2019年春高中生物 專題2 細胞工程 2.2 動物細胞工程 2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體（第2課時）預(yù)習(xí)學(xué)案 新人教版選修3.doc

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動物細胞融合與單克隆抗體 課前預(yù)習(xí)學(xué)案 一、預(yù)習(xí)目標 預(yù)習(xí)動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程，了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用，并說其應(yīng)用實例。 “二、預(yù)習(xí)內(nèi)容 ㈠、動物細胞融合 1、概念：_______或_______動物細胞結(jié)合形一個細胞的過程，也稱細胞雜交。 2、結(jié)果：形成___________。 3、過程：兩個或多個細胞___________________________________。 4、意義：克服了___________的不親和性，成為研究___________、___________、腫瘤和 _______________培育的重要手段。 ㈡、單克隆抗體 1、抗體 ⑴產(chǎn)生細胞：_________________。 ⑵成分：__________。 ⑶特點：從__________中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2、單克隆抗體的制備 (1)過程 ⑵雜交瘤細胞的特點：____________________、____________________。 ⑶單克隆抗體的優(yōu)點：____________、____________、____________。 ㈢、單克隆抗體的應(yīng)用 1、作為診斷試劑，具有__________、__________、__________、__________的優(yōu)點。 2、用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療_______、可制成___________。 三、提出疑惑 同學(xué)們，通過你的自主學(xué)習(xí)，你還有哪些疑惑，請把它填在下面的表格中 疑惑點 疑惑內(nèi)容 課內(nèi)探究學(xué)案 一、學(xué)習(xí)目標 1、 掌握動物細胞融合與植物體細胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。 2、 簡述動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程。 3、 了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用，并說其應(yīng)用實例。 學(xué)習(xí)重難點：單克隆抗體的制備 二、學(xué)習(xí)過程 (一) 動物細胞的融合 探究一：動物細胞的融合 1、植物體細胞雜交和動物細胞融合的區(qū)別（學(xué)生填下表） 植物體細胞雜交 動物細胞融合 細胞融合原理 細胞膜的流動性 融合過程 先使細胞分散開 誘導(dǎo)方法 電激、振動、離心、聚乙二醇 結(jié)果 應(yīng)用 培育植物新品種 意義 相同點 原生質(zhì)體融合原理相同；原生質(zhì)體融合的方法相似 2植物體細胞雜交和動物細胞融合的主要區(qū)別是什么？ 3、為什么可以使用滅活的病毒促進動物細胞融合？ 4、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？ 知識閱讀：閱讀課本P52中的小字，了解一下動物細胞融合技術(shù)的發(fā)展簡史。 （二）單克隆抗體 探究二：單克隆抗體制備的原理 1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？抗體是從何來的？ 2、B淋巴細胞有什么特點？ 3、若要想獲得大量的單一抗體，如何做呢？ 4、在體外培養(yǎng)的條件下，一個B淋巴細胞是不可能無限增殖的，那么，怎樣解決這一問題的呢？ 5、小結(jié)以下內(nèi)容： ◆ 利用____________________產(chǎn)生特異性抗體的功能。 ◆ 利用____________________無限增殖的特性。 ◆ 利用____________________技術(shù)將兩種細胞融合獲得雜交瘤細胞。 ◆ 利用____________________技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細胞。 探究三：單克隆抗體制備的過程 1、如何獲得B淋巴細胞？ 2、如果把B淋巴細胞和骨髓瘤細胞放在一起時，會有幾種融合方式（類型）？ 3、 選擇雜交瘤細胞的兩步篩選的目的各是什么？ 4、如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？（教師講解為主） 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細胞就是雜交瘤細胞，但這些雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞，通常用“有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細胞稀釋，用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔不超過一個細胞，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體，那么上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細胞還不能保證是來自單個細胞，挑選陽性孔的細胞繼續(xù)進行有限稀釋，一般需進行3～4次，直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞。該過程即為雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。 探究四：單克隆抗體的應(yīng)用 1、單克隆抗體的應(yīng)用有哪些？ 2、生物導(dǎo)彈的組成及優(yōu)點 （三）反思總結(jié) (四)當堂檢測 1、基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞混合，用滅活的仙臺病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細胞 ( ) A．AAaa B．AaBb C．Aabb D．BBbb 2、動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是 ( ) ①誘導(dǎo)融合的方法完全相同 ②所用的技術(shù)手段不相同 ③所采用的原理完全相同 ④都能形成雜種細胞 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 3、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 ( ) A、可以制成診斷盒．用于疾病的珍斷 B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治療 C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn) 4、“生物導(dǎo)彈”是指 ( ) A、單克隆抗體 B、帶有特定藥物的單克隆抗體 C、雜交細胞 D、B淋巴細胞 課后練習(xí)與提高 1、動物細胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動物細胞融合中有特殊性的是 ( ) A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點 C、融合的誘導(dǎo)手段 D、融合的過程 2、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細胞的名稱為 ( ) A、抗體、T淋巴細胞 B、抗原、T淋巴細胞 C、抗體、B淋巴細胞 D、抗原、效應(yīng)B淋巴細胞 3、單克隆抗體和血清抗體相比，其優(yōu)越性在 于 ( ) A、單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈” B、單克隆抗體能夠在體外制備 C、單克隆抗體比血清抗體的特異性強、免疫活性高 D、單克隆抗體制備過程簡單 4、單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤的是 ( ) A．特異性強、靈敏度高 B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C．體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體 D．由效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌 5、試管嬰兒、試管苗、克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果,下面對其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述正確的是 ( ) A．都屬于無性生殖,能保持母本性狀 B．都是細胞工程的技術(shù)范圍 C．都充分體現(xiàn)了體細胞的全能性 D．都不會發(fā)生基因重組和變異 6、右圖為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答： （1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已用____ __________ ____________處理，除去了____________；由A、B到細胞C 的過程中，常用的物理方法是_____________________________。 融合完成的標志是_______________。 （2）若A、B是植物細胞，則形成的D細胞還要應(yīng)用__________ ____________________技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。 （3）若A、B是動物細胞，一般取自________________________________， 然后用____________________使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞融合的手段是_______________________，所形成的D稱為_____________________ ，A、B融合為C的過程說明了細胞膜具有_____________________。 （4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應(yīng)B細胞，那么，在獲得此細胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了_______________________ ___________________，圖中B為 。 （5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有_____種，用來培養(yǎng)的D細胞應(yīng)該是_________________。從中選擇出它的方法是_________________培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和______________。 動物細胞融合與單克隆抗體導(dǎo)學(xué)案答案 預(yù)習(xí)內(nèi)容： 探究二：單克隆抗體制備的原理 1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？抗體是從何來的？ 傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體，然后從動物血清中分離所需要的抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低，而且制備的抗體特異性差。 2、B淋巴細胞有什么特點？ B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體，但每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。 3、若要想獲得大量的單一抗體，如何做呢？ 我們必須用單個B淋巴細胞進行無性繁殖，也就是通過克隆形成細胞群，這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體，即單克隆抗體 第二步篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細胞。因為小鼠體內(nèi)的B淋巴細胞有很多種，因此獲得的雜交瘤細胞可能產(chǎn)生不同的抗體，需要從中篩選出能產(chǎn)生我們所需的單一抗體的雜交瘤細胞，篩選的方法是專一抗體檢驗。 4、如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？（教師講解為主） 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細胞就是雜交瘤細胞，但這些雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞，通常用“有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細胞稀釋，用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔不超過一個細胞，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中