高中生物 第3章第2節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞工程課件 蘇教版選修3

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1、第第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程2第第 節(jié)節(jié)動(dòng)動(dòng)物物細(xì)細(xì)胞胞工工程程課前預(yù)習(xí)學(xué)案課前預(yù)習(xí)學(xué)案課堂互動(dòng)探究課堂互動(dòng)探究課標(biāo)領(lǐng)航課標(biāo)領(lǐng)航知能優(yōu)化訓(xùn)練知能優(yōu)化訓(xùn)練1.簡述動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)及條件、流程簡述動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)及條件、流程2簡述動(dòng)物細(xì)胞融合原理和方法簡述動(dòng)物細(xì)胞融合原理和方法3簡述單克隆抗體的制備過程及應(yīng)用簡述單克隆抗體的制備過程及應(yīng)用4簡述動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù)簡述動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù)5舉例說明動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用舉例說明動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用【重點(diǎn)重點(diǎn)】1.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)及條件、動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)及條件、流程流程2動(dòng)物細(xì)胞融合原理及方法動(dòng)物細(xì)胞融合原理及方法【難點(diǎn)難點(diǎn)】單克隆抗體的制備過程及單克隆抗體的制

2、備過程及應(yīng)用應(yīng)用情景導(dǎo)引情景導(dǎo)引早在早在1978年，美國科幻小年，美國科幻小說家羅維克就寫過一本名說家羅維克就寫過一本名叫叫克隆人克隆人的小說。該的小說。該小說當(dāng)時(shí)很多人包括生物學(xué)家在內(nèi)對小說當(dāng)時(shí)很多人包括生物學(xué)家在內(nèi)對此都表示懷疑。時(shí)至此都表示懷疑。時(shí)至1997年克隆羊年克隆羊“多多莉莉”問世，人們又將克隆人的話題提了問世，人們又將克隆人的話題提了出來，有些科學(xué)家甚至開始著手制訂出來，有些科學(xué)家甚至開始著手制訂克隆人的培育計(jì)劃。然而，有些人認(rèn)克隆人的培育計(jì)劃。然而，有些人認(rèn)為，克隆人嚴(yán)重地違反了人類的倫理為，克隆人嚴(yán)重地違反了人類的倫理道德，是克隆技術(shù)的濫用。有些國家道德，是克隆技術(shù)的濫用。

3、有些國家制定相關(guān)法律嚴(yán)禁進(jìn)行克隆人的研究制定相關(guān)法律嚴(yán)禁進(jìn)行克隆人的研究,而現(xiàn)任美國總統(tǒng)奧巴馬在剛剛上任的而現(xiàn)任美國總統(tǒng)奧巴馬在剛剛上任的第第48天，即天，即2009年年3月月9日，就正式為日，就正式為美國科學(xué)界簽署了為人體胚胎干細(xì)胞在美國科學(xué)界簽署了為人體胚胎干細(xì)胞在醫(yī)學(xué)方面的克隆研究解禁的命令。為什醫(yī)學(xué)方面的克隆研究解禁的命令。為什么人們對克隆技術(shù)既愛又恨？克隆技術(shù)么人們對克隆技術(shù)既愛又恨？克隆技術(shù)與倫理道德為什么會發(fā)生沖突？讓我們與倫理道德為什么會發(fā)生沖突？讓我們走進(jìn)克隆世界一探究竟吧！走進(jìn)克隆世界一探究竟吧！課前預(yù)習(xí)學(xué)案課前預(yù)習(xí)學(xué)案一、哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)一、哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)1動(dòng)物

4、細(xì)胞工程的內(nèi)容：動(dòng)物細(xì)胞工程的內(nèi)容：動(dòng)物細(xì)胞工程包括很多種常用技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞工程包括很多種常用技術(shù),如如_培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞_、_抗體和動(dòng)物抗體和動(dòng)物_克隆等?？寺〉取?dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合融合單克隆單克隆體細(xì)胞體細(xì)胞2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件(1)培養(yǎng)基：采用培養(yǎng)基：采用_培養(yǎng)基，其成培養(yǎng)基，其成分包括葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生分包括葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和素和_等。等。(2)氣體環(huán)境：氣體環(huán)境：足夠的氧氣：保證足夠的氧氣：保證_活動(dòng)的活動(dòng)的進(jìn)行。進(jìn)行。液體液體動(dòng)物血清動(dòng)物血清細(xì)胞代謝細(xì)胞代謝一定的二氧化碳：調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的一定的二氧化碳：調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的_。( 3 ) 溫

5、度 和溫 度 和 p H ： 適 宜 的 溫 度 為： 適 宜 的 溫 度 為_，pH為為_ 。3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程(1)細(xì)胞來源細(xì)胞來源: _或或_的組織或器官。的組織或器官。pH36.537.57.27.4動(dòng)物胚胎動(dòng)物胚胎幼齡動(dòng)物幼齡動(dòng)物原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)貼壁生長貼壁生長接觸抑制接觸抑制思考感悟思考感悟1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的細(xì)胞株動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的細(xì)胞株和細(xì)胞系有何區(qū)別？和細(xì)胞系有何區(qū)別？提示：提示：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞培動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)10代到代到4050代的細(xì)胞，遺傳物質(zhì)代的細(xì)胞，遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，稱為細(xì)胞株，超過沒有發(fā)生改

6、變，稱為細(xì)胞株，超過50代仍能無限制地傳代下去的細(xì)胞遺傳代仍能無限制地傳代下去的細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，成為細(xì)胞系。物質(zhì)發(fā)生改變，成為細(xì)胞系。融合因子融合因子兩個(gè)兩個(gè)雜交雜交DNA雜交雜交2單克隆抗體單克隆抗體(1)概念：由概念：由_細(xì)胞增殖形細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群所產(chǎn)生的成的細(xì)胞群所產(chǎn)生的_抗體分抗體分子稱為單克隆抗體。子稱為單克隆抗體。一個(gè)一個(gè)B淋巴淋巴單一型單一型(2)應(yīng)用：應(yīng)用：作為診斷試劑作為診斷試劑:準(zhǔn)確識別各種抗原物準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)質(zhì),并跟并跟_的結(jié)合具有的結(jié)合具有_、_、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)?？乖乖咝Ц咝?zhǔn)確準(zhǔn)確B淋巴淋巴多種融合細(xì)胞多種融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜

7、交瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 雜 交 瘤 細(xì) 胞 的 特 點(diǎn) ： 既 能 大 量雜 交 瘤 細(xì) 胞 的 特 點(diǎn) ： 既 能 大 量_,又能分泌大量又能分泌大量_。增殖增殖特異性抗體特異性抗體思考感悟思考感悟植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同？技術(shù)有什么不同？提示：提示：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植物胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植物體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁，然后再體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁，然后再融合；動(dòng)物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞直融合；動(dòng)物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞直接融合。接融合。三、動(dòng)

8、物體細(xì)胞克隆技術(shù)三、動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù)1克隆技術(shù)的研究歷程克隆技術(shù)的研究歷程時(shí)間時(shí)間人物人物貢獻(xiàn)貢獻(xiàn)1938年年德國斯培曼德國斯培曼提出克隆設(shè)想提出克隆設(shè)想1952年年美國布里格斯、美國布里格斯、托馬斯托馬斯金金實(shí)現(xiàn)實(shí)現(xiàn)了了_的的克隆克隆1984年年威拉德森威拉德森用用_克克隆隆出羊出羊1996年年威爾穆特威爾穆特用用_克克隆出隆出羊羊蝌蚪細(xì)胞蝌蚪細(xì)胞胚胎細(xì)胞胚胎細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞電脈沖電脈沖融合細(xì)胞融合細(xì)胞供卵個(gè)體供卵個(gè)體優(yōu)良品種優(yōu)良品種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物轉(zhuǎn)基因動(dòng)物瀕臨滅絕瀕臨滅絕人造器官人造器官課堂互動(dòng)探究課堂互動(dòng)探究動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程要點(diǎn)一要點(diǎn)一1過程分析過程分析2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過

9、程的幾個(gè)概念動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程的幾個(gè)概念(1)貼壁生長貼壁生長動(dòng)物細(xì)胞在液體培養(yǎng)基中懸浮生長一動(dòng)物細(xì)胞在液體培養(yǎng)基中懸浮生長一段時(shí)間后，大部分細(xì)胞會貼附在培養(yǎng)段時(shí)間后，大部分細(xì)胞會貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長。也有一些細(xì)胞瓶的表面生長。也有一些細(xì)胞(如淋巴如淋巴細(xì)胞細(xì)胞)能夠持續(xù)在懸浮狀態(tài)下生長，這能夠持續(xù)在懸浮狀態(tài)下生長，這些能長期懸浮生長的細(xì)胞容易進(jìn)行大些能長期懸浮生長的細(xì)胞容易進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，生產(chǎn)大量的動(dòng)物細(xì)胞規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，生產(chǎn)大量的動(dòng)物細(xì)胞及其產(chǎn)物。及其產(chǎn)物。(2)接觸抑制接觸抑制細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，數(shù)量不斷增多，細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，數(shù)量不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂

10、生長到表面相互接觸時(shí)，停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)時(shí)，停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。象。(3)原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)直接從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊，用胰直接從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊，用胰蛋白酶使其分散成單個(gè)細(xì)胞，然后用蛋白酶使其分散成單個(gè)細(xì)胞，然后用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)的過程。液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)的過程。(4)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)到一定程度，細(xì)胞會出現(xiàn)接觸原代培養(yǎng)到一定程度，細(xì)胞會出現(xiàn)接觸抑制，如果還需要繼續(xù)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，抑制，如果還需要繼續(xù)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，就要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從瓶壁上脫就要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來

11、，重新分散成細(xì)胞懸液，分裝到離下來，重新分散成細(xì)胞懸液，分裝到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)的過程。多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)的過程?！咎貏e提醒特別提醒】植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物植物組組織織培養(yǎng)培養(yǎng)動(dòng)物動(dòng)物細(xì)細(xì)胞胞培養(yǎng)培養(yǎng)區(qū)區(qū)別別原理原理細(xì)胞的全細(xì)胞的全能性能性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)基固體；營固體；營養(yǎng)物質(zhì)、養(yǎng)物質(zhì)、激素激素液體；營養(yǎng)液體；營養(yǎng)物質(zhì)、動(dòng)物物質(zhì)、動(dòng)物血清等血清等植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)區(qū)別別過過程程植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)區(qū)別別結(jié)果結(jié)果培育成植株培育成植株培育成細(xì)胞群培育成細(xì)胞群培育培育目的目的快

12、速繁殖，培快速繁殖，培育無病毒植株育無病毒植株等等獲得細(xì)胞的產(chǎn)獲得細(xì)胞的產(chǎn)物或細(xì)胞等物或細(xì)胞等相同點(diǎn)相同點(diǎn)都需要人工條件下的無菌操作都需要人工條件下的無菌操作 回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：題：(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面分裂生長到細(xì)胞表面_時(shí)，細(xì)胞會時(shí)，細(xì)胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的_。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是是_。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來下來,需要用酶處理需要用酶處理,可用的酶是可用的酶是_。(2

13、)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)進(jìn)而出現(xiàn)_的的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成而變成_細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性著性_，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖糖蛋白蛋白)的量的量_。(3)現(xiàn)用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行現(xiàn)用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是細(xì)胞不染色，原因是_。(4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染

14、色體 的 數(shù) 目 ， 最 好 選 用 細(xì) 胞 分 裂 到體 的 數(shù) 目 ， 最 好 選 用 細(xì) 胞 分 裂 到_期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。(5)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)榻M織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)做機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)做_進(jìn)行攻擊。進(jìn)行攻擊?！舅悸伏c(diǎn)撥思路點(diǎn)撥】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，解答本題，必須明確養(yǎng)的相關(guān)知識，解答本題，必須明確如下知識：如下知識：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程細(xì)胞分裂各期特征細(xì)胞分裂各期

15、特征【解析解析】(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中具動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中具有貼壁生長和接觸抑制的特點(diǎn)，若要有貼壁生長和接觸抑制的特點(diǎn)，若要傳代培養(yǎng)應(yīng)先用胰蛋白酶處理，使其傳代培養(yǎng)應(yīng)先用胰蛋白酶處理，使其從瓶壁上分離下來。從瓶壁上分離下來。(2)在傳代培養(yǎng)過程中，隨著傳代次數(shù)在傳代培養(yǎng)過程中，隨著傳代次數(shù)的增多，絕大多數(shù)細(xì)胞停止分裂，進(jìn)的增多，絕大多數(shù)細(xì)胞停止分裂，進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡，極少數(shù)細(xì)胞遺而出現(xiàn)衰老甚至死亡，極少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，克服細(xì)胞壽命的自傳物質(zhì)發(fā)生改變，克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，這種細(xì)胞黏著然極限，獲得不死性，這種細(xì)胞黏著性降低，細(xì)胞膜表面的糖蛋白減少。性降低，細(xì)胞膜表面的

16、糖蛋白減少。(3)活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，而死細(xì)胞的細(xì)胞膜則沒有這種特性，而死細(xì)胞的細(xì)胞膜則沒有這種特性，所以大分子染料可以對死細(xì)胞染色而所以大分子染料可以對死細(xì)胞染色而不能對活細(xì)胞染色。不能對活細(xì)胞染色。(4)若要觀察染色體的數(shù)目，最好選擇若要觀察染色體的數(shù)目，最好選擇細(xì)胞分裂中期的細(xì)胞，因?yàn)榉至阎衅诩?xì)胞分裂中期的細(xì)胞，因?yàn)榉至阎衅谌旧w螺旋程度最高，形態(tài)固定，數(shù)染色體螺旋程度最高，形態(tài)固定，數(shù)目清晰。目清晰。(5)皮膚移植后發(fā)生排斥反應(yīng)，是因?yàn)槠つw移植后發(fā)生排斥反應(yīng)，是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)做抗原進(jìn)行機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)做抗原進(jìn)行攻擊。攻擊。【答案

17、答案】(1)相互接觸相互接觸接觸抑制接觸抑制單層單層(或一層或一層)胰蛋白酶胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡衰老甚至死亡不死性不死性降低降低減減少少(3)活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色細(xì)胞不能著色(或死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失或死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而使其著色死細(xì)胞內(nèi)而使其著色)(4)中中(5)抗原抗原跟蹤訓(xùn)練跟蹤訓(xùn)練1有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的是是()A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胃蛋白酶使動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胃

18、蛋白酶使細(xì)胞分散細(xì)胞分散B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是獲得動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白大量的細(xì)胞分泌蛋白C細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中培養(yǎng)過程中D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散細(xì)胞分散解析：選解析：選D。本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過。本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程以及原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的知識。程以及原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的知識。通常將健康動(dòng)物組織用胰蛋白酶或膠通常將健康動(dòng)物組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理以后的細(xì)胞的初次培養(yǎng)原蛋白酶處理以后的細(xì)胞的初次培養(yǎng),稱為原代培養(yǎng)。貼滿瓶壁的細(xì)胞需要稱為原代培養(yǎng)。貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用

19、胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖，這種培養(yǎng)續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖，這種培養(yǎng)過程即為傳代培養(yǎng)。胃蛋白酶的最適過程即為傳代培養(yǎng)。胃蛋白酶的最適pH大約在大約在1.5左右，不適合做細(xì)胞培養(yǎng)左右，不適合做細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分散細(xì)胞的酶。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)利用時(shí)分散細(xì)胞的酶。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)利用了細(xì)胞有絲分裂的原理，獲得大量的了細(xì)胞有絲分裂的原理，獲得大量的具有相同遺傳特性的細(xì)胞。細(xì)胞傳代具有相同遺傳特性的細(xì)胞。細(xì)胞傳代培養(yǎng)至培養(yǎng)至50代以后，遺傳物質(zhì)可能發(fā)生代以后，遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變。改變。單克隆抗體的制備過程及其單克隆抗體的制備過程及其與與, ,植物體細(xì)胞雜交的比較植

20、物體細(xì)胞雜交的比較要點(diǎn)二要點(diǎn)二單克隆單克隆抗抗體體的制備的制備利用植物體細(xì)利用植物體細(xì)胞雜交獲得雜胞雜交獲得雜種植株種植株理論理論基礎(chǔ)基礎(chǔ)(原理原理)細(xì)胞膜的流動(dòng)細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖性、細(xì)胞增殖細(xì)胞膜的流動(dòng)細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全性、細(xì)胞的全能性能性融合融合前的前的處理處理注射特定抗原注射特定抗原蛋白免疫處理蛋白免疫處理正常小鼠正常小鼠酶解法去除細(xì)酶解法去除細(xì)胞壁胞壁(纖維素酶、纖維素酶、果膠酶果膠酶)單克隆單克隆抗抗體體的制備的制備利用植物體細(xì)胞雜利用植物體細(xì)胞雜交獲得雜種植株交獲得雜種植株促融促融方法方法(1)物化法：與物化法：與植物細(xì)胞融合植物細(xì)胞融合相同相同(2)生物法：滅生物法：

21、滅活的仙臺病毒活的仙臺病毒(1)物理法：離心、物理法：離心、振動(dòng)振動(dòng) 、電刺激等、電刺激等(2)化學(xué)法：聚乙化學(xué)法：聚乙二醇二醇(PEG)單克隆單克隆抗抗體體的制備的制備利用植物體細(xì)胞雜利用植物體細(xì)胞雜交獲得雜種植株交獲得雜種植株過過程程正常小鼠免疫正常小鼠免疫處理處理原生質(zhì)體的制備原生質(zhì)體的制備(酶酶解法解法)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合雜交瘤細(xì)胞篩雜交瘤細(xì)胞篩選與培養(yǎng)選與培養(yǎng)雜種細(xì)胞的篩選與雜種細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)培養(yǎng)單克隆抗體的單克隆抗體的提純提純雜種植株的誘導(dǎo)與雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定鑒定單克隆抗單克隆抗體的制備體的制備利用植物體細(xì)胞雜利用植物體細(xì)胞雜交獲得雜種植株交獲得雜

22、種植株意意義義和和用用途途(1)制備單克隆制備單克隆抗體抗體(2)診斷、治療、診斷、治療、預(yù)防疾病。例預(yù)防疾病。例如：單抗診斷如：單抗診斷盒、盒、“生物導(dǎo)生物導(dǎo)彈彈”治療癌癥治療癌癥(1)克服遠(yuǎn)緣雜交不克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，大大親和的障礙，大大擴(kuò)展了雜交的親本擴(kuò)展了雜交的親本組合范圍組合范圍(2)克服有性雜交的克服有性雜交的母系遺傳，獲得細(xì)母系遺傳，獲得細(xì)胞質(zhì)基因的雜合子胞質(zhì)基因的雜合子,研究細(xì)胞質(zhì)遺傳研究細(xì)胞質(zhì)遺傳【特別提醒特別提醒】單克隆抗體制備過程中單克隆抗體制備過程中的篩選及原因的篩選及原因(1)第一次篩選是在第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后細(xì)胞融合之后

23、,因?yàn)橛腥N融合情況：因?yàn)橛腥N融合情況：B淋巴細(xì)胞與淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，而只有髓瘤細(xì)胞融合，而只有B淋巴細(xì)胞與骨淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。胞。(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆

24、來的，所群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。特異性強(qiáng)的單克隆抗體。 如圖表示用生物工程制備人抗如圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請回答下列問題。抗體的過程。請回答下列問題。(1)人的紅細(xì)胞膜表面有被稱為凝集原人的紅細(xì)胞膜表面有被稱為凝集原的特異的特異_；從免疫學(xué)角度看，；從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是這種凝集原是_。(2)圖中細(xì)胞圖中細(xì)胞1是小鼠體內(nèi)注入人是小鼠體內(nèi)注入人A型血型血紅細(xì)胞后而獲得的紅細(xì)胞后而獲得的_細(xì)胞，這細(xì)胞，這種細(xì)胞具有產(chǎn)生種細(xì)胞具有產(chǎn)生_的特點(diǎn)，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)的特點(diǎn)，但難以在體

25、外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2，是從患骨髓瘤的小，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能在體外培養(yǎng)時(shí)能_，但不會產(chǎn)生抗體。但不會產(chǎn)生抗體。(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促細(xì)胞自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促細(xì)胞融合因子的作用下，使兩種細(xì)胞發(fā)融合因子的作用下，使兩種細(xì)胞發(fā)生融合，形成圖中的細(xì)胞生融合，形成圖中的細(xì)胞3，這種細(xì)，這種細(xì)胞稱為胞稱為_。把它在乙培養(yǎng)皿。把它在乙培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細(xì)胞群，這種方法稱為群，這種方法稱為_。(4)

26、過程過程的主要目的是的主要目的是_。通過過程通過過程或或的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量量_抗體?？贵w?！舅悸伏c(diǎn)撥思路點(diǎn)撥】本題考查了單克隆抗本題考查了單克隆抗體的制備過程及其相關(guān)知識，解答本體的制備過程及其相關(guān)知識，解答本題的關(guān)鍵是熟練掌握單克隆抗體的制題的關(guān)鍵是熟練掌握單克隆抗體的制備過程。備過程?！窘馕鼋馕觥?1)紅細(xì)胞表面的凝集原與紅細(xì)胞表面的凝集原與細(xì)胞識別有關(guān)細(xì)胞識別有關(guān),其化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白。其化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白。從免疫學(xué)角度看是抗原。從免疫學(xué)角度看是抗原。(2)小鼠受到抗原刺激后能產(chǎn)生小鼠受到抗原刺激后能產(chǎn)生B淋巴淋巴細(xì)胞，這種細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但細(xì)胞，這種細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗

27、體，但不能增殖，骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖但不能增殖，骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖但不能產(chǎn)生抗體。不能產(chǎn)生抗體。(3)通過動(dòng)物細(xì)胞融合的方式可以獲得通過動(dòng)物細(xì)胞融合的方式可以獲得雜交瘤細(xì)胞，產(chǎn)生單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞，產(chǎn)生單克隆抗體。 (4)過程過程的目的是篩選出能產(chǎn)生單一的目的是篩選出能產(chǎn)生單一抗抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過或或可可大量產(chǎn)生抗大量產(chǎn)生抗A單克隆抗體。單克隆抗體。【答案答案】(1)糖蛋白糖蛋白抗原抗原(2)B淋巴淋巴單一的抗單一的抗A抗體抗體(或單一的或單一的特異性抗體特異性抗體)快速大量增殖快速大量增殖(3)雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞單克隆單克隆(4)篩選出能產(chǎn)生單一抗篩選出

28、能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交抗體的雜交瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞抗抗A單克隆單克隆【探規(guī)尋律探規(guī)尋律】解答單克隆抗體的有解答單克隆抗體的有關(guān)題目時(shí)要特別注意以下幾點(diǎn)：關(guān)題目時(shí)要特別注意以下幾點(diǎn)：(1)所用所用B淋巴細(xì)胞是否是經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞是否是經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞；淋巴細(xì)胞；(2)細(xì)胞融合之后需要經(jīng)過兩次篩選，細(xì)胞融合之后需要經(jīng)過兩次篩選，方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞；胞；(3)利用單克隆抗體制成的利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)生物導(dǎo)彈彈”，其選擇性是由抗體決定的，其選擇性是由抗體決定的，與藥物無關(guān)。與藥物無關(guān)。跟蹤訓(xùn)練跟蹤訓(xùn)練2要想獲得大量的單克隆抗體就必須要想獲得大量

29、的單克隆抗體就必須用單個(gè)的用單個(gè)的B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成細(xì)胞群。其原因是細(xì)胞群。其原因是()A在體外培養(yǎng)條件下在體外培養(yǎng)條件下B淋巴細(xì)胞可以淋巴細(xì)胞可以無限增殖無限增殖B在動(dòng)物體內(nèi)在動(dòng)物體內(nèi)B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生多達(dá)淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的抗體百萬種以上的抗體C每一個(gè)每一個(gè)B淋巴細(xì)胞都參與特異性免淋巴細(xì)胞都參與特異性免疫反應(yīng)疫反應(yīng)D每一個(gè)每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體性抗體解析：選解析：選D。單克隆抗體即專一性強(qiáng)、。單克隆抗體即專一性強(qiáng)、純度高、數(shù)量大的抗體，而一種純度高、數(shù)量大的抗體，而一種B淋巴淋巴細(xì)胞只能合成分泌一種抗體，故用單個(gè)細(xì)胞只能合成分泌一種抗體，故用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成細(xì)胞群，淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成細(xì)胞群，即可獲得大量的單克隆抗體。即可獲得大量的單克隆抗體。知能優(yōu)化訓(xùn)練知能優(yōu)化訓(xùn)練本部分內(nèi)容講解結(jié)束本部分內(nèi)容講解結(jié)束點(diǎn)此進(jìn)入課件目錄點(diǎn)此進(jìn)入課件目錄按按ESC鍵退出全屏播放鍵退出全屏播放謝謝使用謝謝使用