三年高考2016-2018高考生物試題分項版解析專題15生物技術(shù)實踐含解析.doc
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專題15 生物技術(shù)實踐 1.(2018北京卷,4)以下高中生物學實驗中,操作不正確的是 A.在制作果酒的實驗中,將葡萄汁液裝滿整個發(fā)酵裝置 B.鑒定DNA時,將粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進行沸水浴 C.用蘇丹Ⅲ染液染色,觀察花生子葉細胞中的脂肪滴(顆粒) D.用龍膽紫染液染色,觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞中的染色體 【答案】A 【解析】在制作果酒的實驗中,葡萄汁液不能裝滿發(fā)酵裝置,要留出1/3的空間,A錯誤;在DNA鑒定實驗中,DNA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍色,B正確;用蘇丹Ⅲ染液可以把花生子葉細胞中的脂肪顆粒染成橘黃色,C正確;用龍膽紫染液能將細胞中的染色體染成深紫色,在洋蔥根尖分生區(qū)細胞中能清晰地觀察到,D正確。 2.(2018江蘇卷,8)花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖,下列敘述正確的是 A.為了防止微生物污染,過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30min B.過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細胞分裂素以利于根的分化 C.過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體 D.過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上 【答案】C 3.(2018江蘇卷,14)下列關(guān)于酵母細胞固定化實驗的敘述,正確的是 A.用溫水使海藻酸鈉迅速溶解,待其冷卻到室溫后用于包埋細胞 B.進行包埋時,用于懸浮細胞的CaCl2溶液濃度要適宜 C.注射器(或滴管)出口應(yīng)盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀 D.包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并具有一定的彈性 【答案】D 【解析】在酵母細胞固定化實驗中,應(yīng)該用小火、間斷加熱的方式使海藻酸鈉緩慢溶解,A錯誤;將混合液用注射器緩慢滴加到CaCl2溶液進行固定化酵母細胞,CaCl2的作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠,B錯誤;注射器(或滴管)出口應(yīng)與液面保持適當?shù)木嚯x,以保證凝膠珠成為球狀,C錯誤;包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并具有一定的彈性,D正確。 4.(2018江蘇卷,16)某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究,下列敘述錯誤的是 A.夏季生產(chǎn)果酒時,常需對罐體進行降溫處理 B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣的進氣量不宜太大 C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓 D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵 【答案】B 5.(2018江蘇卷,17)關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實驗,下列敘述正確的是 A.在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑,溫水浴后液體由藍色變成磚紅色 B.在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑,液體由藍色變成紫色 C.提取DNA時,在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽,充分研磨,過濾并棄去濾液 D.將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺試劑,沸水浴后液體由無色變成藍色 【答案】D 【解析】甘蔗莖的組織樣液富含蔗糖,而蔗糖屬于非還原糖,且不能用斐林試劑檢測,A錯誤;大豆種子中富含蛋白質(zhì),先后加入雙縮脲試劑A液和B液搖勻后,液體由藍色變?yōu)樽仙?,B錯誤;提取DNA時,在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽,充分研磨,過濾并棄去濾紙上的粘稠物,留下濾液,C錯誤;將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺試劑并水浴加熱,溶液由無色變?yōu)樗{色,D正確。 6.(2018江蘇卷,21)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述,錯誤的是 A.洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來 B.洗衣粉中的蛋白酶通常會將添加的其他酶迅速分解 C.在50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時,其中的酶會迅速失活 D.加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存,不會影響其中酶的活性 【答案】BCD 【解析】加酶洗衣粉中加入的酶多是微生物發(fā)酵產(chǎn)生的,其本質(zhì)與生物體內(nèi)的酶無明顯差異,A正確;洗衣粉中的蛋白酶通常不會將添加的其他酶迅速分解,這是因為加酶洗衣粉中的酶經(jīng)過了特殊的化學物質(zhì)的包裹,使之與其他成分隔離,這些酶在遇水后,包裹層分解,酶才能發(fā)揮作用,B錯誤;加酶洗衣粉的pH值一般不大于10,在水溫45~60℃時,能充分發(fā)揮洗滌作用,因此在50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時,其中的酶不會失活,C錯誤;加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存,會導致其中酶的活性降低,D錯誤。 7.(2017?江蘇卷.10)下列關(guān)于“腐乳的制作”的實驗,敘述正確的是 A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味 B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D.成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細菌產(chǎn)生 【答案】B 【解析】溫度通過影響酶的活性影響腐乳發(fā)酵,控制發(fā)酵的溫度主要有利于毛霉等微生物的生長和腐乳發(fā)酵,A錯誤;香辛料和料酒都能抑制微生物的生長,具有防腐作用,B正確;毛霉的主要作用是產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶,將蛋白質(zhì)和脂肪分解成小分子化合物,C錯誤;成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的,毛霉屬于真菌,D錯誤。 8.(2017?江蘇卷.12)固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工,可消除其中的苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是 A.在單寧酶純化時可采用透析法去除雜蛋白 B.化學結(jié)合法比吸附法對單寧酶活性影響更小 C.溫度、pH 和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性 D.酶的高效性決定固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分 【答案】C 9.(2017?江蘇卷.17)為了探究一種新型堿性纖維素酶的去污效能,研究性學習小組進行了相關(guān)實驗,結(jié)果如下圖。由圖中實驗結(jié)果能直接得出的結(jié)論是 A.堿性纖維素酶對污布類型2的去污力最強 B.不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力 C.堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同 D.加大酶用量可以顯著提高洗衣粉的去污力 【答案】C 【解析】20 U/L的堿性纖維素酶處理對污布類型1,去污力為60%,30 U/L的堿性纖維素酶處理污布類型2,去污力約為80%,則單位堿性纖維素酶對污布類型1去污力最強,A錯誤;由于污布類型不同,不能探究不同類型的洗衣粉對堿性蛋白酶的去污力的影響,B錯誤;對污布類型2、3而言,都是Y型洗衣粉,30%的酶用量,但去污力不同,說明堿性纖維素酶對污布類型2、3 的去污力不同,C正確;該實驗沒有針對同一類型的洗衣粉加大酶用量的探究,則不能判斷加大酶用量是否提高洗衣粉的去污力,D錯誤。 10.(2017?江蘇卷.20)下列關(guān)于“酵母細胞的固定化技術(shù)”實驗的敘述,正確的是 A.活化酵母時,將適量干酵母與蒸餾水混合并攪拌成糊狀 B.配制CaCl2 溶液時,需要邊小火加熱邊攪拌 C.將海藻酸鈉溶液滴加到CaCl2 溶液時,凝膠珠成形后應(yīng)即刻取出 D.海藻酸鈉溶液濃度過高時凝膠珠呈白色,過低時凝膠珠易呈蝌蚪狀 【答案】A 【解析】活化酵母時,將適量干酵母與蒸餾水混合,并攪拌成糊狀,A正確;配制CaCl2溶液時,不需進行加熱,B錯誤;CaCl2溶液使酵母細胞可以形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),固定在凝膠珠中,需要一段時間,時間不宜過短或過長,C錯誤;海藻酸鈉溶液濃度過低時凝膠珠呈白色,過高時凝膠珠易呈蝌蚪狀,D錯誤。 11.(2017?江蘇卷.25)下圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是 A.改變通入氣體種類,可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響 B.果酒發(fā)酵中期通入氮氣,酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸 C.果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度密切相關(guān) D.氣體入口與氣體出口可以交換使用 【答案】ABC 12.(2016江蘇卷.7)下列關(guān)于中學“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是 A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分,利于毛霉生長 B.加料酒主要是為了滅菌,避免腐乳變質(zhì) C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌 D.實驗室制作的腐乳不宜直接食用 【答案】D 【解析】加鹽主要是為了抑制微生物生長,防止豆腐腐敗變質(zhì),A錯誤;加料酒主要為了使腐乳具有獨特的香味,B錯誤;發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉,C錯誤;實驗室制作的腐乳可能滅菌不徹底,不宜直接食用,D正確。 13.(2016江蘇卷.10)定量分析是科學研究的重要方法。下列能用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)的是 A.海拉細胞懸液 B.濃縮培養(yǎng)的噬菌體 C.自來水中大腸桿菌 D.蛙卵 【答案】A 14.(2016江蘇卷.21)(多選)為了使牛仔褲呈現(xiàn)“穿舊”效果,在工業(yè)洗衣機中用酶洗代替?zhèn)鹘y(tǒng)的浮石擦洗,是目前重要的生產(chǎn)手段(工藝流程見下圖)。下列敘述中錯誤的是 牛仔布仿舊的部分 布中深藍 色紗線 布中白 色紗線 藍色變淡 分離的染料 纖維素酶 淺藍色 背景 穿舊效果 適當水解 再染色 A.纖維素酶在仿舊中的作用機理與其在洗衣粉中去污的機理相似 B.在上述工藝中,為重復(fù)使用纖維素酶,可選用適當?shù)陌駝┕潭ɑ? C.在上述工藝中,通過調(diào)節(jié)溫度、酸堿度、處理時間可控制仿舊顏色的深淺 D.纖維素酶催化葡萄糖殘基間磷酸二酯鍵的水解分解纖維素 【答案】BD 15.(2016江蘇卷.25)(多選)漆酶屬于木質(zhì)降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程,相關(guān)敘述正確的是 A. 生活污水中含有大量微生物,是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 B. 篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C. 在涂布平板上長出的菌落,在通過劃線進一步純化 D. 斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在常溫下長期保存菌株 【答案】BC 【解析】生活污水中含有大量微生物,但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株,A錯誤;篩選生活污水中含有大量微生物,B正確;在涂布平板上長出的菌落,在通過劃線進一步純化,C正確;斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在低溫下長期保存菌株,D錯誤。 16.(2017?海南卷.30)[選修1:生物技術(shù)實踐](15分) 綠藻A是某種單細胞綠藻,能夠合成物質(zhì)W。某小組為探究氮營養(yǎng)缺乏對綠藻A增殖及物質(zhì)W累計的影響,將等量的綠藻A分別接種在氮營養(yǎng)缺乏(實驗組)和氮營養(yǎng)正常(對照組)的兩瓶培養(yǎng)液中,并在適宜溫度和一定光強下培養(yǎng)。定時取樣并檢測細胞濃度和物質(zhì)W的含量,結(jié)果如圖。 (1)從圖甲可知,在氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液的瓶中,綠藻A的種群增長曲線呈___________型。 (2)綜合圖甲和圖乙的信息可知,在生產(chǎn)上,若要用少量的綠藻A獲得盡可能多的物質(zhì)W,可以采取的措 施是________。 (3)若物質(zhì)W是類胡蘿卜素,根據(jù)類胡蘿卜素不易揮發(fā)和易于溶于有機溶劑的特點,應(yīng)選擇的提取方法是_________。用紙層析法可以將類胡蘿卜素與葉綠素分開,紙層析法分離的原理是__________________。 (4)在以上研究的基礎(chǔ)上,某人擬設(shè)計實驗進一步研究氮營養(yǎng)缺乏程度對物質(zhì)W積累的影響,則該實驗的自變量是_____________。 (5)與在光照條件下相比,若要使綠藻A在黑暗條件下增殖,需要為其提供_________________(填“葡萄糖”或“纖維素”)作為營養(yǎng)物質(zhì),原因是___________________。 【答案】(1)S (2)先將少量綠藻放在氮營養(yǎng)正常的培養(yǎng)液培養(yǎng),等到細胞濃度最高時集中收集,再放在氮營養(yǎng)缺乏的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng) (3)萃取 類胡蘿卜素和葉綠素在層析液(有機溶劑)中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上的擴散速度快,反之則慢,從而將它們分離。 (4)培養(yǎng)基中的氮營養(yǎng)濃度 (5)葡萄糖 在黑暗下,綠藻不能進行光合作用合成糖類(有機物),需要吸收葡萄糖為營養(yǎng)物質(zhì),而纖維素不能被綠藻吸收利用。 【解析】(1)圖甲,與對照組比較,在氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液的瓶中,綠藻A的種群增長先增加后平穩(wěn),曲線呈S型。 (3)根據(jù)類胡蘿卜素不易揮發(fā)和易于溶于有機溶劑的特點,應(yīng)選擇的提取方法是萃取。類胡蘿卜素和葉綠素在層析液(有機溶劑)中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上的擴散速度快,反之則慢,從而將它們分離,這是紙層析法分離的原理。 (4)實驗?zāi)康氖茄芯康獱I養(yǎng)缺乏程度對物質(zhì)W積累的影響,故自變量培養(yǎng)基中的氮營養(yǎng)濃度。 (5)綠藻黑暗中不能光合作用合成有機物,需要吸收葡萄糖滿足生命活動的需要,而纖維素不能綠藻利用。 17.(2017?新課標Ⅰ卷.37)[生物——選修1:生物技術(shù)實踐](15分) 某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?;卮鹣铝袉栴}: (1)有些細菌能分解尿素,有些細菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生________________________。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是________________________,但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________(答出兩點即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細菌,在配制培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇____________________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是________________________。 (3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2 HPO4,其作用有________________________(答出兩點即可)。 【答案】(1)脲酶 分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物,不能利用CO2來合成有機物 為細胞生物生命活動提供能量,為其他有機物的合成提供原料 (2)尿素 其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用 (3)為細菌生長提供無機營養(yǎng),作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 (2)篩選分解尿素的細菌,通常只能用尿素作為唯一氮源,對于“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”均含有無機氮源。(3)KH2PO4和Na2 HPO4為微生物提供P元素和無機鹽離子如鉀離子和鈉離子,還可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定。 18.(2017?新課標Ⅱ卷.37)[生物——選修1:生物技術(shù)實踐](15分) 豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素,某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵,并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果。回答下列問題: (1)該實驗的自變量是____________________、__________________________。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是______________________。 (3)如果在實驗后,發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系,則無法確定發(fā)酵的最佳時間;若要確定最佳發(fā)酵時間,還需要做的事情是__________________________。 (4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開_________________________,脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開_________________________。 【答案】(1)菌種 發(fā)酵時間 (2)好氧菌 (3)延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間 (4)氨基酸和肽 脂肪酸和甘油 【解析】(1)該實驗的自變量是菌種、發(fā)酵時間。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是好氧菌。(3)如果在實驗后,發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系,則無法確定發(fā)酵的最佳時間;若要確定最佳發(fā)酵時間,還需要做的事情是延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間。(4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷碗?,脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视汀? 19.(2017?新課標Ⅲ卷.37)[生物——選修1:生物技術(shù)實踐](15分) 綠色植物甲含有物質(zhì)W,該物質(zhì)為無色針狀晶體,易溶于極性有機溶劑,難溶于水,且受熱、受潮易分解。其提取流程為:植物甲→粉碎→加溶劑→振蕩→收集提取液→活性炭處理→過濾去除活性炭→蒸餾(含回收溶劑)→重結(jié)晶→成品?;卮鹣铝袉栴}: (1)在提取物質(zhì)W時,最好應(yīng)選用的一種原料是___________________(填“高溫烘干”“晾干”或“新鮮”)的植物甲,不宜選用其他兩種的原因是___________________________________。 (2)提取物質(zhì)W時,振蕩的作用是______________________。 (3)活性炭具有很強的吸附能力,在提取過程中,用活性炭處理提取液的目的是________________。 (4)現(xiàn)有丙酮(沸點56 ℃)、乙醇(沸點約78 ℃)兩種溶劑,在提取物質(zhì)W時,應(yīng)選用丙酮作為提取劑,理由是__________________________________。 (5)該實驗操作過程中應(yīng)注意的事項是_________________(答出兩點即可)。 【答案】(1)晾干 高溫烘干過程中,植物甲中的物質(zhì)W易被破壞;新鮮的植物甲含水量高,用于提取的極性有機溶劑會被稀釋,進而降低對物質(zhì)W的提取效果 (2)使原料和溶劑充分混勻 (3)去除提取液中的色素 (4)丙酮沸點低于乙醇,蒸餾時物質(zhì)W分解較少 (5)在溫度較低的情況下操作,防火 20.(2016天津卷.10)(12分)天津獨流老醋歷史悠久、獨具風味,其生產(chǎn)工藝流程如下圖。 (1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度,這是因為酶_____________________。 (2)在酒精發(fā)酵階段,需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣,后密閉。通氣能提高____________的數(shù)量,有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。 (3)在醋酸發(fā)酵階段,獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法,發(fā)酵30天。工藝如下。 ①發(fā)酵過程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如右圖。據(jù)圖分析,與顛倒前相比,B層醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是____________________。 ②乳酸含量高是獨流老醋風味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中,發(fā)酵缸中____________層醋醅有利于乳酸菌繁殖,積累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少,主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的變化,加劇了不同種類乳酸菌的____________,淘汰了部分乳酸菌種類。 【答案】(12分) (1)在最適溫度條件下催化能力最強 (2)酵母菌 (3)①先快速增長后趨于穩(wěn)定? 氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、PH ②顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動,或下) ③種間競爭(或競爭) 21.(2016課標1卷.39) [生物——選修1:生物技術(shù)實踐](15分) 空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下: ①配置培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); ②制作無菌平板; ③設(shè)置空白對照組和若干實驗組,進行相關(guān)操作; ④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題: (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于_________________。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是_________________。 (2)步驟③中,實驗組的操作是_________________。 (3)若在某次調(diào)查中,某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_________________現(xiàn)象。若將30(即36-6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法_______________(填“正確”或“不正確”)。 【答案】(1)牛肉膏、蛋白胨 瓊脂 (2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間 (3)污染 不正確 【解析】(1)依據(jù)配制培養(yǎng)基的成分可知:該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于牛肉膏、蛋白胨。因為該實驗是 “用平板收集教室空氣中的微生物”,所使用的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基,配制時,需加入凝固劑,據(jù)此推知:該培養(yǎng)基中的成分X通常是瓊脂。 22.(2016四川卷.10)(12分)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程,圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑,產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成 色。 (2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105 的土壤樣品液0.1mL,培養(yǎng)一段時間后,平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。 該過程采取的接種方法是 ,每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為 108 個;與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比,此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較 。 (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活,突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中,終止密碼為 ,突變基因表達的蛋白質(zhì)含 個氨基酸。 【答案】(1)尿素 酚紅 紅 (2)稀釋涂布平板法 1.75 少 (3)UGA 115 【解析】(1)由于篩選產(chǎn)脲酶,脲酶能夠催化尿素分解為氨,故應(yīng)以尿素為唯一氮源,培養(yǎng)基中可以加入酚紅指示劑,產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成紅色。 23.(2016新課標2卷.39)[生物——選修1:生物技術(shù)實踐](15分) 蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的,回答下列為題: (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段,在酵母菌細胞的_________________中進行,其產(chǎn)物乙醇與_________________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色,這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗;過程③在酵母菌細胞的________________中進行,與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的增值速度________________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型,該過程需要在________________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度____________(填“低于”或“高于”)第二階段。 (4)醋酸桿菌屬于___________核生物,其細胞結(jié)構(gòu)中(填“含有”或“不含有”)線粒體。 【答案】(15分) (1)細胞質(zhì)基質(zhì) 重鉻酸甲 線粒體 快 (2)有氧 (3)低于 (4)原 不含有 【解析】(1)圖示中的過程①和②分別表示無氧呼吸的第一、第二階段,其場所均為細胞質(zhì)基質(zhì);橙色的重鉻酸甲溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學反應(yīng),變成灰綠色。過程③表示有氧呼吸的第二、第三階段,其場所分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜,即在酵母菌細胞的線粒體中進行。與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的增殖速度快。 (2)醋酸桿菌是一種好氧菌,在氧氣充足的條件下才能進行旺盛的生命活動,因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程,需要在有氧條件下才能完成。 (3)第一階段即果酒的制作,所控制的溫度范圍是18~25℃,第二階段即果醋的制作所控制的溫度范圍是30~35℃,所以第一階段的溫度低于第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于原核生物,其細胞結(jié)構(gòu)中不含線粒體等復(fù)雜的細胞器。 24.(2016新課標Ⅲ卷.39)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。回答下列問題: (1)分離純化乳酸菌時,首先需要用_________________對泡菜濾液進行梯度稀釋,進行梯度稀釋的理由是_________________。 (2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有_________________和_________________。分離純化時應(yīng)挑選出_________________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在-20℃長期保存時,菌液中常需要加入一定量的_________________(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。 【答案】(1)無菌水 泡菜濾液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 (2)鑒別乳酸菌 中和產(chǎn)生的乳酸 具有透明圈 (3)甘油 (2)由題意可知,分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。由此可推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和鑒別能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌;根據(jù)產(chǎn)酸菌在含CaCO3的培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明的原理,分離純化時應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌,然后用平板劃線法進一步分離純化。 25.(2016江蘇卷.29)(9分)為了探索海藻酸鈉固定化對綠球藻生長的影響,以及固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用,科研人員用篩選到的一株綠球藻進行試驗,流程及結(jié)果如下。請回答下列問題: (1)實驗中的海藻酸鈉作用是 ,CaC l2的作用是 。 (2)為洗去凝膠球上殘余的CaC l2和其他污染物,并保持綠球藻活性,宜采用 洗滌。圖1 中1. 0%海藻酸鈉組培養(yǎng)24 h 后,移去凝膠球,溶液呈綠色,原因是______________________。 (3)為探索固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用,應(yīng)選用濃度為 海藻酸鈉制備凝膠球。 (4)圖2中空白凝膠球組Zn2+濃度下降的原因是 。結(jié)合圖1和圖2分析,固定化藻的實驗組24~48h間Zn2+濃度下降速度較快的主要原因是 ;72~96h間Zn2+濃度下降速度較慢的原因有 。 【答案】(1)包埋綠球藻(包埋劑) 與海藻酸鈉反應(yīng)形成形成凝膠球(凝固劑) (2)培養(yǎng)液(生理鹽水) 海藻酸鈉濃度過低(凝膠球孔徑過大) (3)2.0% (4)凝膠球吸附Zn2+ 綠球藻生長(增殖)速度快 綠球藻生長(增殖)速度減慢,溶液中Zn2+濃度較低 26.(2016海南卷.30)回答下列問題: (1)蛋白酶甲、乙、丙三者的活性隨pH的變化如圖所示。通常,用清水洗滌衣服上的新鮮血跡時,不應(yīng)該使用開水,原因是_______________________。若要去除衣服上的血漬,應(yīng)選擇含有_____________________(填“蛋白酶甲”、“蛋白酶乙”或“蛋白酶丙”)的堿性洗衣粉,理由是___________________。 (2)某同學為了洗去衣服上的油漬,洗衣時在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶,該同學的做法___________________(填“合理”或“不合理”),理由是_________________________。 (3)已知溶液的pH可以影響酶的活性,請推測pH影響某種蛋白酶活性的原因可能是其影響了酶和底物分子中_________________(填“羧基和氨基”、“氨基和甲基”、“羧基和甲基”或“甲基和甲基”)等基團的解離狀態(tài)。 【答案】(15分) (1)開水使血中的蛋白質(zhì)變性而沉淀,難以清洗(3分) 蛋白酶丙(1分) 堿性條件下只有蛋白酶丙有活性(4分) (2)不合理(1分) 蛋白酶會降解脂肪酶(4分) (3)羧基和氨基(2分) 27.(2016上海卷.四)回答下列有關(guān)微生物和酶工程的問題。 枯草芽孢桿菌盛產(chǎn)蛋白酶,后者在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟價值,且已大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。 44. 在培養(yǎng)包括枯草芽孢桿菌在內(nèi)的異養(yǎng)型微生物時,培養(yǎng)基營養(yǎng)成分應(yīng)包括水和_______________(用序號組合回答)。 ①淀粉②蛋白質(zhì)③生長因子④葡萄糖⑤無機鹽 為篩選枯草芽孢桿菌的蛋白酶高產(chǎn)株,將分別浸過不同菌株(a~e)的分泌物提取液及無菌水(f)的無菌圓紙片置于含某種高濃度蛋白質(zhì)的平板培養(yǎng)基表面;在37℃恒溫箱中放置2~3天,結(jié)果如圖17. 45. 大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化首選的菌株是_______________;菌株b提取物周圍沒有形成明顯清晰區(qū)的原因是_______________。 圖18 顯示枯草芽孢桿菌的蛋白酶和其它酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù),即酶在不同溫度下保溫足夠長的時間,再在酶活性最高的溫度下測其酶活性。在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中,通常需對發(fā)酵液在60~70℃保溫一定時間,再制備酶制劑。 46.在60~70℃保溫一定時間的作用是__。 A.誘導蛋白酶的熱穩(wěn)定性 B.有利于發(fā)揮蛋白酶的最佳活性 C.裂解枯草芽孢桿菌細胞 D.大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性 47. 枯草芽孢桿菌蛋白酶制備的合理工藝步驟應(yīng)為_____(選擇正確的序號并排序)。 ①過濾 ②干燥 ③破碎 ④濃縮 【答案】44.①②③⑤/②③④⑤ 45.a ①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足;②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足;③分泌的蛋白酶活性低 46.D 47.①④② 47. 枯草芽孢桿菌蛋白酶可以分泌到細胞外,因此不需破碎過程,經(jīng)過濾、濃縮、干燥程序即可。 【考點定位】本題考查微生物培養(yǎng)和酶工程的相關(guān)知識。 【名師點睛】本題考查枯草芽孢桿菌蛋白酶的制備。屬于容易題。解題關(guān)鍵是明確微生物培養(yǎng)的基本條件。本題易錯點是45題第二空和47題。45題第二空錯因在于考慮不周,47題錯因在于未能注意枯草芽孢桿菌蛋白酶可以分泌到細胞外。 28.(2018全國Ⅲ卷,37)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題: (1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用____________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應(yīng)采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落,菌落的含義是_______________。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,可促進______________(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進行厭氧培養(yǎng),可促進_________(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。 (3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是______________________。 【答案】(1)麥芽汁瓊脂 高壓蒸汽 由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體 (2)菌體快速增殖 乙醇產(chǎn)生 (3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟 【解析】(1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高,而且含糖量高,更適合酵母菌;該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌;若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,進行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2,釋放能量多,細胞增殖快;若進行無氧培養(yǎng),進行無氧呼吸,產(chǎn)生酒精和CO2,釋放能量少,增殖慢。 (3)制作面包時,在面粉中添加一定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,產(chǎn)生二氧化碳,二氧化碳是氣體,遇熱膨脹而形成小孔,使得面包松軟多孔。 29.(2018海南卷,30)葡萄酒是葡萄汁經(jīng)酵母菌發(fā)酵而成的。釀制葡萄酒的兩個簡易裝置如圖所示。 回答下列問題: (1)試管中的X溶液有助于維持甲裝置的瓶中氣壓相對穩(wěn)定,與乙裝置相比,用甲裝置釀制葡萄酒的優(yōu)點是____________________(答出兩點即可)。 (2)葡萄汁裝入甲裝置時,要留有約1/3的空間,這種做法的目的是________(答出兩點即可)。 (3)某同學若用乙裝置進行發(fā)酵,并設(shè)置兩個不同處理組(乙A和乙B),乙A裝置中保留一定量的氧氣,乙B裝置中沒有氧氣。在其他條件相同且適宜的情況下,測得一段時間內(nèi)乙A和乙B中酒精含量的變化趨勢及乙A中氧氣含量的變化趨勢如曲線圖所示。 圖中曲線①、②、③依次表示____、____、____含量的變化趨勢。 (4)從細胞呼吸類型看,酵母菌屬于____生物;從同化作用的類型看,酵母菌屬于____(填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”)生物。 【答案】(1)不需要開蓋放氣;避免了因開蓋引起的雜菌污染 (2)為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣;防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出 (3)乙A中的氧氣 乙B中的酒精 乙A中的酒精 (4)兼性厭氧 異養(yǎng) (3)分析題意可知,圖中曲線①、②、③依次表示乙A中的氧氣、乙B中的酒精、乙A中的酒精含量的變化趨勢。 (4)從細胞呼吸類型看,酵母菌屬于兼性厭氧生物;從同化作用的類型看,酵母菌屬于異養(yǎng)生物。 30.(2018全國Ⅱ卷,37)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?;卮鹣铝袉栴}: (1)在實驗室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是________。 (3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能________,在照射前,適量噴灑_________,可強化消毒效果。 (4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度,最可能的原因是__________________________。 【答案】(1)可以 (2)在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少 (3)破壞DNA結(jié)構(gòu) 消毒液 (4)氯氣 (5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 【解析】(1)能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 (2)煮沸消毒法即在100℃時煮沸5-6min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢;巴氏消毒法即在70-75℃時煮30min或在80℃時煮15min,可以殺死微生物,并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此,與煮沸消毒法相比,牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。 (3)因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu),所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前,適量噴灑消毒液,可強化消毒效果。 (4)通常乙醇消毒是75%的酒精,有氣味,影響水質(zhì),不適宜消毒自來水;高錳酸鉀本身有顏色,消毒后溶液呈紫紅色,無法使用;因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。 (5)采用高壓蒸汽滅菌時,鍋內(nèi)的水加熱煮沸,將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡,則會出現(xiàn)壓力達到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。 31.(2018全國Ⅰ卷,37)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。 回答下列問題: (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制_______的生長,加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有__________ (答出兩點即可)。氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有______(答出兩點即可)。 (3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是____________,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_____________。 (4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果: 甲同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的偏落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133; 乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。 有人認為這兩位同學的結(jié)果中,乙同學的結(jié)果可信度低,其原因是____________。 【答案】(1)細菌 選擇 (2)碳源、無機鹽 蛋白質(zhì)、核酸 (3)碘液 淀粉遇碘液顯藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈 (4)乙同學的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差 【解析】(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長,而能抑制其它微生物的生長,鏈霉素是一種抗生素,可以抑制細菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (4)乙同學結(jié)果不合理,因為1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差,不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。 32.(2018江蘇卷,31)酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,請回答下列問題: (1)配制培養(yǎng)基時,按照培養(yǎng)基配方準確稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的_____,及時對培養(yǎng)基進行分裝,并進行___滅菌。 (2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟③中將溫度約___(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后倒置培養(yǎng)。 (3)挑取分離平板中長出的單菌落,按步驟④所示進行劃線。下列敘述合理的有______。 a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌 b.劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落 c.挑取菌落時,應(yīng)挑取多個菌落,分別測定酵母細胞中甲醇的含量 d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株 (4)步驟⑤中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和______供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細胞密度,將發(fā)酵液稀釋1 000倍后,經(jīng)等體積臺盼藍染液染色,用2516型血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù),理論上___色細胞的個數(shù)應(yīng)不少于______,才能達到每毫升3109個活細胞的預(yù)期密度。 【答案】(1)pH 高壓蒸汽(濕熱) (2)50 ℃ (3)a、b、d (4)氧氣 無 30 【解析】(1)配制培養(yǎng)基的操作步驟為稱量→溶化→定容→調(diào)pH→培養(yǎng)基的分裝→包扎→滅菌,因此微生物的培養(yǎng)基配制好后應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH,再分裝。常見的滅菌方法有:干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌。培養(yǎng)基適宜用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。 (2)在步驟③中,待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行倒平板。 (3)在劃線過程中,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌,以防止雜菌污染,a正確;劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面,否則將不能形成正常菌落,b正確;該實驗的目的是獲得利用工業(yè)廢甲醇作為碳源的酵母菌,不需要測定酵母菌中的甲醇含量,c錯誤;培養(yǎng)基中的甲醇濃度越高,此種培養(yǎng)基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越強,因此可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株,d正確。- 1.請仔細閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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