2019屆高考生物一輪復習 第11單元 生物技術(shù)實踐 第34講 微生物的培養(yǎng)和利用課件.ppt

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考點互動探究 教師備用習題 考試說明 1 微生物的分離和培養(yǎng) 實驗與探究能力 2 某種微生物數(shù)量的測定 實驗與探究能力 3 培養(yǎng)基對微生物的選擇作用 實驗與探究能力 4 微生物在其他方面的應用 實驗與探究能力 知識梳理 1 培養(yǎng)基 1 概念 人們按照微生物對的不同需求 配制出供其生長繁殖的 2 營養(yǎng)成分 水 無機鹽四類營養(yǎng)物質(zhì) 另外還需要滿足微生物生長對 特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及的要求 3 類型 培養(yǎng)基含凝固劑 培養(yǎng)基不含凝固劑 考點一微生物的實驗室培養(yǎng) 營養(yǎng)物質(zhì) 營養(yǎng)基質(zhì) 碳源 氮源 pH 氧氣 固體 液體 2 無菌技術(shù) 1 目的 獲得 2 關(guān)鍵 防止的入侵 3 無菌技術(shù)的主要方法及適用對象 連線 純凈培養(yǎng)物 外來雜菌 答案 a a a b b b 3 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 1 步驟 計算 溶化 倒平板 2 倒平板的過程 在火焰旁右手拿錐形瓶 左手 右手拿錐形瓶 使錐形瓶的瓶口迅速通過 左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙 右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿 左手立刻蓋上 待平板冷卻凝固后 將平板放置 使皿蓋在下 皿底在上 稱量 滅菌 拔出棉塞 火焰 培養(yǎng)皿的皿蓋 倒過來 4 純化大腸桿菌 1 原理 在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成細胞 使其長成單個的菌落 這個菌落就是純化的細菌菌落 2 平板劃線法 圖11 34 1中 通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面的操作 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 3 稀釋涂布平板法 圖11 34 1中 將菌液進行一系列的梯度稀釋 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到的表面 進行培養(yǎng) 當稀釋倍數(shù)足夠高時 即可獲得單個細菌形成的 單個 A 連續(xù)劃線 B 圖11 34 1 瓊脂固體培養(yǎng)基 菌落 5 菌種的保藏 1 對于頻繁使用的菌種 可以采用法 2 對于需要長期保存的菌種 可以采用法 臨時保藏 甘油管藏 核心講解 1 消毒和滅菌的區(qū)別 2 兩種純化細菌的方法的比較 3 平板劃線操作3個易錯點 1 灼燒接種環(huán)之后 要冷卻后再進行接種 以免溫度太高殺死菌種 2 劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連 3 劃線用力要大小適當 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 1 2017 廣東韶關(guān)一模 為了調(diào)查北江河中細菌的污染情況 某研究性學習小組同學進行了實驗 實驗包括制備培養(yǎng)基 滅菌 接種及培養(yǎng) 菌落觀察計數(shù) 請回答與此實驗相關(guān)的問題 1 實驗中制備的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的部分成分列表如下 表中各成分含量的比例確定的原則是 2 對培養(yǎng)基進行滅菌 通常采用的方法是 為了使培養(yǎng)基達到良好的滅菌效果 一般在壓力為100kPa 溫度為 的條件下 維持15 30min 題組訓練 3 為了更好地對細菌計數(shù) 一般采用的接種方法是 該方法的操作是將菌液進行一系列的 然后再分別到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 4 接種后放在恒溫箱培養(yǎng)一段時間后 為保證結(jié)果準確 選擇菌落數(shù)在的平板進行計數(shù) 該組同學在菌落計數(shù)時發(fā)現(xiàn) 統(tǒng)計的菌落數(shù)比實際數(shù)目要低 可能的原因是 答案 1 根據(jù)所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需求量 或比例 2 高壓蒸汽滅菌121 3 稀釋涂布平板法梯度稀釋涂布 4 30 300某些菌落可能是由兩個或多個細菌連在一起形成的 解析 1 培養(yǎng)基配制的過程中 成分含量的比例確定的原則是根據(jù)所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需求量 或比例 2 對培養(yǎng)基進行滅菌 通常采用的方法是高壓蒸汽滅菌 即將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi) 為達到良好的滅菌效果 一般在壓力為100kPa 溫度為121 的條件下 維持15 30min 3 為了更好地對細菌計數(shù) 一般采用的接種方法是稀釋涂布平板法 該方法的操作是將菌液進行一系列的梯度稀釋 然后再分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 4 接種后放在恒溫箱培養(yǎng)一段時間后 為保證結(jié)果準確 選擇菌落數(shù)在30 300的平板進行計數(shù) 由于某些菌落可能是由兩個或多個細菌連在一起形成的 因此統(tǒng)計的菌落比實際數(shù)目要低 2 2017 福建漳州三模 如圖11 34 2為微生物的實驗培養(yǎng)和純化醋酸菌的部分操作步驟 請回答下列問題 1 是制備培養(yǎng)基時中的主要操作 該操作需使錐形瓶的瓶口通過火焰 目的是通過 防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基 圖11 34 2 2 該純化醋酸菌的接種方法是 完成步驟 的操作 接種共需要次灼燒處理 3 純化的醋酸菌菌種將頻繁用于果醋生產(chǎn) 則可以采用的方法保存菌種 但這種方法保存的時間不長 原因是 4 將醋酸菌加入果酒中 乙醇可為醋酸菌的生命活動提供 將溫度控制在 可以獲得較多果醋 答案 1 倒平板滅菌 2 平板劃線法6 3 臨時保藏菌種容易被污染或產(chǎn)生變異 4 能量30 35 解析 1 是制備培養(yǎng)基時倒平板中的主要操作 該操作需使錐形瓶的瓶口通過火焰 目的是通過滅菌 防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基 2 根據(jù)圖 可知 該純化醋酸菌的接種方法是平板劃線法 平板劃線時 每次劃線前都要進行灼燒 最后一次劃線結(jié)束也要進行灼燒 因此共需要6次灼燒處理 3 純化的醋酸菌菌種將頻繁用于果醋生產(chǎn) 則可以采用臨時保藏的方法保存菌種 但這種方法保存的時間不長 原因是菌種容易被污染或產(chǎn)生變異 4 將醋酸菌加入果酒中 乙醇可為醋酸菌的生命活動提供能量 果醋發(fā)酵的適宜溫度是30 35 知識梳理 1 篩選菌株 1 自然界中目的菌株篩選的依據(jù) 根據(jù)它對的要求 到相應的環(huán)境中去尋找 2 實驗室中微生物篩選的原理 人為提供有利于生長的條件 包括營養(yǎng) 溫度 pH等 同時抑制或阻止其他微生物生長 3 選擇培養(yǎng)基 允許特定種類的微生物生長 同時和其他種類微生物生長的培養(yǎng)基 考點二土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) 生存環(huán)境 目的菌株 抑制 阻止 2 統(tǒng)計菌落數(shù)目 1 常用方法 法 2 統(tǒng)計依據(jù) 當樣品的足夠高時 培養(yǎng)基表面生長的一個菌落 來源于樣品稀釋液中的一個 通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù) 就能推測出樣品中大約含有多少活菌 3 其他方法 還可利用計數(shù) 3 設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中對實驗結(jié)果的影響 提高實驗結(jié)果的 例如為了排除培養(yǎng)基被雜菌污染的可能性 需以培養(yǎng)基培養(yǎng)作為空白對照 稀釋涂布平板 稀釋度 活菌 顯微鏡直接 非測試因素 可信度 未接種的 4 實驗設(shè)計 脲酶 尿素 有機質(zhì) 系列稀釋 計數(shù) 酚紅 氨 堿性 1 選擇培養(yǎng)基的作用原理 1 在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì) 如加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌 加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌 這里的加入是在滿足基本所需培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上加入 2 改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分 如缺乏氮源時可以分離出固氮微生物 以石油作為唯一碳源時 可以分離出能消除石油污染的微生物 3 改變微生物的培養(yǎng)條件 如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物 核心講解 4 通過某些特殊環(huán)境分離微生物 如在高鹽環(huán)境中可分離出耐鹽菌 在高溫環(huán)境中可分離得到耐高溫的微生物 2 培養(yǎng)基的種類與應用 3 兩種計數(shù)方法的比較 1 2017 南昌一模 下表為某微生物培養(yǎng)基的配方 請回答相關(guān)問題 1 按物理性質(zhì)劃分 該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基 無論配制何種培養(yǎng)基 在原料稱量 溶化之后都要先 然后分裝 包扎并滅菌 常用的滅菌方法是 2 根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷 該培養(yǎng)基能否用于分離土壤中分解尿素的細菌 原因是 題組訓練 3 為檢測尿素分解菌是否存在 還應加入 如果存在 將出現(xiàn)反應 4 微生物常用的接種方法有 答案 1 固體調(diào)pH高壓蒸汽滅菌 2 不能培養(yǎng)基中含有NH4NO3 尿素不是唯一氮源 3 酚紅紅色 4 平板劃線法 稀釋涂布平板法和稀釋混合平板法 解析 微生物培養(yǎng)基一般都含有水 碳源 氮源 無機鹽 此外還要滿足微生物生長對pH 特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求 對異養(yǎng)微生物來說 含C N的化合物既是碳源 也是氮源 即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方向的作用 1 分析題中表格可知 該培養(yǎng)基中加入瓊脂作為凝固劑 因此屬于固體培養(yǎng)基 不論何種培養(yǎng)基 在各成分都溶化后分裝前 要先調(diào)整pH 培養(yǎng)基常用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌 2 根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷 該培養(yǎng)基中含有NH4NO3 尿素不是唯一氮源 因此該培養(yǎng)基不能用于分離土壤中分解尿素的細菌 3 為檢測尿素分解菌的存在與否 在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 如果存在尿素分解菌 則指示劑將變紅色 4 微生物常用的接種方法有平板劃線法 稀釋涂布平板法和稀釋混合平板法 2 配制培養(yǎng)基時 需添加瓊脂 瓊脂起的作用 培養(yǎng)基中添加作為指示劑 可使目標菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶 3 對尿素溶液進行滅菌的最適方法是滅菌 A 高壓蒸汽B 干熱C 添加抗生素D 過濾E 紫外線照射F 70 酒精浸泡 4 該小組在接種前 隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間 這樣做的目的是 然后將1mL瘤胃樣液稀釋1000倍 在3個平板上用涂布法分別接入0 1mL稀釋液 經(jīng)適當培養(yǎng)后 3個平板的菌落數(shù)分別為49 47和45 據(jù)此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為個 理論上 統(tǒng)計的菌落數(shù)往往 填 低 等 或 高 于接種的實際活菌數(shù)目 答案 1 脲酶 或分解尿素的酶 氨 或NH3 2 凝固劑酚紅 3 D 4 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格4 7 108低 解析 常用的滅菌方法 高壓蒸汽滅菌法適用于一般培養(yǎng)基和玻璃器皿滅菌 干熱滅菌適用于需要保持干燥的玻璃器皿的滅菌 凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基都不能進行干熱滅菌 無菌室 緩沖間和接種箱常用紫外線進行空氣滅菌 微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌 煮沸滅菌通常不能徹底殺滅一些生物的孢子和芽孢 一般適用于餐具和不耐高溫的食品等的消毒 1 分解尿素的酶是脲酶 所以分解尿素的微生物含有脲酶 尿素含有C H O N元素 其水解產(chǎn)物是二氧化碳 水和氨氣 氨氣使的培養(yǎng)基的堿性增強 2 瓊脂是凝固劑 使培養(yǎng)基呈固態(tài) 培養(yǎng)基中的堿性物質(zhì)可以與酚酞反應產(chǎn)生紅色環(huán)帶 3 對尿素溶液進行滅菌的最適方法是過濾滅菌 4 空白平板的作用是檢測培養(yǎng)基平板是否合格 根據(jù)題干提供的數(shù)據(jù)進行計算 每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為 49 47 45 3 1000 10 1000 4 7 108 個 由于菌種可能重疊 所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往低于接種的實際活菌數(shù)目 易錯點撥 選擇菌落數(shù)在30 300的平板 的提醒 1 只得到1個菌落數(shù)在30 300的平板是錯誤的 原因是不符合實驗的重復原則 易受到偶然因素的影響 2 得到3個或3個以上菌落數(shù)在30 300的平板 也不一定正確 原因是如果不同平板間差異較大 如得到3個平板 菌落數(shù)分別為230 34 240 雖然菌落數(shù)均在 30 300 但由于34與另外兩個平板差異較大 應找出原因并重新實驗 知識梳理 考點三分解纖維素的微生物的分離 C1酶 CX酶 葡萄糖苷酶 纖維二糖 葡萄糖 剛果紅染色 紅色復合物 透明圈 纖維素 纖維素 選擇培養(yǎng)基 梯度稀釋 鑒別纖維素分解菌 透明圈 1 分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較分離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養(yǎng)基 再用鑒別培養(yǎng)基 1 選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基 以纖維素為碳源和能源的微生物可以正常生長 而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長 因培養(yǎng)基中無凝固劑 故其為液體培養(yǎng)基 利用液體培養(yǎng)基能使營養(yǎng)成分被充分消耗 以增加纖維素分解菌的濃度 2 鑒別培養(yǎng)基含瓊脂 為固體培養(yǎng)基 細菌可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見的菌落 剛果紅染色法應用的就是鑒別培養(yǎng)基 核心講解 2 篩選微生物的兩個實例比較 1 2017 成都一診 牛的食物主要是草莖類 其中含有大量的纖維素 牛胃內(nèi)的微生物在幫助消化和利用植物纖維素方面起了決定性的作用 回答下列問題 1 纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì) 組成纖維素的單體為 牛胃中某些微生物能夠產(chǎn)生纖維素酶 這種酶是一種復合酶 其中的能使纖維素分解成纖維二糖 2 實驗室培養(yǎng)牛胃內(nèi)的微生物 分離得到高純度纖維素分解菌的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染 實驗操作應在附近進行 倒平板用的培養(yǎng)皿需要保持干燥 可以采用法進行滅菌 題組訓練 3 為了從牛胃的食糜中分離出纖維素分解菌 配制的選擇培養(yǎng)基要以為唯一碳源 篩選纖維素分解菌時 常用的剛果紅染色法有兩種 一種是先培養(yǎng)微生物 再加入剛果紅進行顏色反應 另一種是 在涂布平板時滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多 原因是 答案 1 葡萄糖C1酶 CX酶 2 防止外來雜菌的入侵酒精燈火焰干熱滅菌 3 纖維素在倒平板時就加入剛果紅培養(yǎng)基表面的菌懸液過多會導致菌體堆積 影響分離效果 解析 1 纖維素是一種多糖 其基本組成單位是葡萄糖 纖維素酶是一種復合酶 其中C1酶 CX酶能使纖維素分解成纖維二糖 2 微生物分離和培養(yǎng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是防止外來雜菌的入侵 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染 實驗操作應在酒精燈火焰附近進行 倒平板用的培養(yǎng)皿需要保持干燥 可以采用干熱滅菌法進行滅菌 3 為了分離出纖維素分解菌 配制的選擇培養(yǎng)基要以纖維素為唯一碳源 篩選纖維素分解菌時 常用的剛果紅染色法有兩種 一種是先培養(yǎng)微生物 再加入剛果紅進行顏色反應 另一種是在倒平板時就加入剛果紅 在涂布平板時滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多 原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液過多會導致菌體堆積 影響分離效果 2 2017 河北石家莊二模 為了分離和純化高效分解石油的細菌 科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖11 34 4所示的實驗 1 配制好的培養(yǎng)基通常使用法滅菌 步驟 與步驟 中培養(yǎng)基成分相比 最大的區(qū)別是 圖11 34 4 2 同學A進行步驟 的操作 其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示 該同學的接種方法是 出現(xiàn)圖乙結(jié)果可能的失誤操作是 3 同學B也按照同學A的接種方法進行了步驟 的操作 將1mL樣品稀釋100倍 在3個平板上分別接入0 1mL稀釋液 經(jīng)適當培養(yǎng)后 3個平板上的菌落數(shù)分別為56 58和57 據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為個 4 步驟 需要振蕩培養(yǎng) 原因是 5 步驟 后取樣測定石油含量的目的是 答案 1 高壓蒸汽滅菌步驟 培養(yǎng)基中石油是唯一碳源 2 稀釋涂布平板法涂布不均勻 3 5 7 107 4 提高培養(yǎng)液中 溶解 氧的含量 通過振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸 提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率 5 篩選出分解石油能力最強的細菌 解析 1 配制好的培養(yǎng)基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌 步驟 與步驟 中培養(yǎng)基成分相比 最大的區(qū)別是步驟 培養(yǎng)基中石油是唯一碳源 2 同學A進行步驟 的操作 其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如題圖乙所示 該同學的接種方法是稀釋涂布平板法 出現(xiàn)圖乙結(jié)果可能的失誤操作是涂布不均勻 3 同學B也按照同學A的接種方法進行了步驟 的操作 將1mL樣品稀釋100倍 在3個平板上分別接入0 1mL稀釋液 經(jīng)適當培養(yǎng)后 3個平板上的菌落數(shù)分別為56 58和57 據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為 56 58 57 3 0 1 1000 100 5 7 107 個 4 步驟 需要振蕩培養(yǎng) 原因是提高培養(yǎng)液中 溶解 氧的含量 通過振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸 提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率 5 步驟 后取樣測定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最強的細菌 1 2017 全國卷 某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3 供植物吸收和利用 回答下列問題 1 有些細菌能分解尿素 有些細菌則不能 原因是前者能產(chǎn)生 能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源 原因是 但可用葡萄糖作為碳源 進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是 答出兩點即可 歷年真題明考向 2 為了篩選可分解尿素的細菌 在配制培養(yǎng)基時 應選擇 填 尿素 NH4NO3 或 尿素 NH4NO3 作為氮源 不選擇其他兩組的原因是 3 用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4 其作用有 答出兩點即可 答案 1 脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物 不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量 為其他有機物的合成提供原料 2 尿素其他兩組都含有NH4NO3 能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3 不能起到篩選作用 3 為細菌生長提供無機營養(yǎng) 作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 解析 1 催化尿素分解的酶為脲酶 分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物 不能利用CO2來合成有機物 進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是為細胞生命活動提供能量 葡萄糖的代謝中間產(chǎn)物可以作為合成其他有機物的原料 2 能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3 如果培養(yǎng)基中含有NH4NO3 則不能起到篩選作用 3 培養(yǎng)基中的KH2PO4和Na2HPO4可以為微生物生長提供鈉離子 鉀離子等 其還可以作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 2 2017 江蘇卷 苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中 對環(huán)境有嚴重危害 小明同學準備依據(jù)圖11 34 5操作步驟 從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株 請回答下列問題 1 酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨 K2HPO4 MgSO4 苯酚和水 其中可作為碳源的有 2 將采集到的樣品接種培養(yǎng) 苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸 以達到富集酚降解菌的目的 若上圖平板中菌落過于密集 應進一步 以便于菌落計數(shù)與分離 制備平板培養(yǎng)基時除了需要水 營養(yǎng)物質(zhì)外 還必須添加 圖11 34 5 3 圖11 34 6為連續(xù)劃線法示意圖 在圖中 填圖中序號 區(qū)域更易獲得單菌落 4 采用比色測定法 使用苯酚顯色劑 檢測降解后的廢水中苯酚殘留量 先制作系列濃度梯度并進行顯色反應 下表中1 5號比色管的苯酚濃度應分別為 如果廢水為50mg L苯酚溶液 降解后約有21 的苯酚殘留 則需將殘留液稀釋 填序號 5 10 20 倍后 再進行比色 圖11 34 6 答案 1 蛋白胨 苯酚 2 增加稀釋涂布凝固劑 3 4 0 0 2 0 4 0 6 0 8 解析 1 蛋白胨 苯酚都可以作為碳源 2 為了篩選酚降解菌 苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸增加 若平板中菌落過于密集 說明濃度太大 為方便菌落計數(shù)與分離 應進一步稀釋涂布 平板培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基 制備時必須添加凝固劑 3 連續(xù)劃線法中在劃線的末尾區(qū)域菌種濃度最小 更易獲得單菌落 4 1號比色管作對照 苯酚濃度為0 1 6號比色管苯酚濃度由0逐漸增加到1mg L 且有梯度 所以1 5號比色管的苯酚濃度應分別為0 0 2 0 4 0 6 0 8mg L 廢水為50mg L苯酚溶液 降解后約有21 的苯酚殘留 則需將殘留液稀釋 20倍后 再進行比色 3 2016 全國卷 空氣中的微生物在重力等作用下 可以一定程度地沉降 某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物 以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況 實驗步驟如下 配制培養(yǎng)基 成分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl X H2O 制作無菌平板 設(shè)置空白對照組和若干實驗組 進行相關(guān)操作 將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時間 統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù) 回答下列問題 1 該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于 若要完成步驟 該培養(yǎng)基中的成分X通常是 2 步驟 中 實驗組的操作是 3 若在某次調(diào)查中 某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個 平板 而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落 這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象 若將30 即36 6 個 平板作為本組菌落數(shù)的平均值 該做法 填 正確 或 不正確 答案 1 牛肉膏 蛋白胨瓊脂 2 將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上 開蓋暴露一段時間 3 污染不正確 解析 本題考查微生物的培養(yǎng)與計數(shù) 主要考查學生的識記 理解與實驗設(shè)計能力 1 培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨中都含有蛋白質(zhì) 可作為氮源 用于計數(shù)的培養(yǎng)基應為固體培養(yǎng)基 需加入瓊脂等凝固劑 2 該實驗的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況 所以需將滅菌后的平板放置在教室不同高度的位置上 開蓋暴露一段時間 然后再在恒溫箱中培養(yǎng) 3 空白對照組應是無菌平板 所以應該無菌落出現(xiàn) 有菌落出現(xiàn)說明培養(yǎng)基被污染了 那么其他各實驗組的培養(yǎng)基也不合格 所以需要重新制作平板 4 2016 全國卷 某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌 分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明 乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣 回答下列問題 1 分離純化乳酸菌時 首先需要用對泡菜濾液進行梯度稀釋 進行梯度稀釋的理由是 2 推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和 分離純化時應挑選出的菌落作為候選菌 3 乳酸菌在 20 長期保存時 菌液中常需要加入一定量的 填 蒸餾水 甘油 或 碳酸鈣 答案 1 無菌水泡菜濾液中菌的濃度高 直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 2 鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸 或酸 具有透明圈 3 甘油 解析 本題考查微生物的培養(yǎng)及泡菜制作方面的知識 1 分離純化乳酸菌時 首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋 進行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細菌 從而能在培養(yǎng)基表面形成單菌落 2 在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識別與分離 分離純化時應挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌 3 乳酸菌在 20 長期保存時 甘油可起到密封和隔絕空氣的作用 有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑 長期使用會污染環(huán)境 研究發(fā)現(xiàn) 苯磺隆能被土壤中某些微生物降解 分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲 乙所示 1 微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源 水 四類 該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源 其原因是 2 純化菌株時 通常使用的劃線工具是 劃線的某個平板培養(yǎng)后 第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌 第二劃線區(qū)域及其他劃線區(qū)域均無菌落 造成劃線無菌落可能的操作失誤有 3 為探究苯磺隆的降解機制 將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心 取上清液做圖乙所示實驗 該實驗的假設(shè)是 該實驗設(shè)計是否合理 為什么 答案 1 氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖 2 接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻劃線未從第一區(qū)域末端開始 3 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理缺少空白對照 解析 1 微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水 碳源 氮源和無機鹽四類營養(yǎng)物質(zhì) 選擇培養(yǎng)基允許特定種類的微生物生長 同時抑制或阻止其他種類微生物生長 因而培養(yǎng)基必須以苯磺隆為唯一碳源 只讓目的菌株生長繁殖 2 純化菌株時 通常使用的劃線工具是接種環(huán) 或接種針 接種環(huán)在平板內(nèi)的每一次劃線前 都要先灼燒滅菌冷卻后劃線 而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線 不冷卻會燙死上次劃線末端的菌株 從空白處劃線是不會有菌落生長的 3 圖乙上清液中加入的蛋白酶溶液是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的 由此可判定 實驗假設(shè)是目的菌株通過分泌某種蛋白質(zhì)來降解苯磺隆 但是尚需設(shè)置不加入蛋白酶的對照組實驗 否則沒有說服力 因而實驗設(shè)計不合理