專業(yè)實驗II 重點整理 之二

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1、 根據(jù)實驗指導(dǎo)對部分內(nèi)容進(jìn)行了刪減，有少許增加。 注意事項很重要，但這里的注意事項相比書上的原話是不全的，還是要看書~ 尿液部分 尿液的采集 指導(dǎo)病人后讓其自行留取，取清潔中段尿，適用于尿常規(guī)檢查、細(xì)菌檢查和細(xì)胞學(xué)檢查。 要求病人清洗手及外生殖器，一般留取中段尿到適當(dāng)?shù)奈词芪廴镜娜萜髦?。女性要防止陰道分泌物污染，嬰幼兒要避免糞便污染。 晨尿：指清晨起床后、未進(jìn)早餐和做運動之前第一次排出的尿液。 第二次晨尿：指采集晨尿后2~4小時內(nèi)的尿液。（要求從前一天晚上到采集此次尿液標(biāo)本時，只飲水200ml） 隨機(jī)尿：指患者無需任何準(zhǔn)備、不受時間限制、隨時排出的尿液標(biāo)本。

2、 餐后尿：指午餐后2~4小時內(nèi)的尿液。 3小時尿：上午6時~9時的尿液稱為3小時尿。 12小時尿：從晚上8時開始到次日早晨8時終止的12小時內(nèi)的全部尿液。 24小時尿：采集的當(dāng)天，患者排空膀胱并棄去尿液，從此時開始計時并采集尿液，將24小時內(nèi)的尿液全部采集于容器中；結(jié)束采集的次日（24小時后），患者排空膀胱，且將尿液采集于同一容器內(nèi)。如此采集的尿液稱為~。 【小知識點】 尿液檢查一般應(yīng)在收到標(biāo)本后迅速進(jìn)行。一般2h內(nèi)送檢，30min內(nèi)完成檢測。 如不能及時送檢或分析，必須采取保存措施。常用的方法有冷藏法和化學(xué)防腐法。 理學(xué)檢查 一、尿量：指24小時內(nèi)排出體外的尿液

3、總量。 【參考區(qū)間】 成人1~2L/24h，即1ml/（h*kg）；兒童按體重計算尿量，大約為成年人的3~4倍。 相關(guān)內(nèi)容 多尿(polyuria)：是指成人24小時的尿量超過2.5L，兒童24小時尿量超過3L。 少尿(oliguria)：24小時尿量少于0.4L或每小時尿量持續(xù)小于17ml（兒童小于0.8ml/kg）。 無尿(anuria)：12小時無尿或24小時尿量小于100ml。 二、尿液酸堿度 【參考區(qū)間】 正常飲食條件下：①晨尿pH5.5~6.5，平均6.0，②隨機(jī)尿pH4.5~8.0。尿液可滴定酸度：20~40mmol/24小時尿。 三、尿液氣味 【參考區(qū)間】

4、為微弱芳香氣味，源自尿液中酯類與揮發(fā)性酸。 若尿液標(biāo)本久置，則因為尿素分解可出現(xiàn)氨臭味。 四、尿的外觀：包括顏色及混濁度。 正常的尿液顏色由淡黃到深黃色，隨尿量的多少、飲食、藥物及病變而變化，其顏色主要源于尿色素及尿膽原。 混濁度可分為 清晰、輕渾、混濁、明顯混濁 4個等級。正常尿液混濁的原因主要為結(jié)晶所致。 【注意事項】 認(rèn)真觀察尿色、量、測pH。 【尿液外觀的相關(guān)內(nèi)容】 一、血尿(hematuria)：尿液內(nèi)含有一定量的紅細(xì)胞時稱為~ 1、肉眼血尿：1L尿液內(nèi)含有1ml以上血液，且尿液外觀呈紅色，稱為~。 2、鏡下血尿：如尿液外觀未見紅色，離心尿液鏡下紅細(xì)胞>3

5、個/HP，稱為~。 二、血紅蛋白尿：血管內(nèi)溶血時，血漿游離血紅蛋白增多，超過珠蛋白結(jié)合能力（約1.3g/L），可通過腎小球濾出而形成的暗紅、棕紅甚至醬油色的尿液，稱為~。 三、肌紅蛋白尿：當(dāng)肌肉組織廣泛損傷、變性時血漿肌紅蛋白含量增高，經(jīng)腎臟排出，產(chǎn)生的粉紅色或暗紅色尿液。 四、乳糜尿：由于泌尿系統(tǒng)淋巴管破裂或深部淋巴管阻塞致使乳糜液或淋巴液進(jìn)入尿液，尿液呈乳白色渾濁，稱為~。 五、膿尿（pyuria）：由于含有大量白細(xì)胞，外觀呈黃白色或白色的尿液。 1、鏡下膿尿：尿液白細(xì)胞>5個/HP。 2、肉眼膿尿：尿液中含大量白細(xì)胞而呈乳白色，甚至出現(xiàn)塊狀，稱為~ 膿細(xì)胞：在炎癥過程中被破

6、壞、變性或壞死的中性粒細(xì)胞。其外形多變不規(guī)則，胞質(zhì)內(nèi)常充滿顆粒，胞核模糊不清，常聚集成團(tuán)，邊界不清。 【相關(guān)名解】閃光細(xì)胞：低滲尿液中，中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)顆粒呈布朗運動，由于光的折射，在油鏡下可見灰藍(lán)色發(fā)光現(xiàn)象，運動似星狀閃光，故名。 尿比重：指尿液在4℃時與同體積純水的質(zhì)量之比，是尿液中所含溶質(zhì)濃度的指標(biāo)?？纱致苑从衬I臟的濃縮稀釋功能。 1、低滲尿/低比重尿：尿液比重常低于1.015； 2、等滲尿：尿液比重固定在1.010±0.003，與腎小球濾過液的比重接近 【參考區(qū)間】 成人：隨機(jī)尿1.003~1.030；晨尿>1.020。新生兒：1.002~1.004 尿滲量：

7、指尿液中具有滲透活性的全部溶質(zhì)微粒的總數(shù)量，與顆粒大小及所帶電荷無關(guān)，反映了溶質(zhì)和水的相對排出速度。在評價腎臟濃縮稀釋功能時較尿比重優(yōu)越。 【參考區(qū)間】 ①尿滲量：600~1000mmol/kg H2O（相當(dāng)于尿比重1.015~1.025）。最大范圍40~1400mmol/kg H2O。②尿滲量/血漿滲量為（3.0~4.7）：1.0。 一、蛋白質(zhì) 終尿中的蛋白質(zhì)含量很少，僅為30~130mg/24h。 蛋白尿(proteinuria)：當(dāng)尿液中的蛋白質(zhì)超過150mg/24h（或超過100mg/L）時，蛋白定性試驗呈陽性，稱為~。 【實驗原理】 ①磺基水楊酸法：在酸性條件下

8、，磺基水楊酸的磺酸根陰離子與蛋白質(zhì)氨基酸陽離子結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽沉淀。②加熱醋酸法：加熱煮沸使蛋白質(zhì)變性凝固，加乙酸使尿pH接近等電點（pH5左右）而加速蛋白質(zhì)沉淀。 【小知識點】 檢測蛋白尿的方法有：試帶法（定性或半定量），磺基水楊酸法（定性或半定量，靈敏度為0.05～0.1 g/L），加熱乙酸法（經(jīng)典方法，靈敏度為0.15g/L）。 【參考值】：① 定性：陰性。②定量：＜0.1g/L或≤0.15g/24h尿。 【相關(guān)名詞解釋】病理性蛋白尿 1、腎小球性蛋白尿：腎小球濾過膜因炎癥、免疫、代謝等因素?fù)p傷后，慮過膜孔徑增大、斷裂和（或）靜電屏障作用減弱，血漿蛋白特別是白蛋白濾出，超

9、出近端腎小管重吸收能力而形成的蛋白尿。(腎小球性蛋白尿中蛋白含量常大于2g/24h尿，通常以清蛋白為主，約占70%～80%，另外，β2微球蛋白也可輕度增多) 2、腎小管性蛋白尿：指腎小管受到感染、中毒損傷或繼發(fā)于腎小球疾病時，重吸收的能力降低或抑制而出現(xiàn)的以相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)為主的蛋白尿。(特點是以β2微球蛋白、溶菌酶等增多為主，清蛋白正?；蜉p度增高。單純性腎小管性蛋白尿，尿蛋白含量較低，一般低于1g/24h尿) 3、混合性蛋白尿：病變同時或相繼累及腎小球和腎小管而產(chǎn)生的蛋白尿，兼具以上兩種蛋白尿的特點。 (低相對分子質(zhì)量的β2微球蛋白及中相對分子質(zhì)量的清蛋白同時增多) 4、溢出

10、性蛋白尿：（腎小球/腎小管功能均正常）因血漿中相對分子質(zhì)量較小或陽性電荷蛋白異常增多，經(jīng)腎小球濾過，超過腎小管重吸收能力所形成的蛋白尿，即~。 5、組織性蛋白尿：指來源于腎小管代謝產(chǎn)生的、組織破壞分解的、炎癥或藥物刺激泌尿系統(tǒng)分泌的蛋白質(zhì)，進(jìn)入尿液而形成的蛋白尿。 還可按其發(fā)生的部位分為腎前性、腎性和腎后性蛋白尿。 二、葡萄糖 健康人的尿液中可有微量葡萄糖，一般<2.8mmol/24h，普通方法檢測為陰性。血糖濃度超過8.88mmol/L（1.6g/L）時，尿液中開始出現(xiàn)葡萄糖。 糖尿（glucosuria）：尿糖定性試驗呈陽性的尿液，取決于血糖濃度、腎血流量和腎糖閥。一般指葡

11、萄糖尿。 腎糖閾：尿中開始出現(xiàn)葡萄糖時最低血糖濃度，稱為~。 檢測尿糖的方法有：試帶法，班氏法，薄層層析法。 【實驗原理】 班氏法：葡萄糖在堿性溶液中加熱后，由環(huán)狀結(jié)構(gòu)變?yōu)閹┗逆湢罱Y(jié)構(gòu)而具有還原性，可將硫酸銅還原為黃或紅色的氧化亞銅（Cu2O）而沉淀。 【參考值】 ①定性：陰性。②定量：＜2.8mmol/24h（0.1～0.8mmol/L）。 【注意事項】 加熱煮沸時，切忌管口對人，應(yīng)不時振動試管，以防止溢出。 酮體：是乙酰乙酸（占20%）、β-羥基丁酸（占78%）和丙酮（占2%）的總稱，它們是機(jī)體脂肪氧化代謝產(chǎn)生的中間產(chǎn)物。 血漿酮體濃度一旦超過腎閾值，就會產(chǎn)生

12、酮尿。 尿中膽色素包括膽紅素、尿膽原及尿膽素，俗稱尿三膽。 膽紅素：紅細(xì)胞破壞后的代謝產(chǎn)物，可分為游離膽紅素和結(jié)合膽紅素。 1、游離膽紅素不溶于水，在血中與蛋白質(zhì)結(jié)合，不能通過腎小球濾出； 2、結(jié)合膽紅素相對分子質(zhì)量小，溶解度高，可通過腎小球濾出。正常人血中結(jié)合膽紅素含量很低，因此尿中不能檢出膽紅素。 尿膽原：是膽紅素在腸道中被細(xì)菌還原所產(chǎn)生，尿膽原經(jīng)空氣氧化及光線照射后轉(zhuǎn)變成黃色的尿膽素（糞膽素）。 【參考值】　 尿膽原：①定性：陰性或弱陽性（1∶20稀釋后陰性）。②定量：男性：0.30～3.55μmol/L；女性：0.00～2.64μmol/L；兒童：0.13～

13、2.30μmol/L。 尿膽素：陰性。 黃疸類型 尿膽紅素 尿膽原 正常 陰性 陰性~弱陽性 梗阻性黃疸 顯著增加 陰性 溶血性黃疸 陰性 顯著增加 肝細(xì)胞性黃疸 中度增加 輕度增加 健康人的尿液清蛋白一般小于20mg/L，大于30mg/L時即提示異常。 微量白蛋白尿：是指尿中清蛋白含量超過健康人水平，但常規(guī)尿蛋白試驗為陰性的低濃度清蛋白。 尿沉渣

14、：尿液排出體外并經(jīng)離心沉淀后，能在顯微鏡下看得到的有形成分。是尿液中有形沉淀成分的統(tǒng)稱。 離心尿液直接涂片法 【實驗原理】：用顯微鏡檢查方法，依據(jù)尿液細(xì)胞、管型等有形成分的形態(tài)特征，識別并記錄其在一定顯微鏡視野內(nèi)的數(shù)目。 取新鮮尿標(biāo)本10~15ml，以1000~1500rpm離心3~5分鐘，取出離心管，用吸管慢慢將上清液棄掉，切勿弄混沉渣，最終留取0.2ml，混勻后滴在載玻片上，用18mm×18mm蓋玻片鏡檢。 觀察時先用低倍鏡觀察有形成分全貌和管型，然后用高倍鏡鑒定細(xì)胞成分，細(xì)胞用高倍鏡觀察10個視野，管型用低倍鏡觀察20個視野，記錄結(jié)果。 【注意事項】： 1．尿在離心前和涂片前

15、必須混勻 2．棄去上清液應(yīng)一次性傾去勿來回顛倒。 3．報告方式規(guī)范。 【相關(guān)名解】 管型（Cast）：是蛋白質(zhì)、細(xì)胞及其崩解產(chǎn)物在腎小管、集合管內(nèi)凝固而形成的圓柱形蛋白凝聚體。 形成管型的必要條件是： ①原尿中有少量的白蛋白和由腎小管分泌的T-H蛋白，是構(gòu)成管型的基質(zhì)；②腎小管有使尿液濃縮和酸化能力；③要有可供交替使用的腎單位。 結(jié)晶：酸性尿液內(nèi)的結(jié)晶包括草酸鈣結(jié)晶、尿酸結(jié)晶、非晶形尿酸鹽，硫酸鈣結(jié)晶及馬尿酸結(jié)晶等。 尿液中是否出現(xiàn)結(jié)晶，取決于這些物質(zhì)在尿液中的溶解度、濃度、pH、溫度及膠體狀況等因素。當(dāng)促進(jìn)與抑制結(jié)晶析出的動態(tài)平衡被打破時，就可見結(jié)晶析出。結(jié)晶多來自飲

16、食，一般無重要臨床意義。 尿液干化學(xué)法檢測原理 尿液的化學(xué)成分使多聯(lián)試帶上的試劑模塊發(fā)生顏色變化，顏色深淺與尿液中化學(xué)成分的濃度成正比。當(dāng)試帶進(jìn)入尿液干化學(xué)分析儀比色槽時，各試劑模塊依次受到儀器光源照射并產(chǎn)生不同的反射光，儀器接受不同強(qiáng)度的光信號后，將其轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號，經(jīng)微電腦處理，計算出各檢測參數(shù)的反射率，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較校正，最后以定性或半定量方式自動輸出結(jié)果。 公式：R（%）=（Tm*Cs）/（Ts*Cm） 【相關(guān)】 常見檢測參數(shù)：pH，SG（比重），PRO（蛋白質(zhì)），GLU（葡萄糖），BIL（膽紅素），URO（尿膽原），KET（酮體），NIT（亞硝酸鹽），BLD（隱血

17、或紅細(xì)胞），LEU（白細(xì)胞），Vit C（維生素C） 多聯(lián)試帶的多層膜結(jié)構(gòu)：①尼龍膜；②絨制層；③吸水層；④塑料底層 糞便部分 標(biāo)本的采集與處理 1、容器 干凈，標(biāo)志明顯，大小適宜，盛便后不漏不溢，不吸收水份，最好是一次性的塑料盒。 2、標(biāo)本的要求 a、標(biāo)本務(wù)必新鮮，不可混入尿液。 b、采集標(biāo)本時應(yīng)用干凈竹簽挑取糞便含有粘液或膿血部分，外觀無異常的糞便應(yīng)從不同部位淺、深處糞便多處取材； c、一般檢查留取少量糞便即可(至少有5克大小)，稀便2ml，濃集卵時至少要取雞蛋大小糞便， 3、及時檢查 標(biāo)本采集后應(yīng)在1h內(nèi)檢查完畢，否則因pH及消化酶等影導(dǎo)致有

18、形成分破壞。 4、特殊檢查標(biāo)本應(yīng)按規(guī)定進(jìn)行 檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即送檢，寒冷季節(jié)時標(biāo)本送驗及檢查時應(yīng)需保溫。 糞便顏色： 健康成人糞便應(yīng)為黃褐色，嬰兒為金黃色。為糞膽素導(dǎo)致。各種生理性因素和病理性變化可以使其顏色發(fā)生變化。 1、黑色或柏油色：見于上消化道出血、服用鐵劑、食用豬血等。 產(chǎn)生機(jī)制：紅細(xì)胞被破壞，血紅蛋白在細(xì)菌作用下被分解，降解為血紅素、鐵、卟啉。鐵與腸道分解生成的硫化氫形成黑色的硫化鐵。 2、白陶土色：見于阻塞性黃疸、膽道梗阻，食用脂肪過量、鋇餐后。 糞便性狀： 健康成人為成形軟便，便秘者為球形硬塊。嬰兒為糊狀。 糞便的pH： 變化范

19、圍6.9-7.2。 細(xì)菌性痢疾、血吸蟲病時堿性，8 .0左右。阿米巴痢疾、病毒性腸炎為酸性，6.1-6 . 6左右。 糞便的量： 健康成人每日糞便為100-300g。 隨食物種類、進(jìn)食量和消化系統(tǒng)功能而變化。粗糧或纖維豐富的，糞便量；細(xì)糧或肉類較多，糞便較少。 糞便顯微鏡檢查：手工鹽水涂片鏡檢 操作方法：取一清潔玻片，滴加2滴生理鹽水，用竹簽挑取糞便中的異常部份，與鹽水均勻混合制成薄涂片，蓋上蓋片，其涂抹厚度以透過標(biāo)本看清字跡為宜。 先用低倍觀察蟲卵、原蟲和其它異物，再用高倍鏡仔細(xì)觀察各種異常成分。細(xì)胞計數(shù)時，至少應(yīng)檢查10個以上的高倍視野。 糞便隱血：是指消化道出

20、血量少（每日出血量＜5ml），糞便中無可見的血液，且紅細(xì)胞被消化破壞，顯微鏡下也見不到紅細(xì)胞，這種肉眼及顯微鏡均不能證明，需用化學(xué)法、免疫法才能證實的微量出血稱為~。隱血試驗（OBT）是指用化學(xué)或免疫學(xué)的方法證實微量血液的試驗。 【相關(guān)內(nèi)容】 檢測方法 1）化學(xué)法：這類方法種類很多，根據(jù)色原物質(zhì)不同分為：鄰聯(lián)甲苯胺法、鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、無色孔雀綠法、愈創(chuàng)木酯法、還原酚酞法等；根據(jù)反應(yīng)試劑狀態(tài)或試劑載體不同又分為濕化學(xué)和干化學(xué)試紙法。其實驗設(shè)計原理基本相同，此類方法簡便易行，成本低廉，目前實驗室常用。 【原理】：血紅蛋白中的含鐵血紅素有類似過氧化物酶的作用，將供氫體（色原）中的氫轉(zhuǎn)移

21、給H2O2生成水，供氫體脫氫（氧化）后形成發(fā)色基團(tuán)而呈色。呈色深淺可反映血紅蛋白（出血量）的多少。 靈敏度： a、鄰聯(lián)甲苯胺、鄰甲苯胺、還原酚酞法最靈敏，可檢出0.2～1.0mg/L的血紅蛋白，只要消化道有1～5ml出血就可檢出。 其中鄰聯(lián)甲苯胺法是在1983年中華醫(yī)學(xué)會全國臨床檢驗方法學(xué)學(xué)術(shù)討論會推薦的方法，但易出現(xiàn)假陽性。 b、中度靈敏的試驗有聯(lián)苯胺法、匹拉抗米酮法及無色孔雀綠法，可檢出1～5mg/L的血紅蛋白，消化道有5～10ml出血即為陽性。 為了減少假陽性和假陰性，臨床上宜采用中度靈敏方法。 2）免疫學(xué)法：免疫學(xué)法常用的方法有ELISA和膠體金等方法，此類方法所使用的抗體

22、為抗人血紅蛋白單克隆抗體。免疫法操作簡便、快速、靈敏度高（一般血紅蛋白為0.2mg/L即可獲陽性結(jié)果）、特異性強(qiáng)，飲食和藥物等均對結(jié)果無影響，目前被認(rèn)為是大腸癌普查最適用試驗。 【結(jié)果觀察】 （-）2′后仍不顯色 （+）10S后由淺藍(lán)漸變深藍(lán) （++）初顯淺蘭褐色漸變成明顯藍(lán)褐色 （+++）立即呈現(xiàn)藍(lán)褐色 （++++）立即呈現(xiàn)黑藍(lán)色 【注意事項】： 因3％過氧化氫不穩(wěn)定，長時間放置可使反應(yīng)減弱，所以試驗前應(yīng)檢查試劑是否有效（最好新鮮配制，并設(shè)置陰/陽性對照），可將過氧化氫滴于未染色的血片上，如產(chǎn)生泡沫表示過氧化氫有效。 【臨床意義】 1、對消化道出血有診斷價值：消化道

23、潰瘍、藥物致胃粘膜損傷、腸結(jié)核、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病、流行性出血熱及消化道惡性腫瘤所致消化道出血時，隱血試驗常呈陽性反應(yīng)。 2、為消化道潰瘍與腫瘤出血的鑒別提供依據(jù)：消化道腫瘤病人，由于腫瘤直接或間接侵犯、破壞消化器官中的血管，隱血試驗呈持續(xù)性陽性；胃腸道潰瘍病人僅在發(fā)病時有出血的表現(xiàn)，隱血試驗結(jié)果呈間斷性陽性。 3、可作為消化道惡性腫瘤普查的1個篩選指標(biāo)：隱血試驗對消化道腫瘤的診斷陽性率可達(dá)95%，其中早期胃癌診斷符合率為20%，晚期符合率達(dá)95%，對50歲以上的無癥狀者，每年做1次糞便隱血試驗，對早期消化道惡性腫瘤有重要價值。早期大腸癌病灶僅限于粘膜層或粘膜下層時，往往無癥狀

24、，糞便中帶有微量的出血是早期診斷大腸癌唯一可查出的異常指標(biāo)。 精液部分 精液主要由精子和精漿（精囊液、前列腺液、尿道球腺、旁腺液）組成。 標(biāo)本的采集 1.采集標(biāo)本前要禁欲（包括無遺精或手淫）3－7天（30歲以下2－3天，30－40禁欲3－5天，40以上禁欲5－7天） 2.要將精液全部排入潔凈的干燥容器中。 收集全部精液，并立即送檢，天冷時要注意保溫， 理學(xué)檢查 1、精液的量 精液量為2.0～6.0ml，平均為3.5ml，少于1.5ml或大于8.0ml可視為異常。 無精液癥：精液量減少至1～2滴，甚至排不出，稱為無精液癥。 2、精液的外觀（顏色和透明

25、度） 灰白色或乳白色，久未射精者可呈淡黃色，微渾濁，液化后半透明樣。 3、精液的氣味 正常精液具有栗花和石楠花的特殊氣味，由前列腺液產(chǎn)生。 4、精液的粘稠度 剛排出的精液迅速凝成膠凍狀，然后逐漸液化。正常精囊分泌的凝固蛋白使得精液凝固。 5、pH 正常精液呈現(xiàn)弱堿性，為7.2-8.0。測定應(yīng)在標(biāo)本留取后1小時內(nèi)完成。 精液的液化時間：精液由膠胨狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榱鲃訝顟B(tài)所需的時間稱為精液液化時間。精液液化主要是由于前列腺分泌的精液蛋白分解酶所致。 剛射出的精液具有高度的粘稠性，液化時間<30min.。 【注意事項】 觀察液化時間時注意保溫(接近正常體溫)。 【相關(guān)名解】

26、精液延遲液化癥：新鮮精液標(biāo)本在室溫下超過60min不液化，稱為~，常見于前列腺炎。 精子計數(shù) 【方法】 1、血細(xì)胞計數(shù)板檢測； 2、Makler精子計數(shù)板檢測：專門用于精子檢驗，池深為10um，不影響精子的正常運動，但是只使用于相差顯微鏡和暗視野顯微鏡； 3、Macro計數(shù)板檢測：可以用于普通顯微鏡檢測。 【血細(xì)胞計數(shù)板檢測原理】采用碳酸氫鈉破壞精液的粘稠度，甲醛固定精子，然后充計數(shù)池，顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的精子數(shù)，換算成每升精液中的精子數(shù)。 【計算】 精子計數(shù)＝5個中方格內(nèi)精子數(shù)×10^9 ／L 精子總數(shù)＝精子數(shù)／L×精液量(ml)×10^ -3 【注意事項】

27、1．精子數(shù)量變異較大，較準(zhǔn)確的計數(shù)應(yīng)在2～3個月內(nèi)分別取3份或更多的精液標(biāo)本檢查。出現(xiàn)1次異常結(jié)果，應(yīng)間隔7d后再復(fù)查，反復(fù)查2～3次后方能得出較準(zhǔn)確結(jié)果。 2．如常規(guī)檢查未發(fā)現(xiàn)精子，應(yīng)離心后取沉淀物檢查，若仍無精子才能確定為無精子癥。 3．關(guān)于禁欲時間的長短國內(nèi)外說法不一，國內(nèi)一般強(qiáng)調(diào)禁欲7d，但國外資料報道不需禁欲。 【參考值】 ①精子濃度：（50～100）×10^9/L；WHO：＞20×10^9/L。②精子總數(shù)：≥40×10^6/次 一般認(rèn)為＜20×10^9/L為不正常，連續(xù)3次檢查皆低下者可確定為少精癥，多次未查到精子為無精癥。 但臨床上亦可見到精子濃度＜20×10^9/L

28、仍能生育，因此估計一個男性的生育能力應(yīng)將精子濃度與精液其他參數(shù)結(jié)果綜合考慮分析。 正常精子形態(tài): 正常精子外形似蝌蚪狀，由頭、體（頸、中段）、尾（主、末段）構(gòu)成。頭部正面觀呈卵圓形，側(cè)面觀呈扁平梨形，長約4.0～5.0μm，頭部輪廓規(guī)則，頂體覆蓋頭部表面的1/3以上。體部輪廓直而規(guī)則，長約5～7μm。尾部細(xì)長，彎而不卷曲呈鞭毛狀，長約50～60μm。 【檢查方法】 涂片染色：HE染色、Giemsa染色，相差顯微鏡檢查 【參考值】 正常精液中異常精子數(shù)＜20%。 精子形態(tài)檢查是反映男性生育能力的1項重要指標(biāo)。如正常形態(tài)精子<30%，稱為畸形精子癥（WHO）， 畸形精子>40%

29、，即會影響精液質(zhì)量，>50%?？芍虏挥?。精子形態(tài)異常與睪丸、附睪的功能異常密切相關(guān) 未成熟生殖細(xì)胞：是指各階段發(fā)育不完全的生精細(xì)胞，包括精原、初級精母、次級精母和發(fā)育不完全的精子細(xì)胞。正常精液未成熟生殖細(xì)胞＜1%， 根據(jù)生精細(xì)胞的類型可進(jìn)一步衡量睪丸生精功能，分析睪丸病因，為無精癥、少精癥的病因分析提供科學(xué)依據(jù)。同時，動態(tài)觀察精液生精細(xì)胞的變化，可作為男性不育癥療效觀察和判斷預(yù)后的指標(biāo)之一。 陰道分泌物 陰道分泌物：是女性生殖道分泌的液體，主要由宮頸腺體、前庭大腺、子宮內(nèi)膜及陰道粘膜的分泌物混合而成，俗稱“白帶”。 陰道分泌物一般由婦產(chǎn)科醫(yī)務(wù)人員采集，根據(jù)不同檢查

30、目的可從不同部位取材，一般采用消毒棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管處取材，用生理鹽水涂片。 取材前24h內(nèi)，禁止性交、盆浴、陰道灌洗和局部用藥等，不可使用潤滑劑。 一般性狀 正常陰道分泌物為白色、絮狀、帶有粘性的液體，無氣味，量多少不等，性狀與雌激素水平及生殖器充血情況有關(guān)。 1、臨近排卵期量多，清澈透明、稀薄似蛋清； 2、排卵2～3d后量減少，混濁粘稠； 3、行經(jīng)前量又增加；妊娠期，白帶量較多。 清潔度檢查 檢查方法有濕片法及涂片染色法。濕片法簡便、快速，臨床常用，但對細(xì)菌觀察結(jié)果較差。涂片染色檢查，對細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)菌觀察清楚，結(jié)果準(zhǔn)確客觀，但較復(fù)雜、費時、少

31、用。 先用低倍鏡觀察，再用高倍鏡檢查，根據(jù)上皮細(xì)胞、白細(xì)胞（或膿細(xì)胞）、桿菌、球菌的多少分度。 【參考值】 I～I(xiàn)I度。 【注意事項】 1、取材正確，及時送檢，否則會導(dǎo)致陰道毛滴蟲死亡，淋病奈瑟菌自溶。 2、標(biāo)本新鮮，防止污染。檢測毛滴蟲需要保溫。 3、看展片時不可動粗調(diào)更不要移動視野,看不清只可動微調(diào)。 陰道毛滴蟲：是寄生在女性陰道以及尿道和男性尿道和前列腺等部的鞭毛蟲 檢查方法有濕片法、涂片染色法、膠乳凝集試驗及體外培養(yǎng)法等。 漿膜腔積液 人體的胸腔、腹腔、心包腔等統(tǒng)稱為漿膜腔。在正常情況下僅有少量液體，主要起潤滑作用。正常人漿膜內(nèi)少量液體

32、來自壁層漿膜毛細(xì)血管內(nèi)的血漿濾出，并通過臟層漿膜的淋巴管和小靜脈的回吸收。 【正常值】胸腔液<20ml，腹腔液<50ml，心包腔液約為10-30ml，關(guān)節(jié)腔液0.1-0.2ml。 漿膜腔積液：當(dāng)漿膜有炎癥、循環(huán)障礙，惡性腫瘤等病變時，漿膜腔液生成增多并積聚在漿膜腔內(nèi),其性質(zhì)也發(fā)生變化，此時稱為~。 漏出液：一般為非炎癥性積液，在正常情況下，組織液不斷被重吸收，液體在毛細(xì)血管內(nèi)外移動的方向取決于四個因素： 1、毛細(xì)血管血壓；2、組織液膠體滲透壓；3、血漿膠滲壓；4、組織液靜水壓; 有效濾過壓=（ 毛細(xì)血管血壓+組織液膠體滲透壓）-（血漿膠滲壓+組織液靜水壓） 則漏出液的形成原因

33、： 1、毛細(xì)血管血壓升高；2、血管內(nèi)膠體滲透壓下降；3、淋巴回流受阻；4、水、鈉儲留： 滲出液：多為炎癥性積液，炎癥時由于病原微生物的毒素，缺氧以及炎癥介質(zhì)作用使血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，血管通透性增加，致使液體、血管內(nèi)大分子物質(zhì)（如白蛋白、球蛋白、纖維蛋白等）和各種細(xì)胞成分等從血管內(nèi)滲出到血管外和組織間隙及漿膜腔，形成積液。 1、感染性：如化膿性細(xì)菌、分枝桿菌、病毒或支原體等。 2、惡性腫瘤：產(chǎn)生血管活性物質(zhì)，使?jié){膜毛細(xì)血管通透性增加 3、其他：如外傷、化學(xué)性刺激（血液、尿液、膽汁和胃液）、風(fēng)濕性疾病等也可引起積液。 標(biāo)本的采集 一般由臨床醫(yī)生行漿膜腔穿刺術(shù)獲得；采集標(biāo)本分

34、4管留取， 第1管細(xì)菌學(xué)；第2管化學(xué)和免疫學(xué)；第3管細(xì)胞學(xué)，第4管觀察凝固現(xiàn)象。 常規(guī)及細(xì)胞學(xué)檢查宜用EDTA-K2抗凝，化學(xué)檢查肝素抗凝。 注意：送檢和檢測必須及時；如不能檢查應(yīng)該加無水乙醇放置于冰箱保存。 漿膜腔積液的量 正常胸腔、腹腔和心包腔內(nèi)均有少量的液體，但在病理情況下，液體增多，其增多的程度與病變部位和病情嚴(yán)重程度有關(guān)?？梢詮膸缀辽獢?shù)千毫升不等。 顏 色 正常胸腔液、腹腔液和心包腔液為清亮、淡黃色的液體，病理情況下可出現(xiàn)不同的顏色變化。一般滲出液顏色深，漏出液顏色淺。 透明度（清澈、微渾、渾濁） 正常胸腔液、腹腔液和心包腔液為清晰透明的液體。積液的透明度常

35、與其所含的細(xì)胞、細(xì)菌、蛋白質(zhì)等程度有關(guān)。 滲出液呈不同程度的混濁，乳糜液因含有大量脂肪也呈混濁；漏出液一般清晰透明。 凝固性 漏出液一般不凝固，滲出液往往可以自行凝固或有凝塊出現(xiàn)。 原因：纖維蛋白原作用，滲出液中含有纖溶酶時可降解纖維蛋白。 比重 取決于蛋白質(zhì)含量，漏出液小于1.015，滲出液大于1.018。 pH 隔絕空氣，及時送檢 漏出液：7.455-7.465 滲出液：6.87-7.39 【臨床意義】 1、胸腔積液：pH<7.4，炎性積液；pH<7.3，伴有葡萄糖減低，提示有并發(fā)癥；pH小于6.0，多由于胃液進(jìn)入胸腔，見于食管破裂，嚴(yán)重膿胸。 2、腹腔積液

36、：伴有感染時，細(xì)菌代謝產(chǎn)生的酸性物質(zhì)增多，使pH減低。pH小于7.3對自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎診斷的靈敏度和特異性均為90%。 3、心包腔積液：明顯減低可見于風(fēng)濕性、結(jié)核性、化膿性、惡性腫瘤性、尿毒癥性心包炎等，其中以惡性腫瘤性、結(jié)核性積液減低較明顯。 蛋白質(zhì)檢查 1、定性-李瓦他(Rivalta)試驗 【原理】漿膜上皮細(xì)胞在炎癥反應(yīng)的刺激下分泌粘蛋白量增加。粘蛋白是一種酸性糖蛋白，等電點為PH3～5，因此在稀乙酸中出現(xiàn)白色沉淀。在稀醋酸中滴加胸腹水，看有無蛋白沉淀出現(xiàn)。 【結(jié)果觀察】 陰性：清晰，不呈現(xiàn)霧狀 / 陽性：出現(xiàn)白色霧狀，下沉到管底不消失 30g/L以下陰性，40g

37、/L以上陽性，二者之間約80%陽性。 2、定量-雙縮脲法測定蛋白 總蛋白、球蛋白、纖維蛋白等， 滲出液大于30g/L， 漏出液小于25g/L。 近年來認(rèn)為，積液/血清蛋白質(zhì)的比值則更為準(zhǔn)確。一般，比值大于0.5為滲出液，小于0.5為漏出液。胸水一般用此鑒別。而腹水則一般用血清-腹水清蛋白梯度（SAAG）來鑒別。 SAAG=血清白蛋白濃度-腹水白蛋白濃度（g/L） ①、SAAG≥11g/L，多為門靜脈高壓，為漏出液。 ②、SAAG<11g/L則沒有門靜脈高壓，多為滲出液。精確度97%。 漿膜腔積液細(xì)胞計數(shù) 計數(shù)時把全部有核細(xì)胞（包括間皮細(xì)胞）都列入細(xì)胞計數(shù)中。 惡性腫瘤引

38、起的積液中血性者占50%-85%。當(dāng)積液中紅細(xì)胞大于0.1×10^12/L時應(yīng)考慮惡性腫瘤、肺栓塞、穿刺損失、創(chuàng)傷等所致。 1、細(xì)胞總數(shù)檢查：清亮或微混的標(biāo)本，可直接計數(shù)。如果標(biāo)本中細(xì)胞數(shù)量過多，用生理鹽水或紅細(xì)胞稀釋液稀釋標(biāo)本后計數(shù)。 2、白細(xì)胞計數(shù)：可采用直接計數(shù)法。如果白細(xì)胞過多，可用白細(xì)胞稀釋液稀釋后計數(shù)白細(xì)胞。 3、白細(xì)胞分類計數(shù)：白細(xì)胞直接計數(shù)后，在高倍鏡下根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞核的形態(tài)特征進(jìn)行分類計數(shù)。也可采用Wright染色后，油鏡下分類計數(shù)。 【參考值】 1、漏出液中的白細(xì)胞數(shù)不超過100×10^6/L， 主要為間皮細(xì)胞及淋巴細(xì)胞。 2、滲出液的白細(xì)胞數(shù)多超過500×10^6/L。 漏出液與滲出液的鑒別 PART1 PART2