植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較ppt課件
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植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,,全能性,,增殖,,固體,,液體,,蔗糖,,動(dòng)物血清,,細(xì)胞株、細(xì)胞系,,細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白,1,溫故而知新——植物體細(xì)胞雜交(馬鈴薯番茄),融合的原生質(zhì)體AB,,再生出細(xì)胞壁,植物細(xì)胞的融合,雜種細(xì)胞AB,人 工 誘 導(dǎo),動(dòng)物細(xì)胞可以融合嗎? 如果可以,兩者相同嗎?,2,2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合 與單克隆抗體,帶著問(wèn)題走進(jìn)課堂?,2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程,3,自主閱讀,p52第2自然段,思考下列問(wèn)題:,什么叫動(dòng)物細(xì)胞融合 ? (概念要點(diǎn)),① 兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞 ② 一個(gè)細(xì)胞(雜交單核細(xì)胞),動(dòng)物細(xì)胞融合,4,動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程示意圖,不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞,,,,,滅活的病毒,,,,,,,,,,有絲分裂,,兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞,,,,5,一、動(dòng)物細(xì)胞融合(細(xì)胞雜交),1、概念:,指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。,2、結(jié)果:,形成單核的雜交細(xì)胞,3、原理:,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,,,4、誘導(dǎo)方式,,物理法:離心、振動(dòng)、電激,化學(xué)法:聚乙二醇(PEG),生物法:滅活的病毒,6,思考討論:為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活?不滅活行嗎?,因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂 質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開(kāi),細(xì)胞發(fā)生融合,不滅 活的話會(huì)感染細(xì)胞,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。,7,5、過(guò)程:,動(dòng)物細(xì)胞A 動(dòng)物細(xì)胞B,,誘導(dǎo),融合,2個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB,有絲分裂,,(膜融合、質(zhì)融合),,(核融合),,注意:動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起,讓它們隨機(jī)融合后,再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞,8,6、意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交(種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間)成為可能。,7、應(yīng)用:成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體,9,思考題,1.植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁?,酶解法,如纖維素酶或果膠酶,2.動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎?為什么?,無(wú)需,因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁,3.植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些?,離心、電激等物理方法;PEG等化學(xué)方法,4.動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類(lèi)方法嗎?還有其他方法嗎?,能 還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo),5.植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形 成完整的雜種個(gè)體,動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎?,不能,,,,10,植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,獲得雜種植株,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,細(xì)胞膜的流動(dòng)性 細(xì)胞的全能性,去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合,物理(離心、振蕩、電刺激) 化學(xué)(聚乙二醇),物理、化學(xué)方法(同左) 滅活的病毒,主要用于制備,單克隆抗體,11,2.動(dòng)物細(xì)胞融合的概念,動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱(chēng)為雜交細(xì)胞。,,,,12,1、抗體 1.1 概念: 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白 。 1.2 來(lái)源: B淋巴細(xì)胞。,二、單克隆抗體,13,B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系:,1.B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)生抗體。 2.動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體,每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。 3.每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。,自主閱讀P52:傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及 缺陷是什么?怎樣解決這個(gè)問(wèn)題?,14,2.1 、單克隆 由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖(多次有絲分裂)形成的一個(gè)細(xì)胞群,叫一個(gè)克隆,即單克隆。,2、單克隆抗體的概念,2.2 、單克隆抗體 由一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖形成的一個(gè)細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng)的抗體,即單克隆抗體。,要想獲得大量的單一抗體,必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞,形成細(xì)胞群。,15,3、原理:雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)親本的特性,即能迅速大量增殖,又能足夠數(shù)量的單一抗體。,4、過(guò)程,B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)融合,B-B細(xì)胞,,B-瘤細(xì)胞,瘤-瘤細(xì)胞,,選擇培養(yǎng),雜交瘤細(xì)胞( B-瘤細(xì)胞),,克隆化培養(yǎng),抗體檢測(cè),雜交瘤細(xì)胞,,體外培養(yǎng),單克隆抗體,16,6.單克隆抗體的應(yīng)用:,特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大,①作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì),并與特異性結(jié)合 優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速,②用于,運(yùn)載藥物:制成“生物導(dǎo)彈”,治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療,,5、單克隆抗體的特點(diǎn):,17,思考問(wèn)題:,1、本過(guò)程利用了哪些原理?,免疫原理,細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理,這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞,繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì),不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力,而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng),因而可以獲得大量單克隆抗體,2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合?,?,18,知識(shí)結(jié)構(gòu),兩個(gè)過(guò)程,,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,單克隆抗體制備過(guò)程,三個(gè)“一”,,一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 --滅活的病毒,一個(gè)新細(xì)胞--雜交瘤細(xì)胞,一個(gè)優(yōu)勢(shì)--單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì),,,,19,1、動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是 ( ) A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞 2、 動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中所用的誘導(dǎo)劑——滅活的病毒,抗原性和感染力的有無(wú)是 ( ) A.失去抗原性,具有感染力 B.具有抗原性,也具有感染力 C.失去抗原性,也失去感染力 D.具有抗原性,失去感染力,B,課堂練習(xí),D,20,3、“生物導(dǎo)彈”是指 ( ) A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)胞 C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物,D,,4、科學(xué)家們用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 ( ) A.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 B.未經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 D.未經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞,C,21,5. 單克隆抗體制備過(guò)程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞 誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞, 在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 ( ) ①淋巴細(xì)胞 ②小鼠骨髓瘤細(xì)胞 ③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 ④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 ⑤雜交瘤細(xì)胞 A.②④ B.①③⑤ C.①②③④ D.②③,C,,,,6.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)融合決定于 ( ) A.細(xì)胞膜的流動(dòng)性 B.細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性 C.細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)性 D.細(xì)胞質(zhì)酶的活性,A,22,- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來(lái)的問(wèn)題本站不予受理。
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