實(shí)驗(yàn)-影響酶促反應(yīng)速度的因素

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實(shí)驗(yàn) 影響酶促反應(yīng)速度的因素 1、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 通過本實(shí)驗(yàn)了解溫度、PH、激活劑、抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。 2、 實(shí)驗(yàn)原理 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各種糊精和麥芽糖。淀粉溶液與碘反應(yīng)呈藍(lán)色；糊精根據(jù)分子大小，與碘反應(yīng)分別呈藍(lán)、紫、紅、無色等不同的顏色；麥芽糖不與碘呈色。唾液淀粉酶的活性受溫度、酸堿度、抑制劑與激活劑等的影響。 溫度：溫度降低，酶促反應(yīng)減弱或停止；溫度升高，反應(yīng)速度加快。當(dāng)上升至某一溫度時(shí)，酶促反應(yīng)速度達(dá)最大值，此溫度稱為酶的最適溫度。由于酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，溫度過高會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)構(gòu)象的改變，因此如果溫度繼續(xù)升高，反應(yīng)速度反而會(huì)迅速下降甚至完全喪失。 酸堿度：唾液淀粉酶最適pH為pH6.9，高于或低于酶的最適pH值，都將引起酶活性的降低，過酸或過堿的反應(yīng)條件可使酶活性喪失。 抑制劑與激活劑：酶的活性常受某些物質(zhì)的影響，能增加酶的活性稱為酶的激活劑：降低酶活性且不使酶蛋白變性的稱為酶的抑制劑。如Cl-為唾液淀粉酶的激活劑，Cu2+為唾液淀粉酶的抑制劑。 根據(jù)上述性質(zhì)，可以用碘檢查淀粉是否水解及其水解程度，間接判斷唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。 三、試劑及器材 1.試劑： 1％淀粉溶液，1％氯化鈉溶液，1％硫酸銅溶液，1％硫酸鈉溶液，碘液，磷酸氫二鈉（0.2mmol/L）, 檸檬酸溶液(0.1mmol/L)。 2.器材： 試管，試管夾，恒溫水浴鍋(37℃),吸管，滴管，試管架。 四、實(shí)驗(yàn)操作： 1.收集唾液：實(shí)驗(yàn)者先將痰咳盡, 用自來水漱口, 清除口腔內(nèi)食物殘?jiān)? 再含蒸餾水約15 mL, 作咀嚼咕漱運(yùn)動(dòng), 3min后吐入小燒杯中備用。 2.觀察溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 取試管3支，編號(hào)1,2,3，按下表操作： 試劑(ml) 1 2 3 唾液 1 1 1 1%淀粉 2 2 2 水浴5min 100℃（冷卻） 37℃ 0℃ 碘液 1滴（冷卻） 1滴 1滴 現(xiàn)象 3. 觀察pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 （1）配制一系列pH不等的緩沖液。 試劑(ml) 1 2 3 0.2mmol/L磷酸氫二鈉 5.15 7.72 9.72 0.1mmol/L檸檬酸 4.85 2.28 0.28 pH 5.00 6.80 8.00 （2）取試管3支，編號(hào)1,2,3，按下表操作： 試劑(ml) 1 2 3 唾液 2 2 2 緩沖液 3（pH5.00） 3（pH6.80） 3（pH8.00） 1%淀粉 2 2 2 37℃水浴10min 碘液 1滴 1滴 1滴 現(xiàn)象 4觀察激活劑和抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 取試管4支，編號(hào)1,2,3,4，按下表操作： 試劑 滴 1 2 3 4 1%淀粉 20 20 20 20 唾液 10 10 10 10 蒸餾水 6 — — — 1％氯化鈉 — 6 — — 1％硫酸銅 — — 6 — 1％硫酸鈉 — — — 6 37℃水浴5—10min 碘液 1滴 1滴 1滴 1滴 現(xiàn)象 5、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 6、 思考題 影響酶促反應(yīng)速度的因素有哪些？它們?nèi)绾斡绊懨傅幕钚裕?