（浙江選考）2020版高考生物一輪復(fù)習(xí) 第30講 微生物的利用教師備用題庫(kù)（含解析）.docx

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微生物的利用 1.(2016江蘇單科,25,3分)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程,相關(guān)敘述正確的是(多選)(　　) 　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　 A.生活污水中含有大量微生物,是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 B.篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C.在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落,再通過(guò)劃線進(jìn)一步純化 D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物,可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株 答案　BC　產(chǎn)漆酶的微生物主要生活在木質(zhì)素含量較高的環(huán)境中,生活污水中含有大量的微生物,不是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品;篩選產(chǎn)漆酶微生物的培養(yǎng)基中應(yīng)加入木質(zhì)素等漆酶降解的底物,因不同菌種的菌落特征不同,故可通過(guò)菌落特征挑選產(chǎn)漆酶的菌落;圖示顯示,通過(guò)涂布平板法進(jìn)行初步篩選,再通過(guò)平板劃線法進(jìn)一步純化;微生物長(zhǎng)期保存應(yīng)用甘油管藏法,保存溫度為-20 ℃。 2.如圖為通過(guò)DNA分子雜交鑒定含有某特定DNA的細(xì)菌克隆示意圖。下列敘述正確的是(　　) A.根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準(zhǔn)確計(jì)算樣品中含有的活菌實(shí)際數(shù)目 B.外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行復(fù)制 C.重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)镈NA分子脫氧核糖和磷酸交替連接 D.放射自顯影結(jié)果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細(xì)菌菌落位置 答案　D　本題主要考查微生物的計(jì)數(shù)和DNA分子雜交等相關(guān)知識(shí)。根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)只能估算樣品中含有的活菌數(shù)目;外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能夠進(jìn)行轉(zhuǎn)錄;重組質(zhì)粒與探針因堿基互補(bǔ)配對(duì)能進(jìn)行分子雜交;用放射性標(biāo)記的DNA探針與特定DNA分子雜交后,洗去未結(jié)合的探針,放射自顯影結(jié)果可以顯示原培養(yǎng)皿中含特定DNA的細(xì)菌菌落位置。 3.普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中,經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過(guò)程如圖甲所示)。 圖甲 圖乙 (1)圖甲中,過(guò)程①需要的酶有　　　　　　　　　。為達(dá)到篩選目的,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以　　　　作為唯一碳源。②、③過(guò)程需重復(fù)幾次,目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作,其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是　　　　　　　　　;推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是　　　　　　　。 (3)以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,接種　　　　菌的發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是　　　　　　　　　　　　　 　 　　　　　。 (4)用凝膠色譜法分離α-淀粉酶時(shí),在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì),相對(duì)分子質(zhì)量較　　　　。 答案　(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶　淀粉　進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌　(2)涂布分離法　涂布不均勻　(3)工程酵母　工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng),導(dǎo)致乙醇發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快　(4)小 解析　本題考查生物技術(shù)實(shí)踐與基因工程在生產(chǎn)生活中的應(yīng)用。(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需限制酶和DNA連接酶。為篩選可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉作為唯一碳源。②、③過(guò)程需重復(fù)幾次,目的是進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌。(2)分析圖乙平板中經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布狀況可知,菌落分布不均勻,此現(xiàn)象可能是該同學(xué)涂布不均勻所致。(3)工程酵母菌與普通酵母菌相比,直接利用淀粉的能力強(qiáng),分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng),從而使乙醇發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快,因此培養(yǎng)工程酵母菌的發(fā)酵罐需要先排氣。(4)凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法,相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,移動(dòng)速度較快。而相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)能進(jìn)入凝膠內(nèi)部,移動(dòng)路徑較長(zhǎng),移動(dòng)速度也較慢。 4.胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下: (1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí),可選用　　　　或劃線分離法接種。采用平板劃線法接種時(shí)需先灼燒接種環(huán),其目的是　　　　。 (2)培養(yǎng)酵母菌R時(shí),培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長(zhǎng)提供　　　　和　　　　。 (3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和　　　　以防止胡蘿卜素分解;萃取過(guò)程中宜采用　 方式加熱以防止溫度過(guò)高;萃取液濃縮前需進(jìn)行過(guò)濾,其目的是　　　　。 (4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素,鑒定過(guò)程中需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品作為　　　　。 答案　(1)涂布分離法　滅菌(或防止雜菌污染)　(2)碳源 氮源　(3)時(shí)間　水浴　濾去不溶物　(4)(實(shí)驗(yàn))對(duì)照 解析　(1)微生物分離和培養(yǎng)中常用的接種方法是劃線分離法和涂布分離法。微生物培養(yǎng)需要無(wú)菌操作,其中對(duì)接種針需進(jìn)行灼燒滅菌處理。(2)蔗糖和硝酸鹽可分別為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),干燥過(guò)程中若溫度過(guò)高、干燥時(shí)間太長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素分解;萃取過(guò)程應(yīng)避免明火加熱,宜采用水浴方式加熱,以防止溫度過(guò)高;萃取液在濃縮之前,還要進(jìn)行過(guò)濾,以除去萃取液中的不溶物。(4)利用紙層析法鑒定所提取的胡蘿卜素時(shí),需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照,對(duì)比分析標(biāo)準(zhǔn)樣品和萃取樣品出現(xiàn)的層析帶。 5.從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌,實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。 (1)圖中物質(zhì)A為　　　　,若要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中以尿素為氮源的細(xì)菌的活菌數(shù)目,宜采用　　　　法接種到尿素培養(yǎng)基上,對(duì)照組配制的培養(yǎng)基為　　　　培養(yǎng)基,若用同濃度的土壤稀釋液接種,實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)皿中菌落數(shù)　　　(大于、等于或小于)對(duì)照組。在能利用尿素的細(xì)菌菌落周?chē)?有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是　　　　滅菌。(　　) A.高壓蒸汽 B.紫外燈照射 C.70%酒精浸泡 D.過(guò)濾 (3)下列培養(yǎng)基中,能分離出分解尿素的細(xì)菌的是(　　) A.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水 B.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、尿素 C.NaCl、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物、尿素 D.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物 (4)欲將分離得到的以尿素為氮源的細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),應(yīng)使用　　　培養(yǎng)基。 答案　(1)無(wú)菌水　涂布分離　LB全營(yíng)養(yǎng)　小于　能利用尿素的細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶,將培養(yǎng)基中的尿素分解,產(chǎn)生的氨使指示劑呈紅色　(2)D　(3)B　(4)LB液體 解析　(1)圖中物質(zhì)A為無(wú)菌水,要統(tǒng)計(jì)土壤中活菌的數(shù)目一般用涂布分離法。在能利用尿素的細(xì)菌菌落周?chē)?huì)有紅色環(huán)帶出現(xiàn),其原因是能利用尿素的細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶將培養(yǎng)基中的尿素分解,產(chǎn)生的氨使指示劑變紅。(2)對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的方法是過(guò)濾。(3)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基能分離出分解尿素的細(xì)菌。(4)欲將分離得到的以尿素為氮源的細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),應(yīng)使用LB液體培養(yǎng)基。 6.微生物與我們生活健康有著密切的聯(lián)系,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法為　　　　　,如果實(shí)驗(yàn)器材不能遇水,則用　　　　。 (2)微生物的分離提純方法主要有　　　　和　　　　　法。 (3)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同,物理性質(zhì)有所差異。擴(kuò)大培養(yǎng)一般用　　　培養(yǎng)基,分離菌種用　　　　培養(yǎng)基。它們?cè)谖锢硇再|(zhì)上不同的主要原因是　　　　　　　　　　　　。 (4)某些微生物能利用尿素是因?yàn)樗鼈兡芎铣珊头置凇　　　?。其分解尿素的方程式?　　　　　　　　　　　　。 答案　(1)高壓蒸汽滅菌　干熱滅菌　(2)劃線分離法　涂布分離　(3)液體　固體　是否含有瓊脂　(4)脲酶　(NH2)2C=O+H2O2NH3+CO2 解析　(1)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法;實(shí)驗(yàn)器材若不能遇水,則可以用干熱滅菌。(2)微生物的分離提純方法主要有劃線分離法和涂布分離法,劃線分離法操作簡(jiǎn)單,涂布分離法操作復(fù)雜但更易將單菌落分開(kāi)。(3)擴(kuò)大培養(yǎng)微生物一般用液體培養(yǎng)基,分離菌種用固體培養(yǎng)基;兩種培養(yǎng)基的差別在于后者含有瓊脂。(4)能利用尿素的微生物含有脲酶,此酶能分解尿素產(chǎn)生氨。