融合需要用纖維素酶處理 C．動物細(xì)胞融合時需要人工誘導(dǎo) D．誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合常用的方法有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激等 答案：B 2．下列對植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較，描述正確的是 (　　) A．動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法也完全相同 B．只有植物體細(xì)胞雜交可跨越種屬間的生殖隔離，突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 C．利用動物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為生產(chǎn)單克隆抗體開辟了新途徑 D．目前科學(xué)家終于實(shí)現(xiàn)了兩個植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn) 解析：選C。動物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方法有生物方法，如用滅活的病毒，而植物原生質(zhì)體融合沒有生物方法；兩個植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，并不一定使它們的性狀都能得以體現(xiàn)，這是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。 生物工程技術(shù)產(chǎn)生后代個體的遺傳物質(zhì)或基因來源 (1)轉(zhuǎn)基因生物：目的基因來自外源生物，絕大多數(shù)基因來自兩個親本。 (2)雜種植株：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細(xì)胞。 (3)經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)獲得的動物細(xì)胞：遺傳物質(zhì)只來自一個親本。 (4)動物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細(xì)胞。 (5)克隆動物：細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)來自供體動物，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自提供卵母細(xì)胞的動物個體。 　單克隆抗體 結(jié)合下圖探究制備單克隆抗體的流程。 (1)第一步：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原蛋白，然后從小鼠體內(nèi)獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞；該細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體。 (2)第二步：用電激法、聚乙二醇法、滅活的病毒法等，誘導(dǎo)兩種細(xì)胞發(fā)生融合，這時得到的融合細(xì)胞除了雜交瘤細(xì)胞，還有B淋巴細(xì)胞相互融合的細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞相互融合的細(xì)胞。 (3)第三步：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。然后再從雜交瘤細(xì)胞群中選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。這時的雜交瘤細(xì)胞既能分泌抗體又能大量增殖。 (4)第四步：克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。 (5)第五步：將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取單克隆抗體。 (1)融合后的細(xì)胞，在培養(yǎng)時通過什么方式進(jìn)行繁殖？細(xì)胞中染色體數(shù)目與淋巴細(xì)胞相比有何不同？ 提示：有絲分裂。融合后細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。 (2)篩選過程中對細(xì)胞克隆培養(yǎng)時，在特定培養(yǎng)基上使每個孔一個細(xì)胞的目的是什么？ 提示：使每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的(或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度)。 1．植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體制備的比較 比較項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交(番茄—馬鈴薯植株) 單克隆抗體制備 第1步 原生質(zhì)體的制備(酶解法) 正常小鼠的處理(注射滅活抗原) 第2步 原生質(zhì)體的融合(物、化法) 動物細(xì)胞融合(物、化、生法) 第3步 雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞的篩選和培養(yǎng) 第4步 雜種植株鑒定 提純單克隆抗體(特異性強(qiáng)、靈敏度高) 融合前處理 酶解法除去細(xì)胞壁：纖維素酶、果膠酶 注射特定抗原，免疫處理正常小鼠 意義和用途 ①克服有性遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙； ②培育作物新品種 ①制備單克隆抗體； ②有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防 2.漿細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的比較 細(xì)胞類型 來源 特點(diǎn) 漿細(xì)胞 由B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后增殖分化而來 能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖 骨髓瘤細(xì)胞 從骨髓腫瘤中提取 能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體 雜交瘤細(xì)胞 漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成 既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖 3.兩次篩選的比較 第一次篩選：由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的，因此細(xì)胞混合物中融合細(xì)胞將以多種形式出現(xiàn)，因此必須從中篩選出既能分泌抗體，同時又能大量增殖的雜交瘤細(xì)胞。 第二次篩選：從雜交瘤細(xì)胞群中選出能產(chǎn)生專一抗體的特異性雜交瘤細(xì)胞。 交匯點(diǎn)　免疫調(diào)節(jié) (1)免疫類型：人體的免疫分為________和特異性免疫；特異性免疫又包括__________和__________。 (2)免疫過程 ①體液免疫：B淋巴細(xì)胞接受抗原刺激后增殖、分化，大部分分化為__________細(xì)胞，產(chǎn)生抗體，小部分分化為__________細(xì)胞。 ②細(xì)胞免疫：T細(xì)胞接受抗原刺激后，分化形成__________，然后與被抗原入侵的__________細(xì)胞密切接觸，使其裂解死亡。 答案：(1)非特異性免疫　體液免疫　細(xì)胞免疫 (2)①漿　記憶 ②效應(yīng)T細(xì)胞　宿主　 1．關(guān)于應(yīng)用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟如下，其中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述不正確的是(　　) ①將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞?、趶幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞?、劾么偌?xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合?、軐㈦s交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔中培養(yǎng)　⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞?、迯母顾刑崛】贵w A．實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是①②③⑤④⑥ B．④過程中產(chǎn)生多個雜交瘤細(xì)胞的過程也屬于克隆 C．③過程中獲得的細(xì)胞均可無限增殖 D．③到⑤過程中通常要經(jīng)過兩次篩選 解析：選C。誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合后，B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞不能無限增殖。 2．對于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述，不正確的是(　　) A．圖中有1處明顯錯誤 B．②中兩兩融合的細(xì)胞有3種，篩選保留了1種 C．③中雜交瘤細(xì)胞均能產(chǎn)生抗體 D．⑤可以無限增殖并分泌相應(yīng)抗體 解析：選C。圖中的錯誤是用于提取B淋巴細(xì)胞的小鼠沒有經(jīng)過免疫，A正確；②為第一次篩選，目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，B正確；③雜交瘤細(xì)胞是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的，但由脾臟中提取的B淋巴細(xì)胞包括非免疫的B淋巴細(xì)胞和已免疫的漿細(xì)胞，因此，③雜交瘤細(xì)胞不一定都能產(chǎn)生抗體，C錯誤；⑤是經(jīng)過兩次篩選得到的雜交瘤細(xì)胞群，具有無限增殖和分泌相應(yīng)抗體的特點(diǎn)，D正確。 核心知識小結(jié) [要點(diǎn)回眸] [答題必備] 動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。 動物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。 動物細(xì)胞融合的主要用途是制備單克隆抗體。 雜交瘤細(xì)胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的，具有既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的能力。 單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并能大量制備。 單克隆抗體的主要用途有：作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 [隨堂檢測] 1．動物細(xì)胞融合的目的中，最重要的是(　　) A．克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙 B．制備單克隆抗體 C．培育新物種 D．生產(chǎn)雜交細(xì)胞 解析：選B。植物體細(xì)胞雜交主要是為了克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙，以培育新品種。另外，植物體細(xì)胞雜交還應(yīng)用了植物細(xì)胞的全能性。動物細(xì)胞的全能性受到限制，目前只見到高度分化的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中表現(xiàn)全能性，還未見到融合細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性的例子，因此動物細(xì)胞融合不能用來培育新的物種。生產(chǎn)雜交細(xì)胞，也不是動物細(xì)胞融合的主要目的。 2．(2018太原外國語學(xué)校高二月考)將源自同品系小鼠的癌細(xì)胞和正常成纖維細(xì)胞融合，所獲雜種細(xì)胞的后代只要保留成纖維細(xì)胞的某些染色體就可表現(xiàn)為正常表型，但若這些染色體丟失則會重新惡變?yōu)榘┘?xì)胞。下列敘述不正確的是(　　) A．雜種細(xì)胞的后代保留的成纖維細(xì)胞的某些染色體上有抑制細(xì)胞惡性增殖的基因 B．利用滅活病毒可以誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合 C．雜種細(xì)胞重新惡變后將失去接觸抑制現(xiàn)象 D．染色體數(shù)目的變異會抑制細(xì)胞的癌變 答案：D 3．(2018上海寶山高二模擬)如圖是兩種生物細(xì)胞融合技術(shù)的示意圖，下列關(guān)于該圖的敘述中，正確的是(　　) A．a(chǎn)過程必須除去細(xì)胞壁；b過程需要通過細(xì)胞識別 B．如果圖中表示的是動物細(xì)胞融合或植物體細(xì)胞雜交，X均能形成雜種個體 C．若X是蘋果梨幼苗，則c過程是細(xì)胞分裂、分化的過程 D．細(xì)胞融合技術(shù)的缺點(diǎn)是不能克服遠(yuǎn)緣不親和性 答案：C 4．(2018常州高二檢測)核苷酸合成有兩個途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如下圖)。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?，F(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”來篩選特定的雜交瘤細(xì)胞。關(guān)于篩選原理的敘述，正確的是(　　) A．免疫的B細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖 B．骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞因無法進(jìn)行上述兩個途徑而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖 C．雜交瘤細(xì)胞因?yàn)榭梢赃M(jìn)行上述兩個途徑，所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖 D．HAT培養(yǎng)基上篩選出的所有雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標(biāo)抗體 解析：選B。免疫的B細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞均屬于成熟細(xì)胞，不能增殖，A錯；骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞缺乏轉(zhuǎn)化酶，又因HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，所以在HAT培養(yǎng)基上不能增殖，B正確；雜交瘤細(xì)胞因?yàn)榭梢赃M(jìn)行補(bǔ)救合成途徑，能夠在HAT培養(yǎng)基上大量增殖，C錯；HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細(xì)胞能大量增殖，也能產(chǎn)生抗體，但不一定產(chǎn)生目標(biāo)抗體，D錯。 5．用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是殺傷性“彈頭”，下列對此描述不正確的是(　　) A．“瞄準(zhǔn)裝置”是由識別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成的 B．“彈頭”是由放射性同位素、化學(xué)藥物和細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成的 C．“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細(xì)胞的功能 D．“生物導(dǎo)彈”是利用細(xì)胞工程制備出來的 解析：選C?！皬楊^”中的藥物不具有選擇性?！吧飳?dǎo)彈”中的“瞄準(zhǔn)裝置”是由專一識別特定腫瘤細(xì)胞的單克隆抗體構(gòu)成的；“彈頭”是由殺死腫瘤細(xì)胞的放射性同位素、化學(xué)藥物和細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成的；“生物導(dǎo)彈”是利用動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞培養(yǎng)等細(xì)胞工程技術(shù)制備出來的。 6．(2018江西臨川二中期末)如圖為動物細(xì)胞融合示意圖，請據(jù)圖回答： (1)圖中滅活的仙臺病毒的作用是____________________________________。 (2)若僅考慮兩兩融合，則A細(xì)胞和B細(xì)胞融合后共有___________________三種類型。 (3)由雜種細(xì)胞形成無性系1、2、3的方法，可以稱為________________________。 (4)此項(xiàng)技術(shù)最重要的應(yīng)用是____________________________________。 解析：(1)誘導(dǎo)細(xì)胞融合需要有促融劑，比如聚乙二醇、滅活的仙臺病毒等。(2)若僅考慮兩兩融合，則A細(xì)胞和B細(xì)胞融合后共有A—A、A—B、B—B三種類型。(3)無性繁殖可以稱之為克隆。(4)細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用是制備單克隆抗體。 答案：(1)促進(jìn)細(xì)胞融合(作為促融劑)　(2)A—A、A—B、B—B　(3)克隆　(4)制備單克隆抗體 7．(2018天津河?xùn)|區(qū)一模)下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖，沒有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對正常細(xì)胞也有一定毒性。(注：堿性磷酸酶廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎等組織器官中) (1)制備單克隆抗體需要篩選，第二次篩選時，雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行__________________，最終篩選出________________________。 (2)活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的__________________和________________過程。 (3)在此治療中，正確的方法是注射________________________。與傳統(tǒng)的化療相比，此治療方法的優(yōu)點(diǎn)是____________________________________。 答案：(1)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測　產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 (2)DNA的復(fù)制　轉(zhuǎn)錄　(3)阿霉素和單克隆抗體 (4)特異性強(qiáng)，能減輕阿霉素對正常細(xì)胞的傷害 [課時作業(yè)] 一、選擇題 1．(2018徐州高二檢測)基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細(xì)胞，用滅活的病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞(　　) A．AAaa　　　　　　　　 B．AaBb C．Aabb D．BBbb 解析：選C。誘導(dǎo)融合處理后可能會出現(xiàn)3種兩兩融合的細(xì)胞，即同種細(xì)胞相互融合，基因型為AAaa和BBbb；不同種細(xì)胞相互融合，融合后的雜交細(xì)胞基因型為AaBb，C項(xiàng)基因型細(xì)胞不可能出現(xiàn)。 2．與植物體細(xì)胞雜交相比，動物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是(　　) A．細(xì)胞膜的流動性、離心 B．細(xì)胞膜的流動性、滅活的病毒 C．細(xì)胞的全能性、電激 D．細(xì)胞的全能性、滅活的病毒 解析：選B。植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性，動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性；動物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)因子有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等，其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因子，而聚乙二醇、電激均可用于誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交。 3．(2018陜西黃陵中學(xué)高二月考)制備單克隆抗體時用單個的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，通過培養(yǎng)，形成細(xì)胞群。此過程中的細(xì)胞內(nèi)部變化一定不涉及(　　) A．RNA聚合酶與結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合 B．堿基互補(bǔ)配對 C．同源染色體配對 D．脫水縮合 答案：C 4．用a表示骨髓瘤細(xì)胞，b表示B淋巴細(xì)胞，則單克隆抗體制備過程中兩次篩選的目的分別為(　　) A．從a、aa、ab、bb、b中篩選出a、aa、ab；從a、aa、ab中篩選出ab B．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab、bb、b；從ab、bb、b中篩選出ab C．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab；從ab中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的ab D．從a、aa、ab、bb、b中篩選出aa；從aa中篩選出能大量增殖的aa 解析：選C。第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基選出雜交瘤細(xì)胞，即ab；第二次篩選是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測選出能產(chǎn)生特異性抗體的ab。 5．(2018棲霞二中高二檢測)下圖中的供體DNA中含有無限增殖調(diào)控基因，該基因能激發(fā)動物細(xì)胞的分裂，圖示是利用該基因制備新型單克隆抗體的過程，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．經(jīng)酶A處理后Ⅰ與質(zhì)粒具有相同的黏性末端 B．Ⅱ是已免疫的B淋巴細(xì)胞 C．Ⅲ既能無限增殖又能分泌特異性抗體 D．Ⅱ→Ⅲ過程中的檢測篩選的目的是得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞 答案：D 6．(2018棲霞二中高二檢測)下列在現(xiàn)代生物科技的應(yīng)用中，不需要進(jìn)行檢測與篩選的是(　　) A．對植物的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗 B．將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，制備單克隆抗體 C．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育“蘿卜—甘藍(lán)” D．將抗蟲基因?qū)胫参锛?xì)胞，培育具有抗蟲特性的新植株 答案：A 7.單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來越重要的作用。英國科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家科勒設(shè)計了一個用已免疫的B淋巴細(xì)胞制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)，如圖為其實(shí)驗(yàn)流程圖。下列相關(guān)的敘述不正確的是(　　) A．a(chǎn)是骨髓瘤細(xì)胞，②表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng) B．制備單克隆抗體時，選擇B淋巴細(xì)胞的原因是它能分泌多種特異性抗體 C．④過程如在體外培養(yǎng)，則需要無菌、無毒的環(huán)境，營養(yǎng)充足，溫度、pH適宜等環(huán)境條件 D．誘導(dǎo)動物、植物細(xì)胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇 解析：選B。對于B淋巴細(xì)胞來說，每一種B淋巴細(xì)胞經(jīng)特定抗原刺激后只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷：a是骨髓瘤細(xì)胞，b是雜交瘤細(xì)胞。①是誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程。②表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，篩選出雜交瘤細(xì)胞。③表示篩選出能專一性產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。④包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)兩種方法。選擇培養(yǎng)基只允許雜交瘤細(xì)胞生長、增殖，其他細(xì)胞不能生存。動物細(xì)胞培養(yǎng)需要具備的條件是：無菌、無毒的環(huán)境，營養(yǎng)充足，溫度、pH適宜，充足的空氣等。誘導(dǎo)細(xì)胞融合時常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。 8．對于下面制備單克隆抗體過程的示意圖，敘述不正確的是(　　) A．①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B．④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的 C．②促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo) D．⑤是可以無限增殖的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞 解析：選A。單克隆抗體是B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，B淋巴細(xì)胞也可以從血漿中提取。細(xì)胞融合時，使用的化學(xué)方法是用聚乙二醇誘導(dǎo)；④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的，如果有反應(yīng)說明表達(dá)了抗體；融合細(xì)胞具有雙親的特點(diǎn)，既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。 9．(2018蕪湖高二檢測)將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”，能夠用于殺死人類某些癌細(xì)胞。其過程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同 B．經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖并產(chǎn)生特定抗體 C．②過程需要篩選并克隆單個雜交瘤細(xì)胞 D．抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性 解析：選B。①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，都是細(xì)胞膜的流動性，A正確。經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞不一定都能產(chǎn)生特定抗體，需要經(jīng)過抗體陽性檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯誤。②過程需要采用抗體陽性檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，然后進(jìn)行克隆化培養(yǎng)(包括體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，C正確?？贵w的靶向作用使③過程具有高度特異性，D正確。 10．(2018上海松江區(qū)第二次模擬)如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，下列有關(guān)敘述不正確的是(　　) A．圖中給實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 B．利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙 C．用特定的選擇培養(yǎng)基對乙進(jìn)行篩選，融合細(xì)胞均能生長，未融合細(xì)胞均不能生長 D．對丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁 答案：C 二、非選擇題 11．(2018河南南陽六校高二期末)細(xì)胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用：有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進(jìn)行受精作用，植物體細(xì)胞雜交要進(jìn)行原生質(zhì)體的融合，單克隆抗體的制備需進(jìn)行動物細(xì)胞融合。下列為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答相關(guān)問題： (1)動物細(xì)胞融合的原理是__________，若進(jìn)行有性雜交，精子和卵子的結(jié)合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的______________功能。 (2)a、b分別表示兩種二倍體植物的體細(xì)胞，若a植物細(xì)胞內(nèi)含有m個染色體，b植物細(xì)胞內(nèi)含有n個染色體，則d細(xì)胞內(nèi)含有__________個染色體，d細(xì)胞融合完成的標(biāo)志：________________。若對a和b采用雜交育種成功的話，得到的后代應(yīng)含有___________個染色體，若要得到可育的后代，常采用____________________處理幼苗。這兩種方法相比，體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是______________________。 答案：(1)細(xì)胞膜的流動性　信息交流 (2)m＋n　雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁　(m＋n)/2　秋水仙素　克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 12．(2018菏澤一中宏志班檢測)下圖是通過動物纖維母細(xì)胞等獲得單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)研究。據(jù)圖回答相關(guān)問題： (1)過程①類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的________過程，過程②的實(shí)質(zhì)是__________。 (2)A代表________________物質(zhì)，Y、Z細(xì)胞的名稱分別是___________、__________。 (3)過程③誘導(dǎo)細(xì)胞融合的生物因素是____________，細(xì)胞融合后還需要用____________培養(yǎng)基篩選獲得Z細(xì)胞。 (4)Z細(xì)胞還需經(jīng)過____________和______________才能獲得大量產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞。 (5)經(jīng)過上述過程獲得的單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是____________________。 答案：(1)脫分化　基因的選擇性表達(dá) (2)抗原(特定抗原)　B淋巴細(xì)胞　雜交瘤細(xì)胞 (3)滅活的病毒　選擇 (4)克隆化培養(yǎng)　抗體檢測(專一性抗體陽性檢測) (5)特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備 13．(2018廣東汕頭檢測)新型的微生物蛋白農(nóng)藥是由微生物產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)藥物，能夠激活農(nóng)作物的防御系統(tǒng)，提高農(nóng)作物抗病抗蟲的能力?？蒲腥藛T在某個真菌菌株上發(fā)現(xiàn)了激活蛋白AP45，并進(jìn)行了相關(guān)研究(見下圖)。請回答下列問題： (1)圖中的①是__________________________；②是_________________________。 (2)所設(shè)計的引物對，應(yīng)與____________能互補(bǔ)配對，但在__________________之間不應(yīng)有能互補(bǔ)配對的核苷酸序列。 (3)據(jù)圖分析，該實(shí)驗(yàn)以____________基因作為標(biāo)記基因。 (4)如果要利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功表達(dá)，則需要以____________為抗原、制備出其單克隆抗體。 (5)以此類激活蛋白制成的微生物蛋白農(nóng)藥并不會直接殺死害蟲或者病原生物，是一種環(huán)境友好型的產(chǎn)品，具有____________________________等優(yōu)點(diǎn)(要求一項(xiàng))。 答案：(1)RNA(或mRNA)　構(gòu)建目的基因表達(dá)載體 (2)目的基因(或cDNA)　兩種引物(或引物自身的不同片段或引物與非目的基因，要求一項(xiàng)) (3)青霉素抗性 (4)激活蛋白AP45(或目的蛋白) (5)不引起害蟲或病原生物的抗藥性(或易分解無殘留或?qū)θ诵鬅o害或其他合理答案) 14．(2018廣西桂林、賀州期末聯(lián)考)雙功能抗體就是雙特異性抗體，是一種非天然性抗體，結(jié)合抗原的兩個臂具有不同的特異性，可以通過生物學(xué)方法制備。1983年Milstein等人將能分泌目的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞(稱之為A細(xì)胞)與分泌另一種抗體的脾細(xì)胞(即B細(xì)胞)融合，形成可分泌兩種親代抗體和雜種抗體的雜交瘤細(xì)胞(A—B細(xì)胞)，得到可預(yù)先設(shè)定的特異性的雙功能抗體。 (1)Milstein等利用A細(xì)胞和B細(xì)胞制備雙功能抗體的過程中，使用了哪些動物細(xì)胞工程的技術(shù)手段____________和____________(寫出兩種)。在這個過程中，若融合最多考慮兩兩融合，總共應(yīng)該有________種細(xì)胞存在，請參照題干表示方法用A、B字母表示這些細(xì)胞的具體類型____________________________________________。 (2)雙功能抗體在癌癥治療中的作用類似于“生物導(dǎo)彈”，借助于雙功能抗體一條臂與癌細(xì)胞表面抗原____________，同時另一條臂將T細(xì)胞和NK細(xì)胞等殺傷細(xì)胞定向帶到癌細(xì)胞所在位置。在生物體內(nèi)T細(xì)胞攻擊癌細(xì)胞屬于____________免疫。 (3)生物學(xué)方法制備雙功能抗體的缺點(diǎn)之一為，不能對雙功能抗體進(jìn)行改造，限制了它的臨床應(yīng)用。使用____________(工程技術(shù))，可以對雙功能抗體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計改造，使其更加符合人類的需要，這種改造最終還必須通過對____________分子的改造來完成。 答案：(1)動物細(xì)胞融合　動物細(xì)胞培養(yǎng)　5　A—A，A—B，B—B，A，B　(2)特異性結(jié)合　細(xì)胞　(3)蛋白質(zhì)工程　DNA