（浙江選考）2020版高考生物新導(dǎo)學(xué)大一輪復(fù)習(xí) 第32講 生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用、植物的組織培養(yǎng)（含解析）講義.docx

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第32講　生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用、植物的組織培養(yǎng) [考綱要求]　1.果酒及果醋的制作。2.泡菜的腌制和亞硝酸鹽的測定。3.植物的組織培養(yǎng)。 考點(diǎn)一　果酒及果醋的制作 1.用葡萄制作葡萄酒 (1)實(shí)驗(yàn)原理：葡萄酒是酵母利用葡萄糖進(jìn)行酒精發(fā)酵(乙醇發(fā)酵)的產(chǎn)物。酵母菌只有在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵，即將葡萄糖氧化成乙醇。但是當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時(shí)，酵母菌就會(huì)死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應(yīng)式：C6H12O6―→2CO2＋2C2H5OH。 (2)實(shí)驗(yàn)步驟：沖洗(用鮮紅紫色的高錳酸鉀溶液浸泡葡萄，用清水沖洗)→榨汁→制作酵母懸液(干酵母＋水＋少許蔗糖)→裝入發(fā)酵瓶(裝量不要超過2/3)→酒精發(fā)酵(在25～30℃的條件下放置2～3天，當(dāng)發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡，即表示發(fā)酵完畢)→過濾、分裝、保存(用兩層紗布過濾發(fā)酵液)。 2.用果汁制作果酒 (1)實(shí)驗(yàn)原理：用葡萄制作的葡萄酒不含糖，酒精含量也低(平均的體積分?jǐn)?shù)為8%)，而用果汁制作的果酒，其酒精含量較高(體積分?jǐn)?shù)約為15%)，含糖量也較高。 (2)實(shí)驗(yàn)步驟：選擇材料(最好選擇蘋果)→制取果汁→配料(200g蔗糖＋1L果汁＋酵母懸液)→發(fā)酵→靜置→用虹吸法取出。 3.用果酒制作果醋 (1)實(shí)驗(yàn)原理：醋化醋桿菌在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸，反應(yīng)式為C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O。 (2)實(shí)驗(yàn)步驟：連接發(fā)酵裝置→加入醋化醋桿菌→發(fā)酵并檢測pH→調(diào)節(jié)活塞，控制流量→測定pH，監(jiān)控發(fā)酵情況。 (1)先對(duì)葡萄去梗以方便對(duì)其進(jìn)行清洗和消毒(　　) (2)用葡萄制作的葡萄酒不含糖，酒精含量平均體積分?jǐn)?shù)為8%(　√　) (3)酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵溫度(　　) (4)果酒制作中發(fā)酵開始時(shí)，微生物的需氧呼吸會(huì)因產(chǎn)熱而使發(fā)酵瓶內(nèi)壓強(qiáng)增大(　　) (5)在制作果酒、果醋時(shí)，適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長繁殖(　√　) 觀察A、B、C三個(gè)圖，據(jù)圖分析： (1)圖中A可表示酒精發(fā)酵菌種的細(xì)胞模式圖，A不同于B最顯著的特征是A具有細(xì)胞核。 (2)圖中B可表示醋酸發(fā)酵菌種的細(xì)胞模式圖，該菌種可從變酸的酒表面的菌膜中獲取，B沒有線粒體(細(xì)胞器)，故需氧呼吸的場所是細(xì)胞溶膠和細(xì)胞膜。 (3)裝置甲、乙、丙的作用分別是什么？ 提示　通入空氣(氧氣)、排氣、取樣(對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測)。 (4)圖中發(fā)酵瓶中葡萄汁的量是否恰當(dāng)？為什么？ 提示　不恰當(dāng)，因?yàn)槠咸阎牧坎荒艹^發(fā)酵瓶體積的2/3，而且不能將排氣口淹沒。 1.請(qǐng)回答用梨釀制醋酸實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問題： (1)梨汁制作：用渾濁的梨汁制作澄清的梨汁可加入________酶。為證明該酶的效果，可分別取等量________________________的梨汁，各加入等量的95%乙醇，預(yù)計(jì)前者出現(xiàn)的沉淀物較少。梨汁的澄清度與酶的__________呈正相關(guān)。 (2)酒精發(fā)酵：干酵母制成糊狀后，為使酵母迅速發(fā)生作用，可加極少量的________。適宜條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵，待酵母下沉，可用________法將上清液(即果酒)取出。 (3)醋酸發(fā)酵：為防止培養(yǎng)基沾到三角瓶壁或試管壁上，在將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到三角瓶或試管中時(shí)必須用________。下列不能縮短果醋制作周期的措施是________。 A.用果酒為原料 B.增加醋化醋桿菌的數(shù)量 C.將酒—水混合物pH調(diào)至7.0 D.發(fā)酵階段封閉充氣口 答案　(1)果膠　澄清的梨汁和渾濁(順序不能置換)　活性和數(shù)量　(2)蔗糖　虹吸　(3)三角漏斗　D 解析　(1)果膠酶分解果膠，能夠提高果汁的出汁率和澄清度。為證明該酶的效果，可分別向澄清的梨汁和渾濁的梨汁中各加入等量的95%乙醇，預(yù)計(jì)前者出現(xiàn)的沉淀物少，梨汁的澄清度與酶的活性和數(shù)量呈正相關(guān)。(2)果酒制作過程中，向酵母勻漿中加入少量蔗糖，可促使酵母菌快速發(fā)揮作用。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，發(fā)酵液中酒精濃度逐漸增加，酵母菌逐漸死亡，酵母下沉，此時(shí)采用虹吸法吸取上清液獲得果酒。(3)在培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移過程中，為防止培養(yǎng)基沾到三角瓶壁或試管壁上，一般利用三角漏斗轉(zhuǎn)移。制備果醋需通過醋化醋桿菌對(duì)果酒進(jìn)行發(fā)酵，該過程為需氧呼吸，因此需通入無菌的空氣，D項(xiàng)符合題意。 2.(2018紹興聯(lián)考)回答與果酒及果醋制作有關(guān)的問題： (1)在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，菌種的來源主要是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。要篩選得到純凈的酵母菌種，首先要配制培養(yǎng)基，配好后應(yīng)置于滅菌鍋內(nèi)加熱一段時(shí)間，以達(dá)到______的目的。加熱結(jié)束后，不能立刻打開滅菌鍋，否則培養(yǎng)基會(huì)______。在固體培養(yǎng)基上劃線分離時(shí)，單菌落會(huì)出現(xiàn)在______。在如圖篩選過程中，不該出現(xiàn)的操作是______。 (2)下圖裝置中彎曲的安全玻璃管可以讓瓶中的二氧化碳?xì)怏w排出，還可以______________。為了制作酒精含量較高(體積分?jǐn)?shù)約為15%)、糖含量也較高的葡萄酒，可以向果汁中加入適量________。 (3)果醋發(fā)酵過程中，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，乙醇含量逐漸下降，這是由于醋桿菌在________和酸性環(huán)境下將乙醇氧化為醋酸。 答案　(1)滅菌　溢出(或噴出)　劃線的末端　C　(2)減少氧氣和雜菌進(jìn)入　蔗糖　(3)有氧(或充氧) 解析　(1)葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，菌種的來源主要是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。要篩選得到純凈的酵母菌種，首先要配制培養(yǎng)基，配好后應(yīng)置于滅菌鍋內(nèi)加熱一段時(shí)間，以達(dá)到滅菌的目的。加熱結(jié)束后，不能立刻打開滅菌鍋，否則培養(yǎng)基會(huì)溢出(或噴出)。在固體培養(yǎng)基上劃線分離時(shí)，單菌落會(huì)出現(xiàn)在劃線的末端。在題干篩選過程中，不該出現(xiàn)的操作是C，即不能手持培養(yǎng)皿直接用酒精燈火焰給培養(yǎng)皿加熱。(2)圖示裝置中彎曲的安全玻璃管可以讓瓶中的二氧化碳?xì)怏w排出，還可以減少氧氣和雜菌進(jìn)入，有利于酵母菌進(jìn)行厭氧呼吸。為了制作酒精含量較高(體積分?jǐn)?shù)約為15%)、糖含量也較高的葡萄酒，可以向果汁中加入適量蔗糖。(3)果醋發(fā)酵過程中，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，乙醇含量逐漸下降，這是由于醋桿菌在有氧(或充氧)和酸性環(huán)境中將乙醇氧化為醋酸。 發(fā)酵條件的控制 (1)酵母菌的繁殖需大量氧氣，而發(fā)酵過程進(jìn)行厭氧呼吸，故果酒制作的前期應(yīng)通入氧氣，而后期應(yīng)保證嚴(yán)格的無氧環(huán)境。 (2)果醋制作過程中要求始終通氧，缺氧時(shí)醋化醋桿菌的生長、增殖和醋酸的生成都會(huì)受到影響。 考點(diǎn)二　泡菜的腌制和亞硝酸鹽的測定 1.泡菜的制作 (1)菌種：主要是假絲酵母和乳酸菌。 (2)原理：在無氧條件下，微生物將蔬菜中的糖和其他營養(yǎng)物質(zhì)發(fā)酵成有機(jī)酸和醇類物質(zhì)等。 (3)制作流程 2.亞硝酸鹽的測定 (1)測定原理 亞硝酸鹽可與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，這一產(chǎn)物再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物，可用光電比色法定量測定。 (2)亞硝酸鹽的定量測定流程 ①樣品處理：泡菜25g制勻漿過濾后調(diào)pH到8.0→加25mL硫酸鋅溶液→加氫氧化鈉溶液至產(chǎn)生白色沉淀→水浴加熱至60C→過濾后取濾液和洗滌液定容至500mL。 ②測定：10mL樣品溶液＋4.5mL氯化銨緩沖液＋2.5mL60%乙酸溶液＋5mL顯色液→定容至25mL→暗處靜置25min→在550nm處測定光密度值(以10mL水為空白對(duì)照)。 ③標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：以亞硝酸鈉質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以光密度值(OD值)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ④計(jì)算 公式：X1＝ X1：樣品中亞硝酸鹽含量，單位mg/kg； m1：樣品質(zhì)量，單位g； m2：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的亞硝酸鹽質(zhì)量，單位μg； V1：樣品處理液總體積； V2：測定用樣品液體積。 3.泡菜制作的關(guān)鍵點(diǎn) (1)防止雜菌污染：每次取樣用具要洗凈，要迅速封口。 (2)氧氣需求 ①泡菜壇要選擇氣密性好的容器，以創(chuàng)造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵，防止蔬菜腐爛。 ②泡菜壇蓋邊沿的水槽內(nèi)要注滿水，以保證乳酸菌發(fā)酵所需要的無氧環(huán)境，并注意在發(fā)酵過程中要經(jīng)常補(bǔ)水。 (3)溫度：發(fā)酵過程中溫度控制在室溫即可，最好在26～36℃之間。溫度過高，則易滋生雜菌；溫度過低，則發(fā)酵時(shí)間延長。 (4)材料的選擇及用量 ①蔬菜應(yīng)新鮮，若放置時(shí)間過長，亞硝酸鹽含量增多。 ②清水和鹽的質(zhì)量比為4∶1，鹽水要煮沸后冷卻。煮沸有兩大作用，一是除去水中的O2，二是殺滅鹽水中的其他微生物。 (1)泡菜腌制主要利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵(　√　) (2)常用光電比色法測定泡菜中亞硝酸鹽含量(　√　) (3)泡菜腌制時(shí)，間隔一段時(shí)間應(yīng)將壇蓋打開，放出CO2(　　) (4)亞硝酸鹽可與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，形成紫紅色產(chǎn)物，可用光電比色法定量(　　) (5)制作泡菜時(shí)，若要發(fā)酵快些可將蔬菜在開水中浸1min后入壇(　√　) 熱圖解讀：下表中甲～丙為泡菜、果醋、果酒等發(fā)酵食品的制作裝置圖，請(qǐng)據(jù)圖分析： 食品 ① ② ③ 主要微生物 ④ ⑤ ⑥ 制作裝置或操作步驟 (1)圖中①～③分別是哪種發(fā)酵食品？ 提示?、偈枪?、②是果醋、③是泡菜。 (2)圖中④～⑥分別是哪種菌種？分別是真核生物還是原核生物？ 提示?、苁墙湍妇?、⑤是醋化醋桿菌、⑥是乳酸菌，其中酵母菌為真核生物，醋化醋桿菌、乳酸菌為原核生物。 (3)甲～丙裝置或者步驟是否存在缺陷？試具體分析指出。 提示　甲裝置中的排氣管不應(yīng)插入到發(fā)酵液內(nèi)。 (4)說明丙裝置中“放水”的作用。 提示　裝置中“放水”的作用在于為泡菜壇營造無氧環(huán)境。 (5)下圖為丙裝置乳酸菌的數(shù)量、乳酸和亞硝酸鹽的含量隨時(shí)間變化的曲線，請(qǐng)將三幅圖分別填上“縱軸標(biāo)識(shí)”。 ①～③縱軸標(biāo)識(shí)依次為乳酸菌數(shù)量、亞硝酸鹽含量、乳酸含量。 1.(2019寧波模擬)下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： (1)制作泡菜時(shí)加入已腌制過的泡菜汁的目的是_________________________________。 (2)泡菜在腌制時(shí)，抑制有害菌繁殖是關(guān)鍵。下列與此無關(guān)的敘述是(　　) A.白菜在開水中浸1min，熱水洗壇內(nèi)壁兩次 B.加入適量糖和調(diào)味品 C.壇口用水封好，防止空氣進(jìn)入 D.加入適量的鹽水、白酒 (3)亞硝酸鹽與顯色劑會(huì)生成________色產(chǎn)物。對(duì)亞硝酸鹽的定量測定可以用_________法測出光密度值，利用預(yù)先建立的_________估算出樣品中的亞硝酸鹽含量。在進(jìn)行樣品測定時(shí)，要取等量水進(jìn)行同樣的測定，目的是______________________________________________。分析下圖的曲線可知，食用泡菜的最佳時(shí)間是________點(diǎn)。 (4)若要分離出變質(zhì)泡菜中的細(xì)菌，下列敘述錯(cuò)誤的是________。 A.取變質(zhì)泡菜汁用無菌水配制成懸液 B.用劃線分離法更易獲得單菌落 C.需要配制合適的培養(yǎng)基 D.培養(yǎng)用具、培養(yǎng)基必須是無菌的 答案　(1)接種已經(jīng)擴(kuò)增的發(fā)酵菌，加速發(fā)酵過程　(2)B　(3)紫紅　光電比色　標(biāo)準(zhǔn)曲線　作為空白對(duì)照　C　(4)B 2.(2018嘉興3月模擬)泡菜是人們喜愛的食品，但在腌制的過程中會(huì)產(chǎn)生一定量的亞硝酸鹽，危害人們的健康。研究人員檢測了不同濃度的食鹽、不同發(fā)酵階段的泡菜中的亞硝酸鹽含量，結(jié)果如圖所示。 請(qǐng)回答： (1)制作泡菜時(shí)如希望發(fā)酵快一些，可將蔬菜放在______中浸泡1分鐘后入壇。發(fā)酵壇中還可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香感和____________。 (2)據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是________。 A.腌制泡菜的最佳食鹽用量約為5% B.過多的食鹽可能會(huì)抑制發(fā)酵作用 C.腌制初期泡菜的亞硝酸鹽含量上升 D.食用泡菜最安全的是腌制后3～9天 (3)在利用光電比色法測定泡菜亞硝酸鹽含量時(shí)，在樣品溶液中加入顯色劑會(huì)生成_______色產(chǎn)物。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，可以亞硝酸鈉的質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以____________為縱坐標(biāo)。對(duì)樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定中，要用光程相同的________。 答案　(1)開水　抑制雜菌生長　(2)D　(3)紫紅　光密度值　比色杯 解析　(1)制作泡菜時(shí)如希望發(fā)酵快一些，可將蔬菜放在開水中浸泡1分鐘后入壇，發(fā)酵壇中加一些白酒的目的是增加醇香感和抑制雜菌生長。(2)腌制泡菜的最佳食鹽用量約為5%，A正確；過多的食鹽可能會(huì)抑制發(fā)酵作用，B正確；腌制初期泡菜的亞硝酸鹽含量上升，C正確；腌制后3～9天，泡菜中亞硝酸鹽含量較高，不宜食用，D錯(cuò)誤。(3)在利用光電比色法測定泡菜亞硝酸鹽含量時(shí)，在樣品溶液中加入顯色劑會(huì)生成紫紅色產(chǎn)物。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，可以亞硝酸鈉的質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以光密度值為縱坐標(biāo)。對(duì)樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定中，要用光程相同的比色杯。 泡菜腌制過程中，乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化 發(fā)酵時(shí)期 乳酸菌數(shù)量 乳酸含量 亞硝酸鹽含量 發(fā)酵初期 少(有O2，乳酸菌活動(dòng)受抑制) 少 增加(硝酸鹽還原菌的作用) 發(fā)酵中期 最多(乳酸抑制其他菌的活動(dòng)) 積累、增多、pH下降 下降(硝酸鹽還原菌受抑制，部分亞硝酸鹽被分解) 發(fā)酵后期 減少(乳酸繼續(xù)積累，pH繼續(xù)下降，抑制乳酸菌的活動(dòng)) 繼續(xù)增多，pH繼續(xù)下降 下降至相對(duì)穩(wěn)定(硝酸鹽還原菌被完全抑制) 考點(diǎn)三　植物的組織培養(yǎng) 1.組織培養(yǎng)的概念 取一部分植物組織，在無菌的條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽。 2.組織培養(yǎng)的原理 植物細(xì)胞的全能性。 3.培養(yǎng)基中加入的激素 (1)激素種類：生長素和細(xì)胞分裂素，兩者的摩爾濃度比決定組織是生根，還是生芽。 (2)激素的使用比例 比例 結(jié)果 細(xì)胞分裂素與生長素的比例高 誘導(dǎo)芽的生成 細(xì)胞分裂素與生長素的比例大致相等 愈傷組織繼續(xù)生長而不分化 細(xì)胞分裂素與生長素的比例低 會(huì)趨于長根 4.實(shí)驗(yàn)中使用的激素 人工合成的萘乙酸(NAA)代替生長素，人工合成的芐基腺嘌呤(BA)代替細(xì)胞分裂素。 5.菊花的組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 (1)發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的比較 ①發(fā)芽培養(yǎng)基：細(xì)胞分裂素摩爾濃度大于生長素摩爾濃度的培養(yǎng)基。 ②生根培養(yǎng)基：生長素摩爾濃度大于細(xì)胞分裂素摩爾濃度的培養(yǎng)基。 (2)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 以菊花為材料進(jìn)行組織培養(yǎng)。首先，用細(xì)胞分裂素相對(duì)較多的培養(yǎng)基(發(fā)芽培養(yǎng)基)進(jìn)行培養(yǎng)，使其長出較多的叢狀苗；然后將叢狀苗分株培養(yǎng)。分株后，再移入含有較多生長素的培養(yǎng)基(生根培養(yǎng)基)中，使其生根；將生根的苗從三角瓶中移至草炭土或蛭石中繼續(xù)生長，2～3天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進(jìn)行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止；苗健壯后再移至土中培養(yǎng)。 6.菊花的組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)步驟 (1)配制MS培養(yǎng)基：由大量元素、微量元素和有機(jī)成分組成。 (2)取外植體：在超凈臺(tái)中，將無菌培養(yǎng)的菊花幼苗切段，每段至少有1張葉片。 (3)生芽培養(yǎng)：在生芽培養(yǎng)基中放入2～3段幼莖切段，在日光燈下保持18～25℃的溫度培養(yǎng)，每天的光照時(shí)間不少于14.5h。 (4)生根培養(yǎng)：2～3周后，將生長健壯的叢狀苗在無菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng)。 (5)適應(yīng)鍛煉：待生根后，將苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持80%以上的濕度，2～3天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進(jìn)行鍛煉，直至將罩全部打開處于自然濕度下為止。 (6)定植：將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)。 (7)自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)的步驟：可取一段莖在70%乙醇中浸泡10min，再放入5%次氯酸鈉溶液中浸泡5min，然后用另一5%次氯酸鈉溶液浸泡5min，最后在超凈臺(tái)中用無菌水清洗，將莖的切段培養(yǎng)在生芽培養(yǎng)基中。 (1)二倍體植株的花粉經(jīng)植物組織培養(yǎng)后可得到穩(wěn)定遺傳的植株(　　) (2)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是植物組織培養(yǎng)(　√　) (3)脫分化過程不需要植物激素，植物激素只有在再分化過程中發(fā)揮作用(　　) (4)由于植物細(xì)胞都具有全能性，所以菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中選材不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果(　　) (5)發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于各種植物激素的含量不同(　√　) 熱圖解讀：下圖是植物組織培養(yǎng)過程示意圖。據(jù)圖回答下列問題： (1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。 (2)在過程A中，為了有利于嫩枝組織細(xì)胞啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織，常常需要在配制好的培養(yǎng)基中添加植物激素。嫩枝組織細(xì)胞接種后2～5d時(shí)，若發(fā)現(xiàn)其邊緣局部污染，原因可能是嫩枝組織細(xì)胞消毒不徹底。 (3)在過程B中，若愈傷組織沒有形成根，但分化出了芽，其原因可能是培養(yǎng)基中生長素較少，細(xì)胞分裂素較多；若要獲得更多的愈傷組織，培養(yǎng)基中兩種激素的含量應(yīng)該是兩種激素的比例大致相等。 (4)切取若干經(jīng)光照一段時(shí)間后的幼苗芽尖處的組織塊，消毒后，接種到誘導(dǎo)再分化的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該培養(yǎng)基中兩種植物激素濃度相同。從理論上分析，分化的結(jié)果是生根；原因是培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素的濃度相等，而經(jīng)光照后的幼苗芽尖處組織塊中含較多生長素，因此組織塊處的細(xì)胞分裂素相對(duì)較少，生長素相對(duì)較多，故誘導(dǎo)生根。 1.在植物組織培養(yǎng)再分化階段中，逐漸改變培養(yǎng)基中植物激素X和植物激素Y的濃度比，細(xì)胞群的變化情況如下圖所示。若培養(yǎng)基中植物激素X的濃度為a、植物激素Y的濃度為a＋0.2，則細(xì)胞群分化的結(jié)果最可能是試管(　　) 答案　C 解析　由圖可知，植物激素X的濃度小于植物激素Y的濃度時(shí)，有利于根的分化。 2.為了探究6－BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6－BA和IAA，配制成四種培養(yǎng)基(見下表)，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表。 培養(yǎng)基編號(hào) 濃度/mgL－1 m/% n/個(gè) 6－BA IAA 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 請(qǐng)回答下列問題： (1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的元素可分為__________和__________兩類。上述培養(yǎng)基中，6－BA屬于__________類生長調(diào)節(jié)劑。 (2)在該實(shí)驗(yàn)中，自變量是______，因變量是________，自變量的取值范圍是________。 (3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是______號(hào)培養(yǎng)基。 (4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入_____(填“6－BA”或“IAA”)。 答案　(1)大量元素　微量元素　細(xì)胞分裂素　(2)IAA濃度　再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)　0～0.5mgL－1　(3)1　(4)6－BA 解析　植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基的主要成分有無機(jī)鹽(大量元素和微量元素)、有機(jī)物，常常還需要添加植物激素。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中加入的6－BA屬于細(xì)胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑。根據(jù)表中所列數(shù)據(jù)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本實(shí)驗(yàn)自變量是IAA濃度，其取值范圍是0～0.5mgL－1，因變量是再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)。當(dāng)生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí)，有利于根的分化，所以為了誘導(dǎo)菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入6－BA。 植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細(xì)胞分裂素 (1)使用先后順序與細(xì)胞分裂和分化的關(guān)系 使用順序 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 先生長素，后細(xì)胞分裂素 有利于分裂但不分化 先細(xì)胞分裂素，后生長素 細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用 分化頻率提高 (2)用量比例與根、芽的分化 生長素和細(xì)胞分裂素比值 結(jié)果 比值高時(shí) 促進(jìn)根的分化，抑制芽的形成 比值低時(shí) 促進(jìn)芽的分化，抑制根的形成 比值適中 促進(jìn)愈傷組織的形成 探究真題　預(yù)測考向 1.(2017浙江11月選考)回答與釀酒和制醋有關(guān)的問題： (1)為了獲得優(yōu)良的釀酒紅曲霉菌株，將原菌株的孢子誘變處理后制成較稀濃度的單孢子懸液，這樣做的目的是在培養(yǎng)時(shí)利于獲得________。 (2)大米經(jīng)蒸煮、紅曲霉菌糖化后，用某釀酒酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵，發(fā)酵完畢后得到新鮮紅曲酒，酒中乙醇濃度不超過15%。其主要原因是當(dāng)發(fā)酵液中的乙醇濃度接近15%時(shí)，_____(A.乙醇氧化逐漸增強(qiáng)直至平衡　B.葡萄糖分解逐漸增強(qiáng)直至平衡　C.乙醇氧化逐漸減弱直至停止　D.葡萄糖分解逐漸減弱直至停止)。 (3)已知葡萄糖與蒽酮試劑反應(yīng)能產(chǎn)生顏色。采用光電比色法測定紅曲酒中的葡萄糖含量的步驟如下：第一步，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。用蒸餾水配制__________________，與蒽酮試劑反應(yīng)后，用比色計(jì)測定，并制作以__________________的標(biāo)準(zhǔn)曲線。第二步，樣品處理。將待測酒樣品通過活性炭脫色，其目的是____________________________________________________。第三步，樣品測定與計(jì)算。 (4)影響紅曲酒風(fēng)味的主要因素，除了溫度、pH、氧氣等環(huán)境因素外，還有___________(答出2點(diǎn)即可)。 (5)在紅曲醋生產(chǎn)工藝中，將適量的紅曲酒、水和醋化醋桿菌等混合，再添加一定量谷殼糠等制成松散的發(fā)酵料，其主要目的是__________________________，以利于醋酸發(fā)酵。 答案　(1)單菌落　(2)D　(3)一系列濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液　葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，以光密度值為縱坐標(biāo)　排除酒原有顏色的干擾　(4)不同的菌株、不同的原料　(5)增加通氣性 解析　(1)在適當(dāng)?shù)南♂尪认?，可培養(yǎng)得到相互分開的菌落，即單菌落。(2)乙醇濃度接近15%時(shí)，抑制了酵母菌的活性，可推知葡萄糖的分解會(huì)逐漸減弱直至停止。(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：用蒸餾水配制不同濃度葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，與蒽酮試劑反應(yīng)后，用比色計(jì)測定，并制作以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，以光密度值為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品處理：因?yàn)橐帽壬瓬y光密度值，所以將待測酒樣品通過活性炭脫色，其目的是防止酒樣的顏色影響比色。(4)釀酒過程中，除了溫度、pH、氧氣等環(huán)境因素外，還有釀酒原料、菌種活性、糖含量、雜菌污染、次級(jí)代謝產(chǎn)物等都會(huì)影響酒的風(fēng)味。(5)釀酒過程中，添加一定量谷殼糠等制成松散的發(fā)酵料，可在發(fā)酵過程中為醋化醋桿菌積存氧氣，松散有利于空氣流通。 2.(2017浙江4月選考) 回答與泡菜腌制和亞硝酸鹽測定有關(guān)的問題： (1)制作泡菜時(shí)，為縮短發(fā)酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取適量酸奶，用無菌蒸餾水稀釋后，再用________蘸取少量的稀釋液，在MRS乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線，以獲得乳酸菌單菌落。下圖所示的劃線分離操作，正確的是________。 (2)泡菜腌制過程中，會(huì)產(chǎn)生有機(jī)酸、醇類和亞硝酸鹽，其中醇類是由________進(jìn)行厭氧呼吸產(chǎn)生。亞硝酸鹽對(duì)人體有害，為測定泡菜中亞硝酸鹽的含量，從泡菜中提取亞硝酸鹽，與____________________發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物。然后用光程1cm的________，在550nm光波下測定光密度值，與由已知濃度梯度亞硝酸鈉制作的________比對(duì)，計(jì)算樣品中亞硝酸鹽的含量。 (3)已知乳酸菌中的亞硝酸還原酶能降解亞硝酸鹽。在一定的腌制時(shí)間內(nèi)，隨著腌制時(shí)間的延長，泡菜中亞硝酸鹽含量逐漸降低，是由于在厭氧和________環(huán)境下亞硝酸鹽被亞硝酸還原酶降解。 答案　(1)接種環(huán)　B (2)假絲酵母　對(duì)氨基苯磺酸　比色杯　標(biāo)準(zhǔn)曲線 (3)酸性 解析　(1)劃線分離法需要專用的接種環(huán)蘸取少量的稀釋液接種，要獲得乳酸菌單菌落，劃線操作時(shí)要進(jìn)行數(shù)次劃線操作，每次操作劃線都要上一次的尾與下一次的頭相連。 (2)乳酸菌將糖轉(zhuǎn)化為乳酸，假絲酵母將糖轉(zhuǎn)化為醇類物質(zhì)；亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物?？捎霉怆姳壬ㄟM(jìn)行比對(duì)。 (3)在厭氧和酸性環(huán)境下亞硝酸鹽被亞硝酸還原酶降解。 3.(2018杭州選考模擬)某研究小組以紫葡萄為原料制作葡萄酒的基本流程和裝置示意圖如下。 　 請(qǐng)回答下列問題： (1)制作葡萄漿前，對(duì)葡萄進(jìn)行清洗和利用________色的高錳酸鉀溶液浸泡。制作酵母懸液時(shí)，在干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖，待酵母懸液中出現(xiàn)__________即可。 (2)裝瓶后開始的一段時(shí)間，發(fā)酵瓶中溶解氧的含量變化是________。發(fā)酵過程中，發(fā)酵瓶中酒精的含量變化是________。 (3)下列關(guān)于裝置中有水彎管作用的敘述，錯(cuò)誤的是________。 A.隔絕氣體出入 B.使發(fā)酵瓶內(nèi)外的壓強(qiáng)基本平衡 C.減少雜菌污染 D.有利于發(fā)酵瓶內(nèi)形成缺氧環(huán)境 (4)實(shí)驗(yàn)中，判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是________。 A.發(fā)酵瓶中pH開始下降 B.發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡 C.發(fā)酵瓶中酒精濃度達(dá)到30% D.發(fā)酵瓶中酵母菌數(shù)量急劇減少 (5)欲利用葡萄酒制作果醋，發(fā)酵瓶中應(yīng)加入的菌種是__________，該菌種在_________條件下能將乙醇氧化為醋酸。 答案　(1)鮮紅紫　氣泡　(2)減少　增加　(3)A　(4)B　(5)醋化醋桿菌　有氧 解析　(1)制作酵母菌懸液時(shí)，在干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖，若懸液中出現(xiàn)氣泡，說明酵母菌已經(jīng)活化。(2)裝瓶后開始的一段時(shí)間，酵母菌進(jìn)行需氧呼吸，瓶內(nèi)的溶氧量減少。隨酵母菌無氧發(fā)酵時(shí)間的延長，發(fā)酵瓶中酒精含量增加。(3)裝置中有水彎管可維持發(fā)酵瓶內(nèi)的無氧環(huán)境，防止空氣中的雜菌污染發(fā)酵液，同時(shí)也可將發(fā)酵產(chǎn)生的氣體排到瓶外，維持瓶內(nèi)外壓強(qiáng)基本平衡，故A錯(cuò)誤。(4)酵母菌進(jìn)行無氧發(fā)酵有CO2產(chǎn)生，故判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是發(fā)酵瓶中不再有氣泡產(chǎn)生。(5)醋化醋桿菌在有氧條件下可以將乙醇氧化為醋酸。 4.(2015浙江10月選考)科研人員擬將已知的花色基因(目的基因)轉(zhuǎn)入矮牽牛的核基因組中，培育新花色的矮牽牛。請(qǐng)回答： (1)為了獲得大量的目的基因，將其與含有抗生素抗性基因的質(zhì)粒DNA形成重組DNA，再與經(jīng)________(A.氯化鈣　B.氯化鈉　C.蔗糖　D.葡萄糖)處理的大腸桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入大腸桿菌。用______的玻璃刮刀將稀釋后的大腸桿菌液______接種到含有抗生素的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)形成________，再進(jìn)行鑒定和擴(kuò)大培養(yǎng)。 (2)從擴(kuò)大培養(yǎng)的大腸桿菌中提取含有目的基因的DNA，用__________分別切割含目的基因的DNA和農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，然后用DNA連接酶連接，形成重組DNA并導(dǎo)入農(nóng)桿菌。 (3)取田間矮牽牛的幼嫩葉片，經(jīng)自來水沖洗，先用70%_____浸泡，再用5%次氯酸鈉浸泡，最后用__________清洗，作為轉(zhuǎn)基因的受體材料。 (4)將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片，在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶液中浸泡后，取出并轉(zhuǎn)移至加有適當(dāng)配比生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基(含蔗糖、瓊脂和抗生素，下同)上，使葉小片先脫分化形成_______。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成芽，芽切割后轉(zhuǎn)移至________(A.LB培養(yǎng)基　B.MS培養(yǎng)基＋適宜濃度NAA　C.MS培養(yǎng)基＋適宜濃度BA　D.NAA/BA小于1的MS培養(yǎng)基)上生根，形成完整植株。 (5)取出試管苗，在適宜的光照、溫度和80%以上的____等條件下進(jìn)行煉苗。提取葉片組織的DNA，采用PCR技術(shù)______目的基因，鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入。 (6)為判斷本研究是否達(dá)到預(yù)期目的，可比較轉(zhuǎn)基因植株和非轉(zhuǎn)基因植株的______性狀。 答案　(1)A　滅菌　涂布　菌落　(2)限制性核酸內(nèi)切酶　(3)乙醇　無菌水　(4)愈傷組織　B　(5)濕度　擴(kuò)增　(6)花色 解析　(1)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞需要利用鈣離子處理使受體細(xì)胞變成感受態(tài)細(xì)胞。因此為了獲得大量的目的基因，將其與含有抗生素抗性基因的質(zhì)粒DNA形成重組DNA，再與經(jīng)氯化鈣處理的大腸桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入大腸桿菌。用滅菌的玻璃刮刀將稀釋后的大腸桿菌液涂布接種到含有抗生素的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)形成菌落，再進(jìn)行鑒定和擴(kuò)大培養(yǎng)。 (2)基因工程的工具酶包括限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。 (3)取田間矮牽牛的幼嫩葉片，經(jīng)自來水沖洗，先用70%乙醇浸泡，再用5%次氯酸鈉浸泡，最后用無菌水清洗，作為轉(zhuǎn)基因的受體材料。 (4)將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片，在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶液中浸泡后，取出并轉(zhuǎn)移至加有適當(dāng)配比生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基上，使葉小片先脫分化形成愈傷組織。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成芽，芽切割后轉(zhuǎn)移至MS培養(yǎng)基＋適宜濃度NAA上生根，形成完整植株。 (5)取出試管苗，在適宜的光照、溫度和80%以上的濕度等條件下進(jìn)行煉苗。提取葉片組織的DNA，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入。 (6)為判斷本研究是否達(dá)到預(yù)期目的，可比較轉(zhuǎn)基因植株和非轉(zhuǎn)基因植株的花色性狀。 課時(shí)作業(yè) 一、選擇題 1.某同學(xué)設(shè)計(jì)了如圖所示的發(fā)酵裝置來制作果酒、果醋，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.甲用來制作果酒，乙用來制作果醋 B.乙裝置需要的溫度條件高于甲 C.該裝置便于發(fā)酵中產(chǎn)生氣體的排出 D.甲、乙裝置中排液管排出液體的pH都下降 答案　C 解析　甲裝置密閉，可用來進(jìn)行酵母菌的發(fā)酵制作果酒，酒精進(jìn)入乙裝置中，在有氧條件下，可用來制作果醋，A項(xiàng)正確；酵母菌的發(fā)酵溫度一般為25～30℃，而醋化醋桿菌的最適生長溫度為30～35℃，B項(xiàng)正確；甲到乙、乙到丙流入的都是發(fā)酵液，甲裝置中沒有氣體的排出口，該裝置不便于發(fā)酵中產(chǎn)生氣體的排出，C項(xiàng)錯(cuò)誤；甲裝置中產(chǎn)生酒精和CO2，導(dǎo)致排出液體的pH下降；乙裝置將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿幔瑢?dǎo)致排出液體的pH也下降，D項(xiàng)正確。 2.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中植物激素使用的說法，不正確的是(　　) A.植物組織培養(yǎng)中的關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素 B.先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂和分化 C.先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化 D.同時(shí)使用生長素和細(xì)胞分裂素時(shí)，兩者摩爾濃度的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向 答案　B 解析　用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除營養(yǎng)成分外，還需添加植物激素，一般包括生長素和細(xì)胞分裂素；外植體脫分化、再分化的誘導(dǎo)方向取決于二者的比例。先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化。 3.下圖為某同學(xué)設(shè)計(jì)的釀制蘋果醋的基本流程圖和發(fā)酵裝置示意圖。下列相關(guān)分析正確的是(　　) A.①過程要先切塊后清洗，以減少雜菌的污染 B.②過程加入果膠酶可以提高蘋果的出汁率 C.③過程發(fā)酵所用酵母菌無具膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器 D.④過程需要將發(fā)酵裝置中的充氣口開關(guān)關(guān)閉 答案　B 解析?、龠^程要先清洗后切塊，以減少雜菌的污染，A項(xiàng)錯(cuò)誤；植物細(xì)胞有細(xì)胞壁的保護(hù)，破壞細(xì)胞壁需要纖維素酶和果膠酶，B項(xiàng)正確；酵母菌是真核生物，含有具膜細(xì)胞器，如線粒體等，C項(xiàng)錯(cuò)誤；醋化醋桿菌是好氧菌，因此發(fā)酵裝置中的充氣口開關(guān)應(yīng)開啟，D項(xiàng)錯(cuò)誤。 4.某愈傷組織在如圖甲所示的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后得到如圖乙所示的結(jié)構(gòu)。經(jīng)分析可知該培養(yǎng)基中(　　) A.細(xì)胞分裂素多，生長素少 B.細(xì)胞分裂素少，生長素多 C.細(xì)胞分裂素和生長素的用量相等 D.只有細(xì)胞分裂素 答案　B 解析　從圖乙中可以看出，該培養(yǎng)基有利于生根且抑制芽的形成，所以可推斷該培養(yǎng)基中生長素多，細(xì)胞分裂素少。 二、非選擇題 5.(2019麗水質(zhì)檢)下圖是某興趣小組以鮮藍(lán)莓汁為原料，制作果酒和果醋的過程簡圖。 請(qǐng)回答： (1)為了提高出汁率和澄清率，可在果汁加工過程中加入_______酶。該酶可以利用_______等微生物生產(chǎn)。 (2)甲過程開始時(shí)，微生物的________會(huì)使發(fā)酵瓶內(nèi)出現(xiàn)負(fù)壓。若3天后還看不到________，必須加入更多的酵母，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。 (3)乙過程如能獲得醋化醋桿菌的菌種，可先在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)繁殖。用300mL的錐形瓶在________上振蕩培養(yǎng)48小時(shí)后，再接種到發(fā)酵瓶中。為縮短制作果醋的周期，下列措施中不可取的是________(A.用果酒為原料　B.增加醋化醋桿菌的數(shù)量　C.控制適宜的發(fā)酵溫度　D.發(fā)酵階段封閉充氣口)。每天檢測流出液，等到流出液的______不再減少，停止實(shí)驗(yàn)。 答案　(1)果膠　黑曲霉、蘋果青霉　(2)需氧呼吸　氣泡產(chǎn)生　(3)搖床　D　pH 解析　(1)果汁加工過程中可加入果膠酶，果膠酶能使植物細(xì)胞的果膠水解，從而提高出汁率和澄清度。(2)發(fā)酵開始時(shí)，微生物的需氧呼吸會(huì)使發(fā)酵瓶內(nèi)出現(xiàn)負(fù)壓，這種情況不能持續(xù)3天以上，若3天后還看不到氣泡冒出，必須加入更多的酵母，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。(3)用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)醋化醋桿菌的菌種時(shí)，需將錐形瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)。為加快果醋的制作，可以以果酒為原料，增加醋化醋桿菌的數(shù)量，控制適宜的發(fā)酵溫度等，但發(fā)酵階段需要氧氣，故不能封閉充氣口。每天檢測流出液，等到流出液的pH不再減少，停止實(shí)驗(yàn)。 6.(2018溫州聯(lián)考)請(qǐng)分析回答關(guān)于葡萄酒生產(chǎn)和檢測方面的問題： (1)各大酒莊釀制葡萄酒時(shí)，為保持各產(chǎn)區(qū)葡萄酒的特有口感，發(fā)酵菌種主要來自附著在葡萄皮上的________________。該菌種在學(xué)生實(shí)驗(yàn)中也被頻繁使用。實(shí)驗(yàn)室在保存該菌種時(shí)，通常將該菌種接種到________培養(yǎng)基上，再放入冰箱中冷藏。 (2)某實(shí)驗(yàn)小組釀制的葡萄酒有一股酸味，從發(fā)酵條件分析，可能原因是____________導(dǎo)致醋酸菌大量生長產(chǎn)生醋酸，其反應(yīng)式為__________________________________________。 (3)該實(shí)驗(yàn)小組為研究過濾、沉淀后葡萄酒中的活菌數(shù)，檢測流程如下圖所示： 取樣→稀釋→接種→培養(yǎng)→計(jì)數(shù)→統(tǒng)計(jì)→報(bào)告 ①檢測過程中，應(yīng)將不同稀釋度的樣液用____________法分別接種于若干組平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)24～48小時(shí)，出現(xiàn)________后計(jì)數(shù)。 ②下列關(guān)于檢測流程的敘述中，正確的是________。 A.配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)在調(diào)節(jié)酸堿度以前滅菌 B.為防止外來微生物污染，應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置在超凈臺(tái)上培養(yǎng) C.根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果，只需統(tǒng)計(jì)適宜稀釋度樣液組的菌落數(shù) D.理論上，統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果會(huì)略高于實(shí)際活菌數(shù) 答案　(1)(野生)酵母菌　斜面　(2)有氧條件(或有氧環(huán)境)　C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O　(3)①涂布分離　(單)菌落?、贑 解析　(1)為保持各產(chǎn)區(qū)葡萄酒的特有口感，可利用附著在葡萄皮上的(野生)酵母菌作為菌種進(jìn)行發(fā)酵；要保存菌種，可先將要保存的菌種接種到斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當(dāng)菌落長成后，將試管放入4℃的冰箱中冷藏保存。 (2)某實(shí)驗(yàn)小組釀制的葡萄酒有一股酸味，從發(fā)酵條件分析，可能原因是有氧條件導(dǎo)致醋酸菌大量生長產(chǎn)生醋酸。其反應(yīng)式為C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O。 (3)①常用涂布分離法來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。在檢測過程中，應(yīng)將不同稀釋度的樣液用涂布分離法分別接種于若干組平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)24～48小時(shí)出現(xiàn)(單)菌落后計(jì)數(shù)。 ②配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)在調(diào)節(jié)酸堿度以后滅菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤；倒置培養(yǎng)一方面可防止凝結(jié)在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面而染菌，另一方面有利于菌種利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，加快生長速度，但不是將培養(yǎng)皿直接倒置在超凈臺(tái)上，B項(xiàng)錯(cuò)誤；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約有多少個(gè)活菌，因此，根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)適宜稀釋度樣液組的菌落數(shù)即可，C項(xiàng)正確；當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此理論上，統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目低，D項(xiàng)錯(cuò)誤。 7.(2018杭州一模)不同濃度還原型谷胱甘肽(GSH)處理對(duì)甘藍(lán)泡菜中硝酸還原酶(NR)活性和亞硝酸鹽含量的影響如圖所示。 請(qǐng)回答： (1)甘藍(lán)泡菜的腌制和樣品處理：腌制甘藍(lán)泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，其目的是__________。甘藍(lán)樣品處理過程中，加硫酸鋅產(chǎn)生沉淀后，水浴加熱的目的是______________________。然后冷卻至室溫，用濾紙過濾，用水淋洗2～3次，將_____________在容量瓶中定容。 (2)測定亞硝酸鹽含量：取10mL樣品溶液，進(jìn)行顯色處理。用光程為1cm的_________在550nm處測定光密度值。 (3)甘藍(lán)泡菜發(fā)酵過程中NR活性和亞硝酸鹽含量均呈________________的趨勢。添加不同濃度的GSH處理均可________NR活性和亞硝酸鹽含量的峰值。當(dāng)添加GSH的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低時(shí)，NR活性和亞硝酸鹽含量隨著GSH濃度的增大而________。 答案　(1)殺滅雜菌、去除氧氣　進(jìn)一步讓蛋白質(zhì)沉淀　濾液和洗滌液　(2)比色杯　(3)先上升后下降　降低　降低 解析　(1)腌制甘藍(lán)泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，從而殺滅雜菌、去除氧氣。甘藍(lán)樣品處理過程中，加硫酸鋅產(chǎn)生沉淀后，水浴加熱進(jìn)一步讓蛋白質(zhì)沉淀。然后冷卻至室溫，用濾紙過濾，用水淋洗2～3次，將濾液和洗滌液在容量瓶中定容。(2)測定亞硝酸鹽含量：取10mL樣品溶液，進(jìn)行顯色處理。用光程為1cm的比色杯在550nm處測定光密度值。(3)甘藍(lán)泡菜發(fā)酵過程中NR活性和亞硝酸鹽含量均呈先上升后下降的趨勢。添加不同濃度的GSH處理均可降低NR活性和亞硝酸鹽含量的峰值。當(dāng)添加GSH的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低時(shí)，NR活性和亞硝酸鹽含量隨著GSH濃度的增大而降低。 8.(2018嘉興3月選考模擬)桑葚是一種很好的食用水果，也常用來制成果汁或釀成果酒，大致流程如下圖。請(qǐng)回答： (1)在制作果汁時(shí)，為了增加出汁率和澄清度(用果汁透光率表示)，常加入果膠酶。加酶后的某研究結(jié)果如下表。 果膠酶劑量與果汁中果膠含量、透光率的關(guān)系 酶劑量(mL/L) 0.05 0.08 0.10 0.13 0.15 0.17 0.19 0.21 0.23 0.25 果膠含量程度 ＋＋ ＋＋ ＋ ＋ － － － － － － 透光率(%) 80 84 88 92 95 95 95 95 92 87 注：果膠含量程度“＋”表示果膠陽性反應(yīng)　“－”表示果膠陰性反應(yīng)。 果汁中果膠的含量可用加入乙醇的方法進(jìn)行檢測，其原理是__________________，表中果膠陽性反應(yīng)的現(xiàn)象是________________。在生產(chǎn)應(yīng)用中，考慮到生產(chǎn)成本因素，建議果膠酶的使用劑量為________ mL/L。當(dāng)果膠酶劑量超過0.21 mL/L時(shí)，透光率反而下降，這時(shí)使果汁變渾濁的物質(zhì)是________。 (2)釀酒時(shí)可用如圖所示發(fā)酵瓶，原料裝瓶后加入適量的蔗糖并接種，然后在適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵。 ①當(dāng)發(fā)酵瓶中________________，即表示發(fā)酵完畢。 ②請(qǐng)?jiān)谙铝凶鴺?biāo)中，畫出瓶內(nèi)發(fā)酵過程中菌種數(shù)量的變化曲線。 (3)下列關(guān)于果酒發(fā)酵瓶及發(fā)酵過程的敘述中，正確的是________。 A.①處應(yīng)該有水，有利于阻止內(nèi)外氣體的出入 B.②處應(yīng)該伸入發(fā)酵瓶液面以下，有利于形成缺氧條件 C.③處果汁裝瓶容量不超過2/3，以免發(fā)酵過程中液體沖出 D.不同溫度下完成發(fā)酵的時(shí)間不同，而最終果酒的風(fēng)味相同 答案　(1)果膠不溶于乙醇　出現(xiàn)絮狀物　0.15　果膠酶 (2)①停止出現(xiàn)氣泡?、谌鐖D所示 (3)C 解析　(1)果膠不溶于乙醇，可用于檢測果膠，陽性現(xiàn)象是出現(xiàn)絮狀沉淀。根據(jù)表中數(shù)據(jù)，考慮到生產(chǎn)成本，果膠酶使用量為0.15 mL/L較佳。果膠酶過多，會(huì)使果汁變渾濁。(2)果酒發(fā)酵中，當(dāng)發(fā)酵瓶停止出現(xiàn)氣泡，表示發(fā)酵完畢。發(fā)酵過程中酵母菌數(shù)量先增多后減少。(3)①處水可以阻止氧氣進(jìn)入，但不影響二氧化碳的排出，A錯(cuò)誤；②處不能伸入液面以下，B錯(cuò)誤；果汁裝瓶容量不超過2/3，以免發(fā)酵過程中液體沖出，C正確；不同溫度下發(fā)酵的果酒風(fēng)味會(huì)有差異，D錯(cuò)誤。 9.(2018溫州3月選考模擬)菊花組織培養(yǎng)的部分過程如下圖。請(qǐng)回答： (1)過程①利用________(填“較高”或“較低”)滲透壓，使原生質(zhì)體產(chǎn)量大幅提高，但存活率卻因此而降低，分析降低的原因可能是________________。過程②細(xì)胞壁形成后，可逐漸________滲透壓。 (2)幼苗莖段帶葉，就會(huì)帶有________，也就有了分生組織，所以不通過________階段就可直接形成叢狀苗。過程③應(yīng)在________(從具體功能角度)培養(yǎng)基中進(jìn)行，全過程對(duì)光照的要求是________(A.早期每天24h光照，后期每天24h黑暗　B.每天一定時(shí)長的光照　C.早期每天24h黑暗，后期每天24h光照　D.每天24h黑暗)。 答案　(1)較高　過度失水死亡　降低　(2)腋芽(或芽)　愈傷組織(或脫分化)　發(fā)芽　B 解析　(1)過程①獲得原生質(zhì)體需要在較高滲透壓甘露醇中進(jìn)行；若原生質(zhì)體存活率低，可能是過度失水損傷或死亡。過程②在形成細(xì)胞壁后，可逐漸降低滲透壓。(2)幼苗莖段帶葉，就會(huì)帶有腋芽，也就有了分生組織，所以不通過脫分化階段就可直接形成叢狀苗。過程③應(yīng)在發(fā)芽培養(yǎng)基中進(jìn)行，全過程需要每天一定時(shí)長的光照。 10.(2018溫州選考模擬)鐵皮石斛是一種名貴的中藥材，有生津養(yǎng)胃、降血糖和增強(qiáng)免疫力等作用，有效成分為石斛多糖、石斛堿等，溫州雁蕩山素有“中國鐵皮石斛之鄉(xiāng)”的美譽(yù)。請(qǐng)回答下列問題： (1)用優(yōu)良品種自然生長的莖快速繁殖鐵皮石斛時(shí)，給莖消毒時(shí)無需使用的是________(A.乙醇　B.無菌水　C.甘露醇　D.次氯酸鈉)。在細(xì)胞分裂素相對(duì)較多和生長素相對(duì)較少的培養(yǎng)基中培養(yǎng)莖的切段，待長出較多的_______，將其進(jìn)行_______(處理)后再轉(zhuǎn)入_______培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，直至長成幼苗。這種通過組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖植物的方法，也稱為_______。 (2)研究發(fā)現(xiàn)，鐵皮石斛的生長發(fā)育與其體內(nèi)的內(nèi)生菌密切相關(guān)。為進(jìn)一步研究內(nèi)生菌的作用，需要大量內(nèi)生菌進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。分離內(nèi)生菌時(shí)最好采用______________(A.G6玻璃砂漏斗過濾法　B.血細(xì)胞計(jì)數(shù)法　C.劃線分離法　D.涂布分離法)，再將純化的內(nèi)生菌轉(zhuǎn)移到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行__________。 (3)研究發(fā)現(xiàn)，200mg/L濃度的卡那霉素能有效抑制鐵皮石斛細(xì)胞的增殖與分化?？茖W(xué)家欲利用卡那霉素，采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法對(duì)現(xiàn)有鐵皮石斛品種進(jìn)行基因改良。在基因工程操作中，導(dǎo)入受體細(xì)胞的_________________分子應(yīng)同時(shí)帶有目的基因和_____________________基因，這樣才能利用含有卡那霉素的培養(yǎng)基將成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞篩選出來。 (4)鑒定鐵皮石斛的品質(zhì)，可通過苯酚—濃硫酸法測定石斛多糖的含量。其原理是：石斛多糖水解成單糖并脫水生成糖醛衍生物后，與苯酚縮合生成橙黃色化合物，在490nm處測定光密度值，以不同濃度的葡萄糖溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，便可知道樣品的石斛多糖含量。這種方法類似于泡菜汁中________________含量的測定，稱之為________________法。 (5)為高效提取石斛多糖，可在提取液中加入________________________________________，以提高鐵皮石斛的出汁率。 答案　(1)C　叢狀苗　分株(或分株培養(yǎng))　生根　植物克隆　(2)D　擴(kuò)大培養(yǎng)　(3)重組DNA(或重組質(zhì)粒)　卡那霉素抗性(或抗卡那霉素)　(4)亞硝酸鹽　光電比色　(5)果膠酶(或果膠酶和果膠甲酯酶) 解析　(1)植物組織培養(yǎng)需要使用乙醇、次氯酸鈉和無菌水。細(xì)胞分裂素比例偏高，有利于生芽，將其分株后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中。這種快速繁殖植物的方法，稱為植物克隆。(3)重組DNA分子應(yīng)具有目的基因和標(biāo)記基因，標(biāo)記基因據(jù)題意是卡那霉素抗性基因。